肽质量指纹图谱—MALDITOF法鉴定蛋白质实验（一）
实验材料 测序级猪胰蛋白酶试剂、试剂盒 碳酸氢铵碳酸氢铵缓冲液乙腈 碳酸氢铵缓冲液消化缓冲液仪器、耗材 真空离心机烤箱实验步骤 许多凝胶染色方法适用于后续的 MALDI-TOF 肽质量指纹图谱（PMF ) 分析。在第 14 章已经比较讨论了一些染色方法的性能和兼容性。3.1 胶内消化凝胶消化方法改编自 Jensen 等。对于凝胶处理和消化步骤，必须认真处理样品，尽量减少外源性角蛋白的污染（如头发、皮肤、羊毛衣服、气流、通风冷却等）（见注释 1)。1. 从二维聚丙烯酰胺凝胶挖蛋白质点( 1 ) 将 1 ml 枪头在离尖端 5 mm 处用刀片切除，做一个打孔器（切口直径 1~2 mm ) ( 见注释 2) 。( 2 ) 挖取凝胶点，并转移到离心管中。2. 清洗凝胶碎片( 1 ) 用 100 μl 碳酸氢铵缓冲液清洗（振荡 15 min) ，然后弃上清液。( 2 ) 用 100 μl 乙腈/碳酸氢铵缓冲液......阅读全文
肽质量指纹图谱—MALDITOF－法鉴定蛋白质实验（一）
实验材料 测序级猪胰蛋白酶试剂、试剂盒 碳酸氢铵碳酸氢铵缓冲液乙腈 碳酸氢铵缓冲液消化缓冲液仪器、耗材 真空离心机烤箱实验步骤 许多凝胶染色方法适用于后续的 MALDI-TOF 肽质量指纹图谱（PMF ) 分析。在第 14 章已经比较讨论了一些染色方法的性能和兼容性。3.1 胶内消化凝胶消化方法改编
肽质量指纹图谱—MALDITOF－法鉴定蛋白质实验
实验材料测序级猪胰蛋白酶试剂、试剂盒碳酸氢铵碳酸氢铵缓冲液乙腈 碳酸氢铵缓冲液消化缓冲液仪器、耗材真空离心机烤箱实验步骤许多凝胶染色方法适用于后续的 MALDI-TOF 肽质量指纹图谱（PMF ) 分析。在第 14 章已经比较讨论了一些染色方法的性能和兼容性。3.1 胶内消化凝胶消化方法改编自 Je
肽质量指纹图谱—MALDITOF－法鉴定蛋白质实验
实验材料测序级猪胰蛋白酶 试剂、试剂盒碳酸氢铵 碳酸氢铵
肽质量指纹图谱—MALDITOF－法鉴定蛋白质实验（二）
1. 目标样本沉积 1 ) 经典干燥液滴法( 1 ) 半饱和氰基-4-羟基肉桂酸（约 5 mg/ml) 的配制：将 α-氰基-4-羟基苯甲酸溶解在 300 μl 1 : 1 乙腈/ TFA 溶 液（超声 10 min) 。离心几秒钟得到上清液。取 200 μl 上清液加到微量离心管中，并加入相同
一文了解肽质量指纹图谱原理
肽质量指纹谱分析也称肽指纹图谱，是目前蛋白质组研究中鉴定蛋白较为常用的方法。 由于每种蛋白质的氨基酸序列（一级结构）都不同，蛋白质被酶水解后，产生的肽片段序列也各不相同，其肽混合物质量数亦具特征性，所以称为指纹谱，可用于蛋白质的鉴定，即用实验测得的蛋白质酶解肽段质量数在蛋白质数据库中检索，寻找
方案13－利用化学印刷法进行肽质量指纹图谱分析实验
实验材料细胞或所研究的蛋白质试剂、试剂盒ACTH 肽段样品变性缓冲液直接蓝-71等电聚焦平衡缓冲液碘乙酰胺基质缓冲液辛基-吡喃葡萄糖修饰的猪胰蛋白酶三丁基膦仪器、耗材离心机化学打印仪导电胶带湿盒固定化pH梯度胶条MALDI 板质谱仪NuPAGE离线扫描仪PVDF 膜实验步骤一、样品的 2DPAGE
关于肽指纹图谱测定的相关介绍
质谱技术作为蛋白质组研究的三大支撑技术之一，除了用于多肽，蛋白质的分子量测定外，还广泛的应用与肽指纹图谱测定及氨基酸序列测定。 肽指纹图谱（Peptide Mass Fingerprinting PMF）测定是对蛋白酶解或降解后所得多肽混合物进行质谱分析的方法。质谱分析所得肽断与多肽蛋白数据库
基质辅助激光解吸飞行时间质谱仪的优点
根据MALDI- TOF MS的原理，MALDI-TOF MS具有灵敏度高、准确度高、分辨率高、图谱简明、质量范围广及速度快等特点，在操作上制样简便、可微量化、大规模、并行化和高度自动化处理待检生物样品，而且在测定生物大分子和合成高聚物应用方面有特殊的优越性。近年来已成为检测和鉴定多肽、蛋白质、多糖
基质辅助激光解吸飞行时间质谱仪的优点
根据MALDI -TOF MS的原理，MALDI-TOF MS具有灵敏度高、准确度高、分辨率高、图谱简明、质量范围广及速度快等特点，在操作上制样简便、可微量化、大规模、并行化和高度自动化处理待检生物样品，而且在测定生物大分子和合成高聚物应用方面有特殊的优越性。近年来已成为检测和鉴定多肽、蛋白质、
蛋白鉴定方法之质谱相关技术
质谱已成为连接蛋白质与基因的重要技术，开启了大规模自动化的蛋白质鉴定之门。 用来分析蛋白质或多肽的质谱有两个主要的部分，1）样品入机的离子源，2）测量被介入离子的分子量的装置。 首先是基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱（MALDI-TOF）为一脉冲式的离子化技术。 它从固相标本中产生离子，并在飞
微生物质谱仪检测原理
微生物质谱仪检测原理如下：微生物的质谱鉴定是一种基于细菌全细胞蛋白质组指纹图谱分析的技术，与Sherlock全自动微生物鉴定系统的细胞脂肪酸成分分析相类似，质谱分析亦需要通过专门的数据分析和专家系统对未知细菌的特殊蛋白图谱与菌种文库中收集的菌种蛋白质组指纹图谱进行比较。由于微生物质谱分析的蛋白质大分
微生物质谱仪检测原理
微生物质谱仪检测原理如下：微生物的质谱鉴定是一种基于细菌全细胞蛋白质组指纹图谱分析的技术，与Sherlock全自动微生物鉴定系统的细胞脂肪酸成分分析相类似，质谱分析亦需要通过专门的数据分析和专家系统对未知细菌的特殊蛋白图谱与菌种文库中收集的菌种蛋白质组指纹图谱进行比较。由于微生物质谱分析的蛋白质大分
质谱技术在蛋白组研究中的应用（一）
[摘要] 质谱对于现代蛋白质化学研究是一项重要的技术。也可用于蛋白组分析,在同一时间监控上千种蛋白的表达情况。首先蛋白质混合物可以用双向凝胶电泳分开，再用质谱及随后的蛋白质数据库检索对单个蛋白进行鉴定和分析。最近几年，质谱领域取得了令人鼓舞的进展，使得全自动、高通量的蛋白检测成为可能。质谱也
分子指纹图谱库让薰衣草有了“亲子鉴定”
风吹起一整片薰衣草田，宛如紫色的波浪上下起伏。每年6月上旬，一睹薰衣草花海的游客络绎不绝。游客谁说得清引进薰衣草50年后品种变异了吗？同样当过游客的新疆农业大学农学院副教授苏秀娟团队说得清。图片来源于网络 5月8日，来自该大学的消息称，苏秀娟团队历时4年，构建了新疆薰衣草主栽品种的分子指纹图
分子指纹图谱库让薰衣草有了“亲子鉴定”
风吹起一整片薰衣草田，宛如紫色的波浪上下起伏。每年6月上旬，一睹薰衣草花海的游客络绎不绝。游客谁说得清引进薰衣草50年后品种变异了吗？同样当过游客的新疆农业大学农学院副教授苏秀娟团队说得清。 5月8日，来自该大学的消息称，苏秀娟团队历时4年，构建了新疆薰衣草主栽品种的分子指纹图谱库。利用分子指
分子指纹图谱库让薰衣草有了“亲子鉴定”
科技日报乌鲁木齐5月8日电 （何萌 记者朱彤）风吹起一整片薰衣草田，宛如紫色的波浪上下起伏。每年6月上旬，一睹薰衣草花海的游客络绎不绝。游客谁说得清引进薰衣草50年后品种变异了吗？同样当过游客的新疆农业大学农学院副教授苏秀娟团队说得清。 5月8日，来自该大学的消息称，苏秀娟团队历时4年，构
微生物鉴定方法——代谢指纹法
目前常见的微生物鉴定原理有以下几种：1. 酸碱反应：细菌代谢碳水化合物，一般产生酸性物质；分解蛋白质或氨基酸，则产生碱性物质，根据不同细菌的理化性质不同，测定细菌的分解底物导致PH值变化而产生的不同颜色，来判断菌种。2. 酶谱分析：根据细菌生长产生酶的特性，在测定底物中加入基质。使其与细菌生长过程中
微生物鉴定方法代谢指纹法
目前常见的微生物鉴定原理有以下几种：1. 酸碱反应：细菌代谢碳水化合物，一般产生酸性物质；分解蛋白质或氨基酸，则产生碱性物质，根据不同细菌的理化性质不同，测定细菌的分解底物导致PH值变化而产生的不同颜色，来判断菌种。2. 酶谱分析：根据细菌生长产生酶的特性，在测定底物中加入基质。使其与细菌生长过程中
微生物鉴定方法代谢指纹法
目前常见的微生物鉴定原理有以下几种：1. 酸碱反应：细菌代谢碳水化合物，一般产生酸性物质；分解蛋白质或氨基酸，则产生碱性物质，根据不同细菌的理化性质不同，测定细菌的分解底物导致PH值变化而产生的不同颜色，来判断菌种。2. 酶谱分析：根据细菌生长产生酶的特性，在测定底物中加入基质。使其与细菌生长过程中
布鲁克道尔顿开发出新型微生物快速鉴定系统
欧洲顶级临床诊断实验室集团——斯耶莱柏集团(Synlab Group)在2009年12月5日表示，已开发出新的基于蛋白质组的微生物快速鉴定系统——MALDI Biotyper微生物鉴定系统——该系统将从2010年装备其旗下遍布欧洲的70余家诊断实验室。该鉴定系统由生命科学和分析仪器领域出色的领导
岛津在ASMS发布小型化台式MALDI8020
2017年6月5日，岛津发布了MALDI-8020，这标志着岛津又回到了台式基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOF MS）。仪器通过创新的设计，节省空间的MALDI-8020可实现更大、更昂贵的MALDI-TOF型号的相似性能规格，但占地面积更小。MALDI-8020长度为1.06
蛋白的常用蛋白鉴定方法
传统的蛋白鉴定方法，如免疫印迹法、内肽的化学测序、已知或未知蛋白comigration分析，或者在一个有机体中有意义的基因的过表达通常耗时、耗力，不适合高流通量的筛选。目前，所选用的技术包括对于蛋白鉴定的图象分析、微量测序、进一步对肽片段进行鉴定的氨基酸组分分析和与质谱相关的技术。 “满天星”式的2
蛋白质组鉴定技术
如果目前分离蛋白质组的最好技术是2-DE，那么随之而来的挑战是数百数千个蛋白如何被鉴定. 在这里，我们不考虑传统的蛋白鉴定方法，如免疫印迹法、内肽的化学测序、已知或未知蛋白的comigration分析，或者在一个有机体中有意义的基因的过表达. 并不是因为这些方法无效，而是因为它们通常耗时、耗
蛋白质组鉴定技术简述
如果目前分离蛋白质组的最好技术是2-DE，那么随之而来的挑战是数百数千个蛋白如何被鉴定。在这里，我们不考虑传统的蛋白鉴定方法，如免疫印迹法、内肽的化学测序、已知或未知蛋白的comigration分析，或者在一个有机体中有意义的基因的过表达。并不是因为这些方法无效，而是因为它们通常耗时、耗力，不
蛋白质组鉴定技术
如果目前分离蛋白质组的最好技术是2-DE，那么随之而来的挑战是数百数千个蛋白如何被鉴定. 在这里，我们不考虑传统的蛋白鉴定方法，如免疫印迹法、内肽的化学测序、已知或未知蛋白的comigration分析，或者在一个有机体中有意义的基因的过表达. 并不是因为这些方法无效，而是因为它们通常耗时、耗力，不
蛋白质组鉴定技术
如果目前分离蛋白质组的最好技术是2-DE，那么随之而来的挑战是数百数千个蛋白如何被鉴定. 在这里，我们不考虑传统的蛋白鉴定方法，如免疫印迹法、内肽的化学测序、已知或未知蛋白的comigration分析，或者在一个有机体中有意义的基因的过表达. 并不是因为这些方法无效，而是因为它们通常耗时
几种常用的蛋白鉴定方法
几种常用的蛋白鉴定方法 传统的蛋白鉴定方法，如免疫印迹法、内肽的化学测序、已知或未知蛋白的 comigration分析，或者在一个有机体中有意义的基因的过表达通常耗时、耗力，不适合高流通量的筛选。 目前，所选用的技术包括对于蛋白鉴定的图象分析、微量测序、进一步对肽片段进行鉴定的氨基
【分享】质谱分析蛋白的原理与方法
质谱技术具有较好的灵敏度、准确度，能准确测定蛋白质。目前质谱主要测定蛋自质一级结构包括分子量、肽链氨基酸排序及多肽或二硫键数目和位置，在对蛋白质结构分析的研究中占据了重要的地位。[1,2]质谱有进样器、离子源、质量分析器、离子检测器、控制电脑及数据分析系统等组成。传统的质谱仅用于小分子挥发物质
几种常用的蛋白鉴定方法
传统的蛋白鉴定方法，如免疫印迹法、内肽的化学测序、已知或未知蛋白的comigration分析，或者在一个有机体中有意义的基因的过表达通常耗时、耗力，不适合高流通量的筛选。 目前，所选用的技术包括对于蛋白鉴定的图象分析、微量测序、进一步对肽片段进行鉴定的氨基酸组分分析和与质谱相关的技术。
几种常用的蛋白鉴定方法
传统的蛋白鉴定方法，如免疫印迹法、内肽的化学测序、已知或未知蛋白的comigration分析，或者在一个有机体中有意义的基因的过表达通常耗时、耗力，不适合高流通量的筛选。 目前，所选用的技术包括对于蛋白鉴定的图象分析、微量测序、进一步对肽片段进行鉴定的氨基酸组分分析和与质谱相关的技术。 1