流动相中缓冲盐的正确使用方法
1. 使用前的处理:在使用缓冲盐作流动相之前需要用不含缓冲盐的流动相冲洗色谱柱,直至基线平稳。原则上,用于冲洗的流动相与分析时所用的流动相含水的比例相同(或含水更多),不同的只是用于冲洗用的流动相中不含缓冲盐。理由:缓冲盐通常易溶于水,难溶于有机溶剂。用含缓冲盐的(特别是做流动相的水为饱和的缓冲盐溶液时)流动相进行分析时,如果分析前色谱柱中用于保存色谱柱的流动相中含水的比例相对较小,不先冲洗掉,接下来做样品的时候所用的流动相中如果有机溶剂含量大,而其比例中所含的水又不足以溶解该缓冲盐时,缓冲盐将会在色谱柱柱体上析出,沉积下来,这将可能导致上述对色谱柱的损害。2. 使用后的处理:用与分析时含水比例相同的流动相(与分析用流动相唯一的区别是,用于冲洗的流动相不含缓冲盐)进行冲洗约30min,直至基线平稳。如果该色谱柱在接下来很长的一段时间内不使用,要长期保存,则需再加。......阅读全文
流动相为含缓冲盐流动相,走完样品应该怎么冲柱子
要看色谱柱C18接的是什么键,不同的键对水的耐受性不同,有的柱子是不怕纯水做流动相的含缓冲盐肯定先用10%甲醇水冲洗,含有蛋白如果是能耐纯水的色谱柱一般是用甲酸或者乙酸调PH大于2的水清洗
液相流动相中缓冲盐的作用是什么
1. 使用前的处理: 在使用缓冲盐作流动相之前需要用不含缓冲盐的流动相冲洗色谱柱,直至基线平稳。原则上,用于冲洗的流动相与分析时所用的流动相含水的比例相同(或含水更多),不同的只是用于冲洗用的流动相中不含缓冲盐。理由:缓冲盐通常易溶于水,难溶于有机溶剂。用含缓冲盐的(特别是做流动相的水为饱和
液相流动相中缓冲盐的作用是什么
. 使用前的处理: 在使用缓冲盐作流动相之前需要用不含缓冲盐的流动相冲洗色谱柱,直至基线平稳。原则上,用于冲洗的流动相与分析时所用的流动相含水的比例相同(或含水更多),不同的只是用于冲洗用的流动相中不含缓冲盐。理由:缓冲盐通常易溶于水,难溶于有机溶剂。用含缓冲盐的(特别是做流动相的水为饱和的
高效液相色谱中流动相常用的缓冲盐有哪些
冲柱时间的长短,要看你的色谱柱。柱长决定流动相的缓冲时间。按照标准执行,需要冲10倍的柱体积。不过如果是研发做实验,通常会节省一些时间。250mm的长柱都是至少要冲色谱柱半个小时也就够了。反相色谱柱,比如C8和C18色谱柱会先用10%的甲醇水(或乙腈水)来过渡半小时,然后冲缓冲盐的流动相平衡进样。结
高效液相色谱中流动相常用的缓冲盐有哪些
冲柱时间的长短,要看你的色谱柱。柱长决定流动相的缓冲时间。按照标准执行,需要冲10倍的柱体积。不过如果是研发做实验,通常会节省一些时间。250mm的长柱都是至少要冲色谱柱半个小时也就够了。反相色谱柱,比如C8和C18色谱柱会先用10%的甲醇水(或乙腈水)来过渡半小时,然后冲缓冲盐的流动相平衡进样。结
液相流动相中有机溶剂和缓冲盐各有什么作用
有机溶剂主要是起到洗脱的作用,样品能在柱子里完全被洗脱主要还是有机溶剂的作用,而使样品能在柱子里面保留时间延长主要是水相的作用,分离是有机相和水相与柱子的固定相三者的共同作用(分配作用),而水相中的缓冲盐,主要是起到抑制样品解离的作用,使样品成分子状态,峰型较好,一般是酸样加酸,碱样加碱,也就是我们
液相流动相中有机溶剂和缓冲盐各有什么作用
有机溶剂主要是起到洗脱的作用,样品能在柱子里完全被洗脱主要还是有机溶剂的作用,而使样品能在柱子里面保留时间延长主要是水相的作用,分离是有机相和水相与柱子的固定相三者的共同作用(分配作用),而水相中的缓冲盐,主要是起到抑制样品解离的作用,使样品成分子状态,峰型较好,一般是酸样加酸,碱样加碱,也就是我们
液相流动相中有机溶剂和缓冲盐各有什么作用
有机溶剂主要是起到洗脱的作用,样品能在柱子里完全被洗脱主要还是有机溶剂的作用,而使样品能在柱子里面保留时间延长主要是水相的作用,分离是有机相和水相与柱子的固定相三者的共同作用(分配作用),而水相中的缓冲盐,主要是起到抑制样品解离的作用,使样品成分子状态,峰型较好,一般是酸样加酸,碱样加碱,也就是我们
液相流动相中有机溶剂和缓冲盐各有什么作用
有机溶剂主要是起到洗脱的作用,样品能在柱子里完全被洗脱主要还是有机溶剂的作用,而使样品能在柱子里面保留时间延长主要是水相的作用,分离是有机相和水相与柱子的固定相三者的共同作用(分配作用),而水相中的缓冲盐,主要是起到抑制样品解离的作用,使样品成分子状态,峰型较好,一般是酸样加酸,碱样加碱,也就是我们
流动相中缓冲盐的正确使用方法
1. 使用前的处理:在使用缓冲盐作流动相之前需要用不含缓冲盐的流动相冲洗色谱柱,直至基线平稳。原则上,用于冲洗的流动相与分析时所用的流动相含水的比例相同(或含水更多),不同的只是用于冲洗用的流动相中不含缓冲盐。理由:缓冲盐通常易溶于水,难溶于有机溶剂。用含缓冲盐的(特别是做流动相的水为饱和的缓冲盐溶
液相色谱流动相中缓冲液有那些作用
有很多,比如酸类的:醋酸,磷酸,TFA等缓冲液;碱类的:三乙胺,二乙胺。还有盐类的:磷酸二氢钾,酸酸氢二钾等。作用主要就是调节PH,防止样品解离,便于分离,峰型更好。
质谱流动相盐的最大浓度是多少
不能超过50%。质谱流动相盐的比例最高不能超过50%,因为盐的浓度一般在0.01~0.05M之间,过高的盐浓度,在有机相高、温度低时易析出,杜塞柱子。
缓冲盐对基线噪音的影响
缓冲盐对基线噪音的影响在反相液相色谱中常用的缓冲盐主要包括磷酸盐,醋酸铵,甲酸胺,碳酸氢铵,等。其中磷酸盐以其耗费低,纯度高,缓冲pH范围宽(2-3.1,6.2-8.2),背景吸收低等特点,成为使用最多的盐类;而醋酸铵,甲酸胺,碳酸氢铵等可挥发性盐,则可与MS兼容。如下图9A与9B所示,使用磷酸盐的
流动相脱气
流动相脱气对于避免HPLC系统出问题,顺利得到一个理想的数据是一个很有效的措施。HPLC系统内是不能够有气泡存在的。HPLC泵在输送液体时要产生很大的压力,由于气体的压缩比与液体相比大的多,因而当气泡存在时,你将观察到瞬间的流速降低和系统压力下降。如果这个气泡足够大,液相泵将不能输送任何溶剂,而且如
液相色谱仪分析中的缓冲溶液和流动相添加物
液相色谱仪分析中的缓冲溶液是由磷酸、醋酸及其它弱酸等和它们的盐所构成的水溶液,流动相添加物主要指为了分离某些化合物而在流动相中添加的一些物质。一、缓冲溶液:在液相色谱分析过程中常使用缓冲溶液作为流动相,在流动相中添加少量的酸,以保持流动相pH值,提供一定的离子强度,通过控制酸性、碱性化合物的离解度或
流动相的特点和常见的流动相介绍
色谱过程中携带待测组分向前移动的物质称为流动相。与固定相处于平衡状态、带动样品向前移动的另一相。用作流动相的物质有:气体、液体、超临界流体等。常见的流动相主要有:乙腈-水溶液、乙腈-醋酸水溶液、甲醇-水溶液、乙腈-磷酸水溶液等。
流动相中含有盐时收集液该如何除盐?
流动相中含有盐时,收集液该如何除盐?选用挥发性酸,碱或盐(如醋酸铵)是否会在挥干溶剂或冻干过程中直接除去?一般可以采用离子吸附的办法去掉(可以参考离子吸附有关技术)。但也是稍微麻烦的事情,最好,不加加酸碱盐,如果要加的话最好,要加挥发性的或者对产品或者检测没有干扰的。可用G25脱盐,它是安马西亚出的
液质流动相与液相流动相有什么不同
液质的流动相要求不能含有不挥发性的盐类,如果非要加入的话,质谱要及时清洗。使用液相是因为要进行物质的结构确证。
液相流动相的使用
a、流动相对样品具有一定的溶解能力b、流动相具有一定惰性,与样品不产生化学反应(特殊情况除外)。c、流动相的黏度要尽量小d、流动相的物化性质要与使用的检测器相适应e、流动相沸点不要太低,否则容易产生气泡,导致实验无法进行。f、在流动相配制好后,一定要进行脱气。对于一根特定的色谱柱,要追求最佳柱效,最
液相色谱流动相脱气
流动相的脱气HPLC所用流动相必须预先脱气,否则容易在系统内逸出气泡,影响泵的工作。气泡还会影响柱的分离效率,影响检测器的灵敏度、基线稳定性,甚至使无法检测。(噪声增大,基线不稳,突然跳动)。此外,溶解在流动相中的氧还可能与样品、流动相甚至固定相(如烷基胺)反应。溶解气体还会引起溶剂PH的变化,对分
液相流动相如何脱气
流动相溶液往往因溶解有氧气或混入了空气影响液相色谱的操作性能,在泵中产生气泡使流速不稳,气泡大时会在泵头形成空穴。气泡进入检测器后会在色谱图上出现尖锐的噪音峰,降低响应甚至导致信号消失。流动相中的氧对光电检测器影响最大,使紫外检测器基线增高,低波长检测时信号被抵消。在荧光检测中,溶解氧还会使荧光淬灭
液相流动相如何脱气
流动相溶液往往因溶解有氧气或混入了空气影响液相色谱的操作性能,在泵中产生气泡使流速不稳,气泡大时会在泵头形成空穴。气泡进入检测器后会在色谱图上出现尖锐的噪音峰,降低响应甚至导致信号消失。流动相中的氧对光电检测器影响最大,使紫外检测器基线增高,低波长检测时信号被抵消。在荧光检测中,溶解氧还会使荧光淬灭
液相色谱流动相小议
一、液相色谱流动相的性质要求一个理想的液相色谱流动相溶剂应具有低粘度、与检测器兼容性好、易于得到纯品和低毒性等特征。选好填料(固定相)后,强溶剂使溶质在填料表面的吸附减少,相应的容量因子k降低;而较弱的溶剂使溶质在填料表面吸附增加,相应的容量因子k升高。因此,k值是流动相组成的函数。塔板数N一般与流
液相流动相如何脱气
流动相溶液往往因溶解有氧气或混入了空气影响液相色谱的操作性能,在泵中产生气泡使流速不稳,气泡大时会在泵头形成空穴。气泡进入检测器后会在色谱图上出现尖锐的噪音峰,降低响应甚至导致信号消失。流动相中的氧对光电检测器影响最大,使紫外检测器基线增高,低波长检测时信号被抵消。在荧光检测中,溶解氧还会使荧光淬灭
液相选用缓冲盐是磷酸系统还是加三氟乙酸的好
这个没有好不好之说,看你要测定什么物质,适不适合加这些东西了。一般缓冲液是为了保证峰型,控制pH值等等。比如,你的流动相用水-甲醇就跑得很漂亮,那你就什么缓冲盐或者酸都不用加。你的待测物质偏酸性,或者偏碱性,为了调整保留时间和峰型,会往里加磷酸盐,有的还会可以要求调节pH值至多少多少。药典后面有很多
流动相的特点
液相色谱是样品组分在柱填料与流动相之间质量交换而达到分离的目的,因此要求流动相具备以下的特点:(1)流动相对样品具有一定的溶解能力,保证样品组分不会沉淀在柱中(或长时间保留在柱中)。(2)流动相与样品不产生化学反应(3)流动相的黏度要尽量小,以便得到好的分离效果;降低柱压降,延长泵的使用寿命(可运用
流动相的概念
色谱过程中携带待测组分向前移动的物质称为流动相。与固定相处于平衡状态、带动样品向前移动的另一相。
流动相-固定相
流动相 ——色谱分离过程中携带组分向前移动的物质。固定相 ——色谱分离过程中不移动的具有吸附活性的固体或是涂渍在载体表面的液体。
怎样选择流动相
要根据样品的性质、PH值、样品的溶解度,由样品在有机溶剂中溶解度的大小,初步判断样品是非极性化合物还是极性化合物,进而推断用非极性溶剂戊烷、己烷、庚烷等,还是极性溶剂二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯、甲醇、乙腈等来溶解样品,并通过实验判断.若样品溶于非极性溶剂,表明样品为非极性化合物,通常可以选吸附色谱法或
使用缓冲盐时色谱柱维护的通用方法
流动相中含有缓冲盐时,大的原则是:使用前要过渡,使用后要清洗(清洗包括两个步骤,一个步骤是用来清洗缓冲盐,另一个步骤是用来清洗强保留物质的),具体请按如下方式保养色谱柱:1、使用前的过渡:用乙腈:水=10:90(如果是甲醇体系则用甲醇:水=10:90)以1ml/min流速过渡30min(目的是防止缓