毛细管电泳色谱仪分析基因突变的方法
基因突变分析是遗传性疾病基因诊断和致病基因分离鉴定的基础,突变是一个或多个脱氧核糖核苷酸的构成、复制或表形功能的异常变化,即遗传物质结构改变引起遗传信息改变。随着对疾病病因和发病机制研究的不断深入,人类对疾病的认识逐渐深入到基因诊断的水平,传统技术多用琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳分离野生型DNA分子和突变DNA分子,但费时、费力,不适合自动化,而毛细管电泳色谱仪(CE)可快速获得基因突变模式的信息。CE分析基因突变的方法有单链构象多态性分析、限制片段长度多态性分析、异双聚体DNA多态性分析、双脱氧指纹谱图分析和毛细管电泳分子信标技术等。一、毛细管电泳-单链构象多态性分析:单链构象多态性分析检测基因突变的原理是将DNA变性形成单链,由于核苷酸不同而形成不同的二级空间构象。在毛细管电泳-单链构象多态性分析中,迁移速度主要取决于其二级空间构象,不同单链的DNA的迁移速度不同。如果基因的某些位点发生碱基突变,会引起单链DNA二级空......阅读全文
毛细管电泳色谱仪分析基因突变的方法
基因突变分析是遗传性疾病基因诊断和致病基因分离鉴定的基础,突变是一个或多个脱氧核糖核苷酸的构成、复制或表形功能的异常变化,即遗传物质结构改变引起遗传信息改变。随着对疾病病因和发病机制研究的不断深入,人类对疾病的认识逐渐深入到基因诊断的水平,传统技术多用琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳分离野生型DN
毛细管电泳色谱仪在基因突变分析中的应用
毛细管电泳色谱仪简称毛细管电泳仪(CE),是以毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,利用荷电粒子之间的淌度差异和分配系数差异进行分离,是分析科学继液相色谱仪之后的又一重大进展,使分析科学从微升级进入到了纳升级水平,不仅使单细胞乃至单分子分析成为可能,也使蛋白质和核酸等生物大分子分析有了新的转机。
毛细管电泳色谱仪分析的样品预浓缩方法
毛细管电泳色谱仪(CE)分析的样品预浓缩方法有堆积进样、电场聚焦进样、等速电泳进样、固相萃取、液液分配色谱、中空纤维液相微萃取、吸附色谱和亲和色谱等。一、堆积进样:1、原理:根据样品塞子与CE缓冲液的导电性差异来实现。若样品的导电性小于CE缓冲液,样品塞子上的电场强度高于缓冲液,样品塞子中离子的迁移
高效毛细管电泳色谱仪分析的样品预浓缩方法
高效毛细管电泳色谱仪(CE)分析的样品预浓缩方法有堆积进样、电场聚焦进样、等速电泳进样、固相萃取、液液分配色谱、中空纤维液相微萃取、吸附色谱和亲和色谱等。一、堆积进样: 1、原理: 根据样品塞子与CE缓冲液的导电性差异来实现。若样品的导电性小于CE缓冲液,样品塞子上的电场强度高
毛细管电泳色谱仪分析的理想目标
21世纪是生命科学大发展的世纪,人类基因组计划基本完成后,后基因组时代的基因组学和蛋白组学将快速发展,功能基因和蛋白质的分离检测对毛细管电泳色谱仪(HPCE)提出更高的期望。将所有的化学反应集成在一块很小的芯片(Chip)上,建立有一个实验室功能的芯片是HPCE发展的前景。Chip是以晶体硅、石英玻
毛细管电泳色谱仪分离分析模式
毛细管电泳色谱仪(CE)是以毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,利用荷电粒子之间的淌度差异和分配系数差异进行分离,是分析科学继液相色谱仪之后的又一重大进展,使分析科学从微升级进入到了纳升级水平,正成为生物样品zui重要的分离分析手段。CE分离分析模式有毛细管电色谱、毛细管区带电泳、毛细管胶束电
毛细管电泳的分离分析方法
CE 是在传统的电泳技术基础上于本世纪60 年代末由Hjerten 发明的,其利用小的毛细管代替传统的大电泳槽,使电泳效率提高了几十倍。此技术从80 年代以来发展迅速,是生物化学分析工作者与生化学家分离、定性多肽与蛋白类物质的有利工具。CE 根据应用原理不同可分为以下几种;毛细管区带电泳Capi
毛细管电泳色谱仪分析的关键问题
毛细管电泳色谱仪(CE)是以毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,利用荷电粒子之间的淌度差异和分配系数差异进行分离,是分析科学继液相色谱仪之后的又一重大进展,使分析科学从微升级进入到了纳升级水平,不仅使单细胞乃至单分子分析成为可能,也使蛋白质和核酸等生物大分子分析有了新的转机。由于CE溶质区带
毛细管电泳色谱仪分析中的电泳现象
毛细管电泳色谱仪(CE)是以毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,利用带电粒子之间的电泳淌度差异和分配系数差异进行分离,是分析科学继液相色谱仪之后的又一重大进展,使分析科学从微升级进入到了纳升级水平。一、电泳:电泳是指带电粒子在电场的作用下,向着与其电性相反的电极方向移动的现象。二、电泳技术:电
毛细管电泳色谱仪分析中的Zeta电位
毛细管电泳色谱仪(CE)是以毛细管为分离通道,以电渗流为驱动力,利用带电粒子之间的淌度差异和分配系数差异进行分离,是分析科学继液相色谱仪之后的又一重大进展,使分析科学从微升级进入到了纳升级水平,不仅使单细胞乃至单分子分析成为可能,也使蛋白质和核酸等生物大分子分析有了新的转机。电渗流是CE的主要驱动力
毛细管电泳色谱仪分析中的电渗现象
毛细管电泳色谱仪(CE)是以毛细管为分离通道,以电渗流为驱动力,利用带电粒子之间的淌度差异和分配系数差异进行分离,电渗流在CE中起着极其重要的作用。一、电渗:电渗是指在电场作用下,毛细管中液体沿毛细管内表面或或固相多孔物质内液体沿固体表面移动的现象。毛细管一般采用石英管,管内表面为硅胶,当内充缓冲液
毛细管电泳色谱仪分离分析模式详解
分析模式详解。毛细管电泳色谱仪(CE)是以毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,利用荷电粒子之间的淌度差异和分配系数差异进行分离,是分析科学继液相色谱仪之后的又一重大进展,使分析科学从微升级进入到了纳升级水平,正成为生物样品zui重要的分离分析手段。CE分离分析模式有毛细管电色谱、毛细管区带电泳
控制毛细管电泳色谱仪焦耳热的方法
毛细管电泳色谱仪是以毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,利用荷电粒子之间的淌度差异和分配系数差异进行分离。毛细管溶液中有电流通过时会产生焦耳热,散热过程中,在毛细管内形成径向温度梯度(中心温度高),破坏了扁平塞子流型,导致谱带展宽。控制焦耳热的方法如下:一、降低电场梯度:1、焦耳热成比例降低。
毛细管电泳色谱仪填充柱制备方法
毛细管电色谱仪(CEC)填充毛细管柱是将固定相填充到毛细管中,通过两端烧结柱塞将固定相保持在毛细管中而成,其最大优点是可利用众多的HPLC固定相,根据化合物与固定相的作用不同实现分离,在CEC中应用最广泛。填充毛细管柱制备方法有高压匀浆填充法、电动填充法和超临界CO2法等。一、高压匀浆填充法:高压匀
毛细管电泳色谱仪在药物分析中的应用
毛细管电泳色谱仪简称毛细管电泳仪(CE),是以毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,利用带电粒子之间的淌度差异和分配系数差异进行分离,是分析科学继液相色谱仪之后的又一重大进展,使分析科学从微升级进入到了纳升级水平,在药物分析中具有极大的发展潜力。一、手性化合物分离:大量研究表明,生命活动与生物分
毛细管电泳色谱仪分析的在线样品富集技术
毛细管电泳色谱仪(CE)是以毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,利用荷电粒子之间的淌度差异和分配系数差异进行分离,是分析科学继液相色谱仪之后的又一重大进展,使分析科学从微升级进入到了纳升级水平,不仅使单细胞乃至单分子分析成为可能,也使蛋白质和核酸等生物大分子分析有了新的转机。由于CE溶质区带的
毛细管电泳色谱仪分析中的电泳和电渗
毛细管电泳色谱仪简称毛细管电泳仪(CE),是以毛细管为分离通道,以电渗流为驱动力,利用带电粒子之间的电泳淌度差异和分配系数差异进行分离,电泳淌度不同是电泳分离的内因和前提。一、电泳:1、电泳现象:电泳现象是指带电粒子在电场的作用下,向着与其电性相反的电极方向移动的现象。2、电泳技术:电泳技术是指利用
毛细管电泳色谱仪电泳淌度的测定方法
毛细管电泳色谱仪是以毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,利用荷电粒子之间的淌度差异和分配系数差异进行分离。电泳淌度的测定方法有电中性标志物法、电流法和流动电势法。一、电中性标志物法:在给定检测器上要有响应,214或200nm UV检测时常用二甲基甲酰胺和二甲亚砜测定电泳淌度。例:石英毛细管长度
毛细管电泳色谱仪在环境分析中的应用
毛细管电泳色谱仪(HPCE)是以毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,利用荷电粒子之间的淌度差异和分配系数差异进行分离,是分析科学继液相色谱仪之后的又一重大进展。HPCE只需纳升级进样量和极少量化学试剂,柱价低,易清洗,方法简便,分析时间短,相对而言,符合绿色化学的要求,不污染环境,特别适用于环
毛细管电泳色谱仪在DNA分析中的应用前景
毛细管电泳色谱仪简称毛细管电泳仪(CE),是以毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,利用荷电粒子之间的淌度差异和分配系数差异进行分离,是分析科学继液相色谱仪之后的又一重大进展,使分析科学从微升级进入到了纳升级水平,不仅使单细胞乃至单分子分析成为可能,也使蛋白质和核酸等生物大分子分析有了新的转机。
高效毛细管电泳仪在核酸分析中的应用
高效毛细管电泳仪(CE)是以毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,利用荷电粒子之间的淌度差异和分配系数差异进行分离,是分析科学继高效液相色谱仪之后的又一重大进展,使分析科学从微升级进入到了纳升级水平,不仅使单细胞乃至单分子分析成为可能,也使蛋白质和核酸等生物大分子分析有了新的转机
毛细管电泳仪在核酸分析中的应用
毛细管电泳仪(CE)是以毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,利用荷电粒子之间的淌度差异和分配系数差异进行分离,是分析科学继液相色谱仪之后的又一重大进展,使分析科学从微升级进入到了纳升级水平,不仅使单细胞乃至单分子分析成为可能,也使蛋白质和核酸等生物大分子分析有了新的转机。一、在DNA测序中的应
高效毛细管电泳仪在核酸分析中的应用
高效毛细管电泳仪(CE)是以毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,利用荷电粒子之间的淌度差异和分配系数差异进行分离,是分析科学继高效液相色谱仪之后的又一重大进展,使分析科学从微升级进入到了纳升级水平,不仅使单细胞乃至单分子分析成为可能,也使蛋白质和核酸等生物大分子分析有了新的转
毛细管电泳色谱仪的应用
毛细管电泳色谱仪是以毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,利用荷电粒子之间的淌度差异和分配系数差异进行分离,是分析科学继液相色谱仪之后的又一重大进展,使分析科学从微升级进入到纳升级水平,应用十分广泛。一、在蛋白质和多肽分析中的应用: 1、肽、蛋白质和糖蛋白的鉴别。 2、结构分析。 3、纯度
毛细管电泳色谱仪的用途
毛细管电泳色谱仪简称毛细管电泳仪(CE),是以毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,利用带电粒子之间的淌度差异和分配系数差异进行分离,是分析科学继液相色谱仪之后的又一重大进展,使分析科学从微升级进入到了纳升级水平,用途广泛。一、手性化合物分离:大量研究表明,生命活动与生物分子的手性密切相关,构成
毛细管电泳色谱仪的应用
毛细管电泳色谱仪(HPCE)是以毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,利用带电粒子之间的淌度差异和分配系数差异进行分离,主要应用领域是生命科学,分离对象主要涉及氨基酸、多肽、蛋白质和核酸等生物分子。HPCE一开始就紧紧地结合这一重点应用领域,开展了消除毛细管壁吸附和提高分离度等一系列研究。至今,
色谱仪分析的定性方法
色谱仪是根据样品组分在色谱柱中保留值的不同进行定性,定性方法有:一、根据色谱保留值进行定性。二、利用相对保留值进行定性。三、混合进样。四、多柱法。五、保留指数法。六、联用技术。七、利用选择性检测器。
色谱仪分析的定量方法
色谱仪分析的定量方法有归一化法、内标法和外标法。一、归一化法:归一化法是把所有出峰组分的含量之和按100%计的定量方法。 Pi% =(mi/m)×100% =Aifi′/(∑Aifi′)×100%式中:Pi%为被测组分i的百分含量,A1、A2…An为组分1~n的峰面积,f1′、f2′…
色谱仪分析的定量方法
色谱仪分析的定量方法有归一化法、内标法和外标法。一、归一化法:归一化法是把所有出峰组分的含量之和按100%计的定量方法。Pi%=(mi/m)×100%=Aifi′/(∑Aifi′)×100%式中:Pi%为被测组分i的百分含量,A1、A2…An为组分1~n的峰面积,f1′、f2′…fn′为组分1~n的
色谱仪分析的定性方法
色谱仪分析的定性方法有利用保留值与已知物质对照定性、利用保留值经验规律定性和利用文献保留值定性等方法。一、利用保留值与已知物质对照定性:1、利用保留时间定性:在同一色谱条件下,分别测定样品中各组分和已知纯物质的保留时间,样品中某组分的保留时间与已知纯物质的保留时间相同者可能是同一物质。利用保留时间定