毛细管电泳分析方法的工作原理介绍(一)

毛细管电泳(capillary electrophoresis, CE)又叫高效毛细管电泳(HPCE), 是近年来发展最快的分析方法之一。1981年Jorgenson和Lukacs首先提出在75μm内径毛细管柱内用高电压进行分离, 创立了现代毛细管电泳。1984年Terabe等建立了胶束毛细管电动力学色谱。1987年Hjerten 建立了毛细管等电聚焦, Cohen和Karger提出了毛细管凝胶电泳。1988~1989年出现了第一批毛细管电泳商品仪器。短短几年内, 由于CE符合了以生物工程为代表的生命科学各领域中对多肽、蛋白质(包括酶,抗体)、核苷酸乃至脱氧核糖核酸(DNA)的分离分析要求, 得到了迅速的发展。 CE是经典电泳技术和现代微柱分离相结合的产物。CE和高效液相色谱法(HPLC)相比, 其相同处在于都是高效分离技术, 仪器操作均可自动化, 且二者均有多种不同分离模式。二者之间的差异在于:CE......阅读全文

毛细管电泳的分离分析方法

  CE 是在传统的电泳技术基础上于本世纪60 年代末由Hjerten 发明的,其利用小的毛细管代替传统的大电泳槽,使电泳效率提高了几十倍。此技术从80 年代以来发展迅速,是生物化学分析工作者与生化学家分离、定性多肽与蛋白类物质的有利工具。CE 根据应用原理不同可分为以下几种;毛细管区带电泳Capi

毛细管电泳(Capillary-electrophoresis,CE)——分离分析方法

毛细管电泳(Capillary electrophoresis,CE)--分离分析方法CE是在传统的电泳技术基础上于本世纪60年代末由Hjerten发明的,其利用小的毛细管代替传统的大电泳槽,使电泳效率提高了几十倍。此技术从80年代以来发展迅速,是生物化学分析工作者与生化学家分离、定性抗原肽与蛋白

毛细管电泳分析方法的工作原理介绍(二)

CE现有六种分离模式,分述如下:    1. 毛细管区带电泳(capillary zone electrophoresis, CZE), 又称毛细管自由电泳, 是CE中最基本、应用最普遍的一种模式。前述基本原理即是CZE的基本原理。    2. 胶束电动毛细管色谱 (micellar elect

毛细管电泳分析方法的工作原理介绍(一)

毛细管电泳(capillary electrophoresis, CE)又叫高效毛细管电泳(HPCE), 是近年来发展最快的分析方法之一。1981年Jorgenson和Lukacs首先提出在75μm内径毛细管柱内用高电压进行分离, 创立了现代毛细管电泳。1984年Terabe等建立了胶束毛细

毛细管电泳色谱仪分析的样品预浓缩方法

毛细管电泳色谱仪(CE)分析的样品预浓缩方法有堆积进样、电场聚焦进样、等速电泳进样、固相萃取、液液分配色谱、中空纤维液相微萃取、吸附色谱和亲和色谱等。一、堆积进样:1、原理:根据样品塞子与CE缓冲液的导电性差异来实现。若样品的导电性小于CE缓冲液,样品塞子上的电场强度高于缓冲液,样品塞子中离子的迁移

毛细管电泳色谱仪分析基因突变的方法

基因突变分析是遗传性疾病基因诊断和致病基因分离鉴定的基础,突变是一个或多个脱氧核糖核苷酸的构成、复制或表形功能的异常变化,即遗传物质结构改变引起遗传信息改变。随着对疾病病因和发病机制研究的不断深入,人类对疾病的认识逐渐深入到基因诊断的水平,传统技术多用琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳分离野生型DN

毛细管电泳仪毛细管电泳维护保养方法

维护保养清洁制冷槽的步骤1. 用螺丝启讲制冷槽holder松开,从底部取出槽。2. 用制冷清洁压力器尽可能的取尽其中的液体,用羊毛刷刷净槽内。3. 托盘内的卡槽归位,关好门。压缩机托盘的清洁在电泳仪设备的底部有一个托盘,它收集来自制冷器的废液,每周应检查是否已满,尤其是潮湿的情况下需进行检查,如果内

毛细管电泳检测方法分类

毛细管电泳通常用到的检测方法有吸收光谱,荧光光谱,热镜,拉曼光谱,质谱和电化学方法。

高效毛细管电泳色谱仪分析的样品预浓缩方法

   高效毛细管电泳色谱仪(CE)分析的样品预浓缩方法有堆积进样、电场聚焦进样、等速电泳进样、固相萃取、液液分配色谱、中空纤维液相微萃取、吸附色谱和亲和色谱等。一、堆积进样:  1、原理:        根据样品塞子与CE缓冲液的导电性差异来实现。若样品的导电性小于CE缓冲液,样品塞子上的电场强度高

毛细管电泳手性药物分析

  手性药物的每个对映异构体在生物环境中表现出不同的药效作用,在药物吸收、分布、代谢、排泄等方面存在立体选择性差异。为了能准确地了解药效和安全用药,发展和建立简单、快速的手性药物对映体的奋力分析方法,并用于临床研究和医药质量控制,显得日益迫切。CE因其高效、快速、选择性强的特点而成为目前最有效的手性

毛细管电泳的微全分析

1990年瑞士Ciba-Geigy公司的Manz和Widmer首次提出微全分析系统(Miniaturized total chemical analysis system,μ-TAS)的概念和设计,把微全分析系统的主要构型定位为一般厚度不超过5 mm,面积为数平方厘米至十几平方厘米的平板芯片(包括微

毛细管电泳仪分析优点

毛细管电泳仪(HPCE)是以毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,利用荷电粒子之间的淌度差异和分配系数差异进行分离,是分析科学继液相色谱仪之后的又一重大进展,使分析科学从微升级进入到了纳升级水平,不仅使单细胞乃至单分子分析成为可能,也使蛋白质和核酸等生物大分子分析有了新的转机。一、柱效高:理论塔

毛细管电泳的微全分析

  1990年瑞士Ciba-Geigy公司的Manz和Widmer首次提出微全分析系统(Miniaturized total chemical analysis system,μ-TAS)的概念和设计,把微全分析系统的主要构型定位为一般厚度不超过5 mm,面积为数平方厘米至十几平方厘米的平板芯片(包

毛细管电泳仪毛细管电泳仪的选择方法

毛细管电泳仪需要用到高压电源,它能提供高压直流电场驱动力的直流电源。应该具有工作稳定、性能可靠、操作方便、测量准确、数据显示清晰和高性价比等优点。可以与光学仪器和分析仪器配套使用。

毛细管电泳法的检测方法

毛细管电泳通常用到的检测方法有吸收光谱,荧光光谱,热镜,拉曼光谱,质谱和电化学方法。

毛细管电泳仪故障分析一

无电泳峰1、检查结果:没有电流。可能原因:毛细管堵塞或断裂。解决方案:用水冲洗毛细管,观察是否有水流出。若无水流出,拆下卡盒检查毛细管两端和窗口是否断裂。若毛细管没断裂,可用水反向高压冲洗。缓冲液需过滤,将样品过滤或离心去除其中的颗粒。2、检查结果:电流波动很大,甚至几乎消失。可能原因:缓冲液中有气

毛细管电泳仪故障分析九

迁移时间可重复,但峰面积重复性不好1、检查结果:重新切割毛细管入口,问题解决。可能原因:毛细管入口切口不平齐。解决方案:重新切割毛细管入口。2、检查结果:重新切割毛细管入口,问题仍然存在。可能原因:若电动进样可保持重现,则压力控制或气路存在问题。解决方案:检修。

毛细管电泳仪故障分析五

迁移时间不稳定1、检查结果:出峰时间不稳定且无规律。可能原因:缓冲液与毛细管内壁平衡较慢。解决方案:每次样品运行之间避免用NaOH冲洗毛细管。2、检查结果:出峰时间依次后延。可能原因:样品中物质易在毛细管内壁吸附。解决方案:首先在每次样品运行之前用0.1N NaOH溶液短时间冲洗毛细管,观察迁移时间

毛细管电泳仪故障分析六

峰形和出峰时间不稳定1、检查结果:更换缓冲液种类,峰形和出峰时间稳定。可能原因:缓冲液不稳定、易电解或样品在原缓冲液条件下不稳定。解决方案:更换其它种类的缓冲液。2、检查结果:更换缓冲液种类,峰形和出峰时间仍不稳定。可能原因:样品中物质易在毛细管内壁吸附。解决方案:采用涂层毛细管或对样品进行前处理。

毛细管电泳应用于中药分析

中药品种繁多、药材产地各异、成分复杂,无论是药材还是成药的分析,都是一项非常艰难的任务。中药分析工作用现代化仪器设备和科技手段(如薄层色谱、HPLC等)虽取得巨大进展和成就,但往往只是对药材和成药成百上千个成分中的一个或几个成分的分析,实际只是一种象征性的代表式分析,与之起化学和药理效应的实际组合成

毛细管电泳仪故障分析七

电流泄漏1、检查结果:毛细管断裂。可能原因:毛细管内缓冲液流出,造成电流泄漏。解决方案:更换毛细管,并用水清洗光纤头和检测窗口。2、检查结果:毛细管无断裂。可能原因:实验环境湿度过大。解决方案:使用抽湿机或空调。湿度过大时,可在仪器关闭时放置干燥剂,但仪器运行时一定要将干燥剂取出。

毛细管电泳仪故障分析四

电泳峰过宽1、检查结果:降低样品进样量,有改善。可能原因:样品浓度太大。解决方案:可降低样品浓度或减少进样量。2、检查结果:降低样品进样量,无改善。可能原因:样品本身性质不均一。解决方案:此原因主要是针对蛋白质样品,小分子样品发生的概率较低。

毛细管电泳仪分析的特点

毛细管电泳仪(HPCE)是以毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,利用荷电粒子之间的淌度差异和分配系数差异进行分离,是分析科学继液相色谱仪之后的又一重大进展,使分析科学从微升级进入到了纳升级水平,不仅使单细胞乃至单分子分析成为可能,也使蛋白质和核酸等生物大分子分析有了新的转机。一、优点:1、柱效

毛细管电泳仪故障分析二

电泳峰拖尾1、可能原因:毛细管窗口未开或窗口位置不正。解决方案:打开毛细管检测窗口或调整窗口位置。2、可能原因:样品在毛细管内壁吸附。解决方案:对于蛋白质和核酸样品,应尽量采用涂层毛细管、极端pH 条件或动态涂层,防止样品吸附。

高效毛细管电泳仪分析优点

         高效毛细管电泳仪(HPCE)是以毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,利用荷电粒子之间的淌度差异和分配系数差异进行分离,是分析科学继高效液相色谱仪之后的又一重大进展,使分析科学从微升级进入到了纳升级水平,不仅使单细胞乃至单分子分析成为可能,也使蛋白质和核酸等生物大分子分析有了新

毛细管电泳仪故障分析十一

冷却液泄漏1、可能原因:卡盒内垫圈和卡子漏装或装错顺序。解决方案:严格按安装顺序安装。2、可能原因:仪器内部管路密封不严。解决方案:检修。

毛细管电泳仪故障分析三

电泳峰不对称1、可能原因:毛细管入口切口不平齐。解决方案:重新切割毛细管入口。2、可能原因:缓冲溶液与样品溶液电解率差别过大。解决方案:采用缓冲液作为样品溶剂。

毛细管电泳仪故障分析十

毛细管或电极易折断1、可能原因:瓶盖老化。解决方案:换瓶盖。2、可能原因:电极不垂直。解决方案:将电极拉直。

毛细管电泳分析技术的展望

  CE技术的研究和应用,给药物分析领域和药品检验工作带来了生机与活力,无疑将对该专业技术的发展及提高起着重要的推动和促进作用。尤其以对基因工程药物、中成药复方制剂的分析和中药材种属的鉴定,令人瞩目。但任何事物都有两面性,它也有弱点和不足,如有的药物用CE分析精确度还不够高;有的灵敏度很高,但专属性

毛细管电泳仪故障分析八

无法加气压1、检查结果:更换后问题解决。可能原因:瓶颈处有液体,导致瓶塞易滑。解决方案:向瓶中装液体时不要过满,也不要沾湿瓶颈。2、检查结果:若瓶塞无问题,可先采用真空方式,若真空方式可使用,但压力仍不可用。可能原因:压力系统存在问题。解决方案:检修。