做柱层析时怎样才能把洗脱液中的树脂残留物处理干净?

大孔吸附树脂在上使用前,一般需要进行处理,方法包括用色谱纯的甲醇或乙睛洗到没有吸收;或树脂用乙醇浸泡2天,丙酮浸泡2天,然后用常规的酸,碱洗。再用丙酮回流二小时就可以用了。......阅读全文

做液相时,峰面积怎么突然增大了好几倍

1、样品放置比较久,样品溶剂挥发——只是理论上的可能,实际很少是这个原因。2、流动相比例是否改变——有可能,但保留时间也要变的。3、检测波长是否改变——别忘了峰突然变大好几倍!如果真是波长改变,那么他改变前的分析条件不是最佳的,应该变化后的波长是最佳条件。量程改变、进样量改变、定量管改变等

做液相时,峰面积怎么突然增大了好几倍

1、样品放置比较久,样品溶剂挥发——只是理论上的可能,实际很少是这个原因。2、流动相比例是否改变——有可能,但保留时间也要变的。3、检测波长是否改变——别忘了峰突然变大好几倍!如果真是波长改变,那么他改变前的分析条件不是最佳的,应该变化后的波长是最佳条件。量程改变、进样量改变、定量管改变等楼主,你这

做液相时,峰面积怎么突然增大了好几倍

1、样品放置比较久,样品溶剂挥发——只是理论上的可能,实际很少是这个原因。2、流动相比例是否改变——有可能,但保留时间也要变的。3、检测波长是否改变——别忘了峰突然变大好几倍!如果真是波长改变,那么他改变前的分析条件不是最佳的,应该变化后的波长是最佳条件。量程改变、进样量改变、定量管改变等

操做液相色谱时影响保留时间的变化的因素有哪些

影响液相色谱保留时间的因素:1、流动相的比例与极性。对于不同的柱子,分离度和保留时间往往都会有点差别,所以在操作的时候:a、可以适当调整流动相的比列,如甲醇—水(90:10),如分离效果与保留时间延长,可以调整88:12或者92:8或者95:5等。b、有时候还需要更换流动相的组成,甲醇就可以换成乙腈

操做液相色谱时影响保留时间的变化的因素有哪些

影响液相色谱保留时间的因素:1、流动相的比例与极性。对于不同的柱子,分离度和保留时间往往都会有点差别,所以在操作的时候:a、可以适当调整流动相的比列,如甲醇—水(90:10),如分离效果与保留时间延长,可以调整88:12或者92:8或者95:5等。b、有时候还需要更换流动相的组成,甲醇就可以换成乙腈

把菌种培养成菌液的处理方法

⒈光合菌群: EM菌液中的光合菌群(好氧性和厌氧性)属于独立营养微生物,它能利用土壤接受太阳热能或以紫外线为能源,将土壤中的硫化氢和碳氢化合物中的氢分离出来,变有害物质为无害物质,并以植物根部的分泌物、有机物、有害气体(硫化氢等)及二氧化碳、氮等为基质,合成糖类、氨基酸、维生素类、氮素化合物和生

蛋白质做质谱分析时,样品预处理有哪些要求

质谱分析只是检测蛋白消化后的所有肽段的质量,然后跟已知的蛋白指纹进行比较,确定可能的蛋白种类。因此,质谱能检测出是未知蛋白,但是无法确定具体的氨基酸序列。

蛋白质做质谱分析时,样品预处理有哪些要求

你说的很对,质谱分析只是检测蛋白消化后的所有肽段的质量,然后跟已知的蛋白指纹进行比较,确定可能的蛋白种类。因此,质谱能检测出是未知蛋白,但是无法确定具体的氨基酸序列。

凝胶过滤时发现目的蛋白的洗脱时间延迟

最大的可能就是该目的蛋白和填料间有离子或疏水相互作用可以通过降低盐离子浓度,最小化疏水相互作用通过加入适量去污剂或有机溶剂,如5%异丙醇,增加盐浓度(如150mM氯化钠)最小化离子相互作用。

氨基酸的离子交换柱色谱分离原理和操作

【原 理】本实验采用磺酸型阳子交换树脂(732型)分离酸性氨基酸(天冬氨酸Asp pI=2.97)和硷性氨基酸(赖氨酸Lys pI=9.74)的混合液。在pH5.3条件下,因为低于Lys的pI值,Lys可解离成阳离子挂在树脂上;高于Asp的pI值,则Asp可解离为阴离子,不能被树脂吸附而直接流出

PK120-的纯化及肽段氨基酸序列分析实验

实验材料PK-120试剂、试剂盒Q-Sepharose 树脂S-Sepharose 树脂Hudroxyapatite 羟基磷灰石Sephacryl S-200 凝胶赖氨酸内切酶乙腈三氯醋酸仪器、耗材Applied Biosystems model 477A 气相蛋白质测定仪Applied Biosy

PK120-的纯化及肽段氨基酸序列分析实验

基本方案             实验方法原理 实验材料 PK-120

PK120-的纯化及肽段氨基酸序列分析实验

实验方法原理 实验材料 PK-120试剂、试剂盒 Q-Sepharose 树脂S-Sepharose 树脂Hudroxyapatite 羟基磷灰石Sephacryl S-200 凝胶赖氨酸内切酶乙腈三氯醋酸仪器、耗材 Applied Biosystems model 477A 气相蛋白质测定仪A

亚临界萃取辣木生物活性成分初探

辣木树属辣木树科,原产于印度北部,具有极高的经济价值。其种子含油高,叶片可以做保健食品使用。对高血压、糖尿病等疾病有预防和治疗等作用。目前,国内外对辣木的深加工和利用等研究较少。本文以辣木籽和辣木叶粉为原料,创新采用亚临界流体萃取技术分别制得辣木籽油和辣木黄酮萃取物,黄酮萃取物再使用液液萃取和大孔树

COD实验中如发生消解管破裂时,消解液撒到消解孔中应如何处理?

仪器断电并拔掉插头,用湿抹布将消解孔中的酸液清理干净就行,消解孔是密封的,酸液不会渗到仪器里面的。如果实在擦不净可用滴管向消解孔滴少量水,但不要超过一半,用毛刷清洁后再用吸管吸出,擦干晾干后通电实验无短路可继续使用。

做“农民教书匠”,把论文写在大地上

  云南农业大学植物保护学院副教授 黄惠川: 朱老师,您好。回想与您相识的情景,还要从2007年那场“名家讲坛”说起。那年,我在中国农业大学上大三,听闻有您的讲座,便前往聆听。您自称“农民教书匠”,站在讲台上给我们讲了几个小时之久。 2008年以来,我有幸师从您攻读植物病理学硕士和博士。其间

糖脂的柱层析色谱法分离方法介绍

  近年来,柱层析色谱柱法是糖脂分离广泛采用的一种分离方法。例如Chia-Chung Hou等,以民间昭和草为原料,将乙酸乙酯萃取相,以氯仿.甲醇为洗脱剂,进行正向硅胶柱层析得到分馏物8,取分馏物8再次进行C18反相硅胶柱层析,以95%甲醇为洗脱剂,得到富含亚麻酸的甘油糖脂成分。  柱层析色谱法虽然

打核磁时怎样才能将溶剂峰压下去

提高样品在溶剂中的浓度,理论上加样越多溶剂峰就相对越小,但太多的话裂分也不太好看,保持适当的高度是最好的

柱层析中化学反应进程的控制

化学反应进程的控制反应副产物的检出以及中间体的分析,在化学反应进行到一定时间或反应终了时,把反应液取出作薄层分析,可以知道还剩下多少原料药未起作用。方法是把反应液或其有机溶剂提取液点在薄层上,同时点原料作参比对照,看薄层上是否出现原料药斑点。还可以用薄层检查反应副产物。如果化学反应分步进行,则每一步

氨基酸的离子交换柱色谱分离

一、原理有些高分子物质含有一些可以解离的基团,例如-SO3H,-COOH等,因此可以和溶液中的离子产生交换反应如:R-SO3H+M→R-SO3M+H+或 R-NH3OH+Cl-→R-NH3Cl+OH-这类同分子物质通称离子交换剂,其中使用最普遍的是离子交换树脂。由于一定的离子交换剂对不同离子的静电引

做气相色谱时进样品中样品的体积最少为多少

气相色谱时进样品中样品的体积和所测样品及气相色谱有关系。如果用的是填充柱做气体,就进0.5-5ml左右;顶空进样和检测气体相仿,也是进0.5-3ml左右;如果是毛细管柱做纯液体,就进0.1-0.2ul左右;如果是毛细管柱做纯固体,就进0.2-1ul左右;如果是做不纯的物质,进样量可能还要比刚才的进样

氨基酸离子交换柱色谱分离实验

实验概要本实验介绍了氨基酸的离子交换柱色谱分离的原理和操作步骤等。实验原理本实验采用磺酸型阳子交换树脂(732型)分离酸性氨基酸(天冬氨酸Asp  pI=2.97)和硷性氨基酸(赖氨酸Lys  pI=9.74)的混合液。在pH5.3条件下,因为低于Lys的pI值,Lys可解离成阳离子挂在树脂上;高于

凝胶中蛋白质的洗脱实验

实验步骤 一、通过扩散来洗脱凝胶中的蛋白质 将 SDS 从蛋白质中移除的早期方法由 Weber 和 Kutter(1971) 发表,但当用于微量的蛋白质时,这个方法既麻烦又会造成大部分蛋白质的损失。 这一领域较多的早期方法已经发

凝胶中蛋白质的洗脱实验

SDS-PAGE 在确定样品中多肽的数量和大小方面已被证明是极有用的分析方法。若能熟练运用的话, 它还具有分离许多大小不一的单体蛋白质的能力。许多人在凝胶电泳应用的早期希望可以利用凝胶的高分辨率特性来获得小量的纯净蛋白质。实验步骤一、通过扩散来洗脱凝胶中的蛋白质将 SDS 从蛋白质中移除的早期方法由

凝胶中蛋白质的洗脱实验

一、通过扩散来洗脱凝胶中的蛋白质将 SDS 从蛋白质中移除的早期方法由 Weber 和 Kutter(1971) 发表,但当用于微量的蛋白质时,这个方法既麻烦又会造成大部分蛋白质的损失。这一领域较多的早期方法已经发表(HagerandBurgess,1980),但却需要重新讨论 (butbear

PolarisQ-对复杂基质中残留物分析的应用

PolarisQ 对复杂基质中残留物分析的应用

液相色谱梯度洗脱中柱温的影响

许多色谱工作者在操作液相色谱时,色谱柱是在室温环境下工作的。如果实验室的温度能保持不变的话,不会有什么大问题。但大多数的工作环境温度是不断变化的,因此若想将在某实验室开发的一种液相色谱方法应用到其他实验室的话,温度的差别就会引起较复杂的问题。温度的影响在所有的色谱分析方式中都是存在的,本文就来讨论液

一文了解溶菌酶的制备鉴定

  溶菌酶,全称为1,4-β-N-溶菌酶,又称粘肽N-乙酰基胞壁酰水解酶,属于α-乳白蛋白家族。人们对溶菌酶的研究始于上世纪初,英国细菌学家Fleming发现人的唾液、眼泪中存在有溶解细菌细胞壁的酶,因其具有溶菌作用,故命名为溶菌酶;此后人们在微生物、植物、无脊椎动物和高等动物中也发现了溶菌酶的存在

溶菌酶的制备、纯化和鉴定

实验概要制备、纯化和鉴定溶菌酶实验原理溶菌酶,全称为1,4-β-N-溶菌酶,又称粘肽N-乙酰基胞壁酰水解酶,属于α-乳白蛋白家族。人们对溶菌酶的研究始于上世纪初,英国细菌学家Fleming发现人的唾液、眼泪中存在有溶解细菌细胞壁的酶,因其具有溶菌作用,故命名为溶菌酶;此后人们在微生物、植物、无脊椎动

层析法有哪些

  ◆按层析的机理划分:  吸附层析、分配层析、离子交换层析、凝胶过滤层析、亲和层析等。  吸附层析:利用吸附剂表面对不同组分吸附性能的差异,达到分离鉴定的目的。  分配层析:利用不同组分在流动相和固定相之间的分配系数不同,使之分离。  离子交换层析:利用不同组分对离子交换剂亲和力的不同。  凝胶层