HPLC压力持续偏高原因分析及解决办法
1、流速设定过高。解决方法:将流速调整到适当数值。2、流动相使用不当或缓冲盐的结晶沉淀。解决方法:更换流动相,冲洗色谱柱。3、柱前筛板堵塞。解决方法:在允许情况下反冲色谱柱,更换筛板,更换色谱柱。4、保护柱堵塞。解决方法:清洗或更换保护柱。 ......阅读全文
HPLC基础知识教程(八)
全屏显示表格UV荧光安培质谱蒸发光散射全屏显示表格检测限(g/ml)10-1010-1310-13<10-9g/s10-9池体积(ul)2~10~7<1————梯度洗脱适宜适宜不宜适宜适宜细管径柱难难适宜适宜适宜样品破坏无无无有无
HPLC中冲洗柱子的方法
如果样品中有盐的话,最好还是用(水:乙腈= 9:1)先冲洗一下,如果柱子里盐不冲洗干净的话,再用小极性的流动相冲柱子时,盐就会析出,影响色谱柱寿命。要是没有盐的话,就无所谓了,用甲醇 乙腈冲洗都行,冲洗到什么程度,主要看柱压是否已经回落,稳定下来了。尽可能将色谱柱贮存于100%有机溶剂(乙腈最好)中
HPLC部分问题解答
1、除了流速外,还有哪些因素能引起压力改变? 改变流动相组成和温度;改变柱长、柱内径和填料粒度;柱突然阻塞压力升高(正常情况下其它条件不变柱压都是逐渐升高的)。2、什么是强溶剂、弱溶剂? 改变流动相的组成或溶剂溶剂强度就可以改变峰容量因子和保留时间。在一定条件下,减少保留时间或缩短分析时间的
HPLC基础知识教程(十四)
V.HPLC应用 一、样品测定 1.流动相比例调整:由于我国药品标准中没有规定柱的长度及填料的粒度,因此每次新开检新品种时几乎都须调整流动相(按经验,主峰一般应调至保留时间为6~15分钟为宜)。所以建议第一次检验时请少配流动相,以免浪费。弱电解质的流动相其重现性更不容易达到,请注意充分平衡柱
HPLC保留时间快速变化现象
1. 流速发生变化,解决办法是重新设定流速,使之保持稳定2、泵中有气泡,可通过排气等操作将气泡赶出。3、流动相不合适,解决办法为改换流动相或使流动相在控制室内进行适当混合
HPLC日常操作注意事项
选择流动相时应注意的几个问题:尽量使用高纯度试剂作流动相,防止微量杂质长期累积损坏色谱柱和使检测器噪声增加。避免流动相与固定相发生作用而使柱效下降或损坏柱子。试样在流动相中应有适宜的溶解度,防止产生沉淀并在柱中沉积。流动相同时还应满足检测器的要求。当使用紫外检测器时,流动相不应有较强的紫外吸收,一般
HPLC的维护与使用注意
HPLC以它定量分析结果准确、分析周期短、分析范围广及分析检测限低等优势,在食品添加剂、药物成分分析等多领域得到了广泛的应用。本文就液相色谱仪在实际操作时应注意的事项及维护做了简单介绍。 主要部件介绍 输液系统 输液系统主要包括在线脱气装置、高压输液泵、梯度洗脱装置。在线
hplc级是什么意思
高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography \ HPLC)又称“高压液相色谱”、“高速液相色谱”、“高分离度液相色谱”、“近代柱色谱”等。高效液相色谱是色谱法的一个重要分支,以液体为流动相,采用高压输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶
关于HPLC的流动相问题
1)PH值特别重要:一般C18柱PH小于3时,容易损坏色谱柱,但是抗酸性的柱可以使用小的PH值。 2) 注意选择试剂的截止波长:如乙腈截止波长215nm、丙酮截止波长330nm、正丁烷210nm等等(具体情况请读者参阅本文的参考文献)。 3)流速:流速要适当,否则影响峰形、浪费溶剂,一般常规
hplc级是什么意思
高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography \ HPLC)又称“高压液相色谱”、“高速液相色谱”、“高分离度液相色谱”、“近代柱色谱”等。高效液相色谱是色谱法的一个重要分支,以液体为流动相,采用高压输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶
HPLC组分的快速冻干法
分析测试百科网讯 Genevac的系列3 HT蒸发器的快速冻干功能是为了提供一种快速、高通量可以替代冷冻干燥的HPLC纯化组分的方法而开发的。 传统的蒸发去溶剂方法,例如水和乙腈,通常会因为溶剂与样品的相互作用而形成胶状或油状物质。采用系列3 HT蒸发器的LyoSpeed™快速冻干技术,使得制
HPLC仪的结构及功能
HPLC仪一般由溶剂输送系统、进样系统、分离系统(色谱柱)、检测系统和数据处理与记录系统组成,具体包括储液器、输液泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪或数据工作站等几部分。其中输液泵、色谱柱和检测器是HPLC仪的关键部分 。1. 溶剂输送系统储液器:用来贮存数量足够、符合要求的流动相。配有溶剂过滤器
HPLC基础知识教程(一)
I.概论 一、液相色谱理论发展简况 色谱法的分离原理是:溶于流动相(mobilephase)中的各组分经过固定相时,由于与固定相(stationaryphase)发生作用(吸附、分配、离子吸引、排阻、亲和)的大小、强弱不同,在固定相中滞留时间不同,从而先后从固定相中流出。又称为色层法、层析法
HPLC日常维护有哪些步骤
高效液相色谱(HPLC)是色谱法的一种,以液体为流动相,采用高压输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,在柱内各成分被分离后,进入检测器进行检测,从而实现对试样的分析。 高效液相色谱(HPLC)的日常维护有哪些呢? 1.高效液相级色谱醇,
HPLC-System-features-stackable,-modular-design
Product News Network, March 25, 2005 Finnigan™ Surveyor Plus provides PDA detection for high-throughput sample processing environments. It feature
做HPLC的“鬼峰”知识
鬼峰,顾名思义,就是指在相同的色谱条件下,有时候出现,有时候消失的杂峰。鬼峰产生的原因是多种多样的,查询了相关文献,结合本人以往的经验,来谈谈鬼峰的成因及应对策略,主要体现在以下几个方面:1、流动相、样品及仪器中存在杂质。运行梯度洗脱时,由于开始时有机相比例不高,洗脱能力不强,部分杂质在便富集在色谱
HPLC基础知识教程(五)
2.泵的使用和维护注意事项 为了延长泵的使用寿命和维持其输液的稳定性,必须按照下列注意事项进行操作: ①、防止任何固体微粒进入泵体,因为尘埃或其它任何杂质微粒都会磨损柱塞、密封环、缸体和单向阀,因此应预先除去流动相中的任何固体微粒。流动相最好在玻璃容器内蒸馏,而常用的方法是滤过,可采用Mi
HPLC基础知识教程(十二)
二、化学键合固定相 将有机官能团通过化学反应共价键合到硅胶表面的游离羟基上而形成的固定相称为化学键合相。这类固定相的突出特点是耐溶剂冲洗,并且可以通过改变键合相有机官能团的类型来改变分离的选择性。 1.键合相的性质 目前,化学键合相广泛采用微粒多孔硅胶为基体,用烷烃二甲基氯硅烷或烷氧基硅烷
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货号:CAEQ-4-018397-4000 HPLC级叔丁基甲醚 规格:4L 报价:540元 促销价:整箱起订432元/瓶,4瓶/箱 促销时间:2011年5月3日至2011年5月31日 高效液相色谱法已经在产品检测、研发以及药物质量控制和环境
液相色谱(HPLC)入门(一)
什么是液相色谱?历史概述和定义液相色谱的定义是二十世纪早期由俄罗斯植物学家 Mikhail S. 茨维特提出的。他最先尝试在装满颗粒的柱子上使用溶剂来分离从植物中提取的化合物[树叶色素]。茨维特用颗粒填满开口的玻璃柱。他发现两种特殊的材料,粉笔末(碳酸钙)和氧化铝很有用。他将样品[混匀植物叶
液相色谱(HPLC)入门(二)
什么是色谱图?色谱图表示发生在高效液相色谱系统中的化学[色谱]分离。一系列从基线出现的峰以时间为坐标。每个峰代表对不同化合物的检测器反应。色谱图由计算机数据站描绘。[如图 H].Figure H: How Peaks Are Created图H中,黄色谱带完全通过了检测器流通池;产生的电信号被送到计
液相色谱(HPLC)入门(五)
正相高效液相色谱在植物提取物的分离过程中,茨维特成功运用极性固定相[玻璃柱中的粉笔末; 如图A]和弱极性[非极性]流动相。这种经典的色谱模式被称为正相。图 S -1: 正相色谱法图 S -1 代表三个染料混合物的正相色谱分离。极性的固定相最强地保留了极性的黄色染料。相对非极性的蓝色染料在非极
HPLC的酸清洗和钝化
HPLC系统内部可能的污染物来自人的触摸,暴露在实验室化学环境,与零部件制造相关的残留物,或来自先前的流动相和样品的残余物。虽然HPLC系统自身也会逐步地被流动相清洗,但某些释放出的杂质会吸附在色谱柱上以及检测器润湿的表面上,因而会降低总的性能。 •磷酸清洗:通常用于从系统中除去有机杂质。可能
HPLC是做什么的
HPLC是高效液相色谱,英文全称是High Performance Liquid Chromatography。该方法在化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领域中被用来做重要的分离分析技术。用途:高效液相色谱更适宜于分离、分析高沸点、热稳定性差、有生理活性及相对分子量比较大的物质,因而广泛应用于
过滤与HPLC还有这关系
在日常生活中你是不是经常看到这些... 生活用水的净水器 早起的纯纯的豆浆 最美的男医生(身上的过滤器) 等等如此这些 那么 今天,咱们分享的主题就是膜分离。 膜分离其主要分类有反渗透、微滤、超滤、纳滤扩散渗析、电渗析、气体分离、
HPLC基础知识教程(十三)
3.流动相的pH值 采用反相色谱法分离弱酸(3≤pKa≤7)或弱碱(7≤pKa≤8)样品时,通过调节流动相的pH值,以抑制样品组分的解离,增加组分在固定相上的保留,并改善峰形的技术称为反相离子抑制技术。对于弱酸,流动相的pH值越小,组分的k值越大,当pH值远远小于弱酸的pKa值时,弱酸主要以分
HPLC基础知识教程(二)
II.基本概念和理论 一、基本概念和术语 1.色谱图和峰参数 色谱图(chromatogram)——样品流经色谱柱和检测器,所得到的信号-时间曲线,又称色谱流出曲线(elutionprofile)。 基线(baseline)——经流动相冲洗,柱与流动相达到平衡后,检测器测出一段时间的流出
HPLC基础知识教程(十)
一、基质(担体) HPLC填料可以是陶瓷性质的无机物基质,也可以是有机聚合物基质。无机物基质主要是硅胶和氧化铝。无机物基质刚性大,在溶剂中不容易膨胀。有机聚合物基质主要有交联苯乙烯-二乙烯苯、聚甲基丙烯酸酯。有机聚合物基质刚性小、易压缩,溶剂或溶质容易渗入有机基质中,导致填料颗粒膨胀,结果减少
液相色谱(HPLC)入门(四)
高效液相色谱分离模式总的来说,化合物的三种主要的性质可以用来产生高效液相色谱分离。它们是:· 极性· 电荷· 分子大小首先,让我们考虑极性和根据这一特性的两种主要分离模式:正相和反相色谱。基于极性的分离一个分子的结构、活性和物化性质由组成它的原子和化学键决定。在一个分子内部,决定了其特殊性质和可预测
HPLC固定相及应用范围
名称 别名 功能基团 正相 反相 离子对 应用 Silica -OH √ 非极性和中等极性以及非离子性有机化合物(HPLC固定相及应用范围(液相配件:高效液相