TFA问题
TFA在缓冲液中是不是只起到调节pH的作用呢？TFA的浓度越高基线的漂移越厉害，那是不是说它的浓度在缓冲液pH允许的情况下越低越好呢？（1）TFA起到类似离子对的作用，一般浓度在0.05-0.1%，过高的浓度，会使溶液偏酸，长时间使用可能影响柱子寿命。（2）同时TFA可以抑制硅胶表面硅醇基，改善碱性化合物的峰型。有时0.1%TFA分离不好的话。可以考虑加大浓度到0.2%。但要注意用完后及时冲洗色谱柱。（3）走梯度时，因为走成基线漂移，但对制备的影响不大。......阅读全文
简述黄曲霉毒素M1的高效液相色谱法检测分析原理
用C18柱抽提纯化样品中的AFM1，乙醚对C18柱洗涤，再用CH2Cl2-乙醇洗脱AFM1，然后加入三氟乙酸（TFA）对AFM1进行衍生化处理，利用液相色谱荧光检测器检测，并与标准AFM1-TFA的衍生物比较，进行定性、定量分析。
概述多肽的合成过程
1、除去保护 Fmoc保护的柱子和单体必须用一种碱性溶剂（piperidine）去除氨基的保护基团。 2、激活和交联 下一个氨基酸的羧基被一种激活剂所激活。化学工艺常用HBTU/HCTU/HITU/HATU+NMM/DIPEA或HOBT+DIC作激活剂，激活的单体与游离的氨基反应交联，形成
高效液相色谱之高效反相液相色谱（一）
反相色谱（reversed phasc chromatography, RPC）是基于溶质、极性流动相和非极性固定相表面间的疏水效应建立的一种色谱模式，任何一种有机分子的结构中都有非极性的疏水部分，这部分越大，一般保留值越高，在高效液相色谱中这是应用面最广的一种分离模式，在生物大分子的反相液相色
关于多肽的合成过程介绍
除去保护 Fmoc保护的柱子和单体必须用一种碱性溶剂（piperidine）去除氨基的保护基团。 激活和交联 下一个氨基酸的羧基被一种激活剂所激活。化学工艺常用HBTU/HCTU/HITU/HATU+NMM/DIPEA或HOBT+DIC作激活剂，激活的单体与游离的氨基反应交联，形成肽键。在
反式脂肪酸的检测前景
TFA是一种不可忽视的具有危害的不饱和脂肪酸，且与人类日常生活联系密切，广泛存于诸如早餐麦片、面包、咖啡、蛋糕、油炸松脆食品、冷冻食品、方便汤、巧克力、沙拉酱及各类糖果中。且导致多种人类疾病，引起各国学者的关注。2015年6月，美国食品和药物管理局宣布，3年内禁止在食品中使用人造反式脂肪，以助
蛋白质和多肽反相HPLC分析和纯化指南（十四）
蛋白质/多肽液相分析中的流动相选择有机溶剂可将吸附在疏水界面的蛋白质洗脱（图14）。在梯度洗脱期间，当有机溶剂量达到针对每一蛋白质的特定浓度时，蛋白质就会从疏水界面上解吸，继续顺着柱向下，从而从柱中洗脱。 图14. 当有机改性剂的浓度达到特定值时，蛋白质从疏水界面洗脱。乙腈。在多肽的反相色谱分离时最
多肽固相合成方法：Boc多肽合成法和Fmoc多肽合成法
多肽的合成是氨基酸重复添加的过程，通常从C端向N端(氨基端)进行合成。多肽固相合成的原理是将目的肽的第一个氨基酸C端通过共价键与固相载体连接，再以该氨基酸N端为合成起点，经过脱去氨基保护基和过量的已活化的第二个氨基酸进行反应，接长肽链，重复操作，达到理想的合成肽链长度，最后将肽链从树脂上裂解下来
多肽固相合成方法：Boc多肽合成法和Fmoc多肽合成法
多肽的合成是氨基酸重复添加的过程，通常从C端向N端(氨基端)进行合成。多肽固相合成的原理是将目的肽的第一个氨基酸C端通过共价键与固相载体连接，再以该氨基酸N端为合成起点，经过脱去氨基保护基和过量的已活化的第二个氨基酸进行反应，接长肽链，重复操作，达到理想的合成肽链长度，最后将肽链从树脂上裂解下来，分
Cyanogen－Bromide－digestion－of－protein
1. Proteins are TCA precipitated and washed with acetone, then dried.2. The CNBr should be brought to room temperature in the hood and used ONLY in th
杂化颗粒C18色谱柱和乙酸流动相进行肽的高载量研究－二
数据管理MassLynx软件4.1版结果与讨论含有九种组分的肽混合物的载量研究在之前的研究中，已经对CSH130 C18和BEH130 C18在分析型肽分离中的应用(例如肽图绘制)进行了广泛的探讨8-9。简而言之，与其他肽分离反相填料相比，CSH130 C18及其创新的表面带电技术能够改善峰形和载量
实验室分析方法气相色谱酰化衍生化方法
酰化能降低羟基、氨基、巯基的极性,改善这些化合物的色谱性能,并提高这些化合物的挥发性,增加某些易氧化化合物的稳定性。当酰化时引入含有卤离子的酰基时,还可以提高使用ECD检测器的灵敏度。常用的酰化试剂有酰卤、酸酐和反应活性的酰化物。(1)乙酰化法:标准乙酰化法是将样品溶于氯仿中,与乙酸酐和乙酸在50℃
气相色谱酰化衍生化方法简介
酰化能降低羟基、氨基、巯基的极性，改善这些化合物的色谱性能，并提高这些化合物的挥发性，增加某些易氧化化合物的稳定性。当酰化时引入含有卤离子的酰基时，还可以提高使用ECD检测器的灵敏度。常用的酰化试剂有酰卤、酸酐和反应活性的酰化物。 （1）乙酰化法：标准乙酰化法是将样品溶于氯仿中，与乙酸酐和乙酸
制备型液相色谱仪的操作经验
制备型液相色谱仪的分离目的是从混合物中得到纯物质。为了缩短分离时间和提高分离效率，制备型液相色谱的的进样品量很大，导致色谱柱的分离负荷相应加大，因此必须加大色谱柱填料，增大柱内径和柱长，使用的流动相相对增多。然而，当色谱柱上的样品负载加大时，往往会导致柱效急剧下降而得不到纯产品。制备型液相色谱要解
蛋白质和多肽MALDIMS分析方法
ABSTRACTFor MALDI-TOF-MS analysis of proteins and peptides, samples are cocrystallized with an excess of organic matrix that absorbs at a specific wav
多肽固相合成方法：Boc多肽合成法和Fmoc多肽合成法
多肽的合成是氨基酸重复添加的过程，通常从C端向N端(氨基端)进行合成。多肽固相合成的原理是将目的肽的第一个氨基酸C端通过共价键与固相载体连接，再以该氨基酸N端为合成起点，经过脱去氨基保护基和过量的已活化的第二个氨基酸进行反应，接长肽链，重复操作，达到理想的合成肽链长度，最后将肽链从树脂上裂解下来
HPLC故障排除：峰形问题（一）
1. 峰形1.1.在RP-HPLC应用之初，峰拖尾就是最常见的峰形问题（拖尾峰是RP-HPLC自出现以来最普遍的峰形问题）。大多数峰拖尾是由于柱内硅胶颗粒表面上的酸性或离子化硅烷醇基团之间相互作用而导致的。低纯度硅胶（通常称为“A型”或酸性硅胶）具有高含量的酸性硅烷醇（-Si-OH）基团，其富含的金
精度0.1mg量程210g万分位天平
产品特性：5寸彩色触摸屏，显示清晰直观，人机对话界面，操作更简便；全自动时间触发内部校准，可选自动内校时间，支持键校准；新代电磁力平衡式传感器，称重快速稳定；特制精浇铸铝外壳，全面提升天平的防静电抗干扰能力；三开门玻璃防风罩，超大操作空间，视觉通透，操作方便；新增密度、称重百分比功能。产品配置：全自
蛋白质和多肽反相HPLC分析和纯化指南（十二）
蛋白质/多肽液相分析中的流动相选择有机溶剂可将吸附在疏水界面的蛋白质洗脱（图14）。在梯度洗脱期间，当有机溶剂量达到针对每一蛋白质的特定浓度时，蛋白质就会从疏水界面上解吸，继续顺着柱向下，从而从柱中洗脱。图14. 当有机改性剂的浓度达到特定值时，蛋白质从疏水界面洗脱。乙腈。在多肽的反相色谱分离时最常
反相高效液相色谱1
方案1 蛋白质 RP-HPLC 的标准色谱条件实验材料蛋白质标样试剂、试剂盒乙睛（HPLC级）去离子水（HPLC级）三氟乙酸（TFA)仪器、耗材HPLC 色谱系统反相柱实验步骤1.进行空白或对照层析谱分析（即在步骤①中不加样）。一般这是进行一天层析工作的开始。下面是推荐使用的用于 RP-HPLC 系
反相高效液相色谱
实验材料 蛋白质标样试剂、试剂盒 乙睛（HPLC级）去离子水（HPLC级） 三氟乙酸（TFA)仪器、耗材 HPLC 色谱系统 反相柱实验步骤 1.进行空白或对照层析谱分析（即在步骤①中不加样）。一般这是进行一天层析工作的开始。下面是推荐使用的用于 RP-HPLC 系统评估的标准色谱条件。（1）线性梯
肽质量指纹图谱—MALDITOF－法鉴定蛋白质实验（一）
实验材料 测序级猪胰蛋白酶试剂、试剂盒 碳酸氢铵碳酸氢铵缓冲液乙腈 碳酸氢铵缓冲液消化缓冲液仪器、耗材 真空离心机烤箱实验步骤 许多凝胶染色方法适用于后续的 MALDI-TOF 肽质量指纹图谱（PMF ) 分析。在第 14 章已经比较讨论了一些染色方法的性能和兼容性。3.1 胶内消化凝胶消化方法改编
反相高效液相色谱4
方案4 用 RP-HPLC 对固相合成的多肽进行纯化实验实验材料用于分析的肽或蛋白试剂、试剂盒丙酮乙腈（HPLC级）2 -丙醇乙醇硝酸钠硫酸钠硫脲三氟乙酸仪器、耗材分析型 HPLC 装置离心机锥形瓶玻璃容器Hamilton 玻璃注射器氮气冷冻干燥机流动相过滤装置氦气制备型 HPLC 装置实验步骤一、
蛋白质氨基端及羧基端序列分析实验
方案1 两相柱测序仪的样品上样实验实验材料样品溶液试剂、试剂盒甲醇（HPLC级）三氟乙酸（TFA）仪器、耗材双向测序柱（Agilent）氮气供应设备聚丙烯试管样品加样器上样漏斗实验步骤一、浸润层析柱1.将准备好的两相柱的亲水段（凸向接头）移开，放在一边。2.将柱的疏水段（凹向接头）和上样漏斗装配在一
制备色谱技术的简答（二）
1 问: 我想购买waters600用于分析和制备，对于其配备有什么好的建议。答： 可以配一个PDA，另外加一个示差折光410，另外买几根制备柱就可以了。 waters600的流速最大为20mL/min，一般可以配20mm ID的制备柱，一次分离10-100mg的样品，如果样品量更大，可以通过
空间中心等提出由X射线成像图反演磁层顶位形的新方法
太阳风中的高价重离子和地球大气逃逸出的中性成分碰撞，发生电荷交换（solar wind charge exchange, SWCX），从而辐射X射线。以此为原理对地球磁层进行X射线成像探测，将有望首次在大尺度上揭示太阳风-磁层相互作用的基本模式。在成像探测过程中，视线方向的X射线信号将被叠加，损
赛默飞世尔科技于ASMS－2011发布最新LC/MS混合溶剂
丹佛(2011年6月5日) - 世界领先的科学服务商赛默飞世尔科技，今天宣布将在6月5-9号位于丹佛举行的第59届全美质谱大会(ASMS)上展示随时取用的OPTIMA® LC/MS 混合溶剂，展示地点为Thermo Scientific 展台110号或 Hyatt Regency酒店Ce
反相高效液相色谱5
方案5 用 RP-HPLC 技术对多肽和蛋白质混合物进行脱盐实验实验材料蛋白质或多肽样品试剂、试剂盒乙腈（HPLC级）2 -丙醇硝酸钠硫脲三氟乙酸仪器、耗材分析型 HPLC 装置色谱柱洗脱液瓶Hamilton 玻璃注射器氮气量筒微量离心机流动相过滤装置实验步骤一、流动相的配制1.配制缓冲液 A(弱流
蛋白质氨基端及羧基端序列分析实验
方案1 两相柱测序仪的样品上样实验 方案2 将蛋白质从凝胶电转移至 PVDF 膜实验 方案3 检测 PVDF 膜上的蛋白质实验 方案4 浓缩聚丙烯酰胺凝胶上的蛋白质点实验 方案5 磷酸化多肽的固相微量测序实验 方案6 羧基端序列分
反相高效液相色谱
方案1 蛋白质 RP-HPLC 的标准色谱条件 方案2 填充 RP-HPLC 毛细管微柱 方案3 不易分离的大分子量多肽的纯化实验 方案4 用 RP-HPLC 对固相合成的多肽进行纯化实验 方案5 用 RP-HPLC 技术对多肽和蛋白质混合
氨基去保护后，怎么除去三氟乙酸
谢谢bigcity(站内联系TA)NH的TFA盐，据我的经验溶解性在CH2Cl2 中号是不错的，可以先将样品溶于CH2Cl2 中加容2当量NaHCO3，搅拌过滤即可以。不过不知道你的化合物是不是分子量太大了， 脱完盐后溶不容于CH2Cl2，你可以少量试试。tlmouyg(站内联系TA)我最还是就是试