基于Wes建立蛋白类药物活性成分检测方法(一)
生物药品活性成分常用检测方法及局限性随着生物药品的迅速发展,研究人员将面临的一项挑战任务是开发一种可靠、耐用和高效的检测方法,以在体外和体内检测和量化有效的生物药品成分。最常用的方法包括经典配体结合测定(LBAS)、LC-MS的测定,以及新出现的LBA-LC-MS混合技术。LC-MS和LBA-LC-MS是一个技术先进的方法,但是操作复杂,周期长,通量低,成本高,不适合于快速筛选和早期开发研究大样本量的实际需求。对于LBAS而言,ELISA是最常用的用于定量目的的方法。虽然在技术上要求较低并且成本低,但它高度特异性的抗体对,但是新的重组肽或蛋白质通常是不容易拿到高质量的抗体对。筛选可用的抗体对是耗时和费力的,涉及昂贵的纯化步骤,并且依赖于使用的动物。另外,抗体可能无法检测所有重组蛋白质构建体变体。另一种常见的LBA是传统的Western印迹法,但是无法准确定量,操作繁琐,不稳定,不符合生物药品准确性,耐用性和稳定性的要求。基于We......阅读全文
超临界萃取油茶中多种活性成分的研究
油茶树是世界四大木本油料植物之一。油茶籽油中不饱和脂肪酸含量高达90%,具有“东方橄榄油”之称。此外,油茶中还富含多种活性成分如油茶皂素、油茶多酚等。油茶皂素和油茶多酚分别是性能优异的天然非离子型表面活性剂和抗氧化剂,同时具有多种生理活性,广泛用于医药、农业、日用化工等领域。 然而传统的油茶皂素和多
钙蛋白酶的活性调节
激活调节细胞中钙蛋白酶活性受到Ca2+和钙蛋白酶抑制蛋白(calpastatin)、钙蛋白酶激活蛋白(calpain activator)的调节,其中calpain activator是calpain的正调节因子。提高Ca2+浓度,钙蛋白酶的活性增强,Ca2+浓度进一步提高将导致构象变化而表现蛋白水
控制蛋白活性的通用“开关”
蛋白发生故障有可能导致疾病,研究蛋白结构和功能有助于发展治疗疾病的药物,比如发现胰岛素在糖尿病中的作用,开辟了以胰岛素注射为基础的治疗方法。尽管科学家不懈努力,但众多蛋白在细胞中的功能依旧是未知的。为了揭开这些功能,科学家尝试用各种遗传学手段增加、逆转或降低某种蛋白的产量,但现有的技术很复杂,不能满
化繁为简:岛津LCMS2050助力蛋白类药物高效表征
生物制药通常指通过基因重组、细胞培养等技术制备的蛋白质类药物(如抗体药等)。这类蛋白质作为活性成分,具有分子量大、易形成多电荷离子的特点,在质谱检测中常出现复杂图谱。借助岛津LabSolutions Insight Biologics软件,可对检测到的多价离子谱进行智能解卷积,快速推定分子量。尽
在蛋白类药物的提取分离时,如何避免蛋白质失活
您好!蛋白质在溶液中容易受到温度、蛋白酶、pH、盐类等的影响而失活。①温度:一般的蛋白都不耐高温,所以在提取及储存过程中应注意进行温度控制,一般过程样品等都应放置在4℃。②蛋白酶:为防止蛋白受到蛋白酶的作用降解失活,一般会加入如EDTA金属螯合剂,PMSF之类的蛋白酶抑制剂等,另低温也可以起到一定的
Wes全自动蛋白质表达定量分析系统应用于微量脑组织蛋...
Wes全自动蛋白质表达定量分析系统应用于微量脑组织蛋白表达分析中脑多巴胺能神经元与帕金森、药物滥用密切相关帕金森病和药物滥用障碍都与中脑多巴胺能神经元的功能改变有关。在外侧中脑,黑质(SN)的多巴胺能神经元(SN)向背侧纹状体发出投射,参与控制运动,而位于腹侧被盖区(VTA)的多巴胺能神经元(VTA
百里香提取物的化学成分及活性成分
化学成分 百里香精油的化学成分因其种类及其分布区的不同而呈现多型性,这种多型性也可以作为分类的依据。魏春雁等根据该属植物化学成分的多型性,将兴安百里香划分为五种类型,即倍半萜烯/ 龙脑/ 樟脑型、倍半萜烯/ 樟脑/ 龙脑/ 单萜醇型、倍半萜烯型、桉油精/ 芳樟醇/ 龙脑型和单萜/ 倍半萜烯型;
如何保持生物蛋白的活性以及生物蛋白的作用
1、如何保持活性 生物活性蛋白对环境的要求很高,高浓度的生物活性蛋白在常温下保存很容易失去活性,为了确保这些珍稀成分的特殊活性与功能,只能采取生物冻干工艺,在无菌环境下采用-80度的极速超低温真空冻干技术,使生物活性蛋白进入休眠状态,达到完整的保存其生物活性的目的。 2、作用 一方面从源头
组蛋白的成分有哪些?
通常含有H1,H2A,H2B,H3,H4等5种成分。除H1外,其他4种组蛋白均分别以二聚体(共八聚体)相结合,形成核小体核心。DNA便缠绕在核小体的核心上。而H1则与核小体间的DNA结合。因此,一般认为组蛋白作为结构支持体的作用比其基因调节作用更为重要。鸟类、两栖类等含有细胞核的红细胞中,含有一
关于脂蛋白的成分介绍
脂蛋白的核心成分是甘油三酯,周围包绕一层磷脂、胆固醇、蛋白质分子。 脂蛋白为血液中不溶性脂类的载体,血液中不溶性脂类与蛋白质结合在一起形成的脂质-蛋白质复合物。脂蛋白中脂质与蛋白质之间没有共价键结合,多数是通过脂质的非极性部分与蛋白质组分之间以疏水性相互作用而结合在一起。通常用溶解特性、离心沉
蛋白的化学成分
每100克含蛋白质10克,脂肪0.1克,碳水化物1克,灰分0.6克;钙19毫克,磷16毫克,铁0.3毫克,核黄素0.26毫克,尼克酸0.1毫克;维生素A及C缺如;硫胺素0.216微克/克,泛酸
迷幻蘑菇活性成分可重置人类思想引发心灵体验
据国外媒体报道,“神器蘑菇”一直被视为某些最受欢迎的歌曲创作的灵感,如今,科学家称他们离了解迷幻蘑菇使人产生强烈创造力和心灵体验的原因又近了一步。扫描显示,它的活性成分——裸盖菇素使人产生一个“超连通”的思想。这个思想把通常毫无关系的大脑区域连接起来。 迷幻蘑菇内的这种化学物质引发生动的幻觉,
德研制新方法以生产药用大麻活性成分
德国多特蒙德工业大学8月19日发表公报说,该校研究人员开发出一种用生物手段生产药用大麻的活性成分——四氢大麻酚的新方法。 研究人员先是在药用大麻中找到能促使四氢大麻酚产生的基因,然后提取该基因,再植入特定微生物中,接着在培养皿中让这些微生物不断繁殖,最后促使这些微生物生产出四氢大麻酚
仙鹤草提取物的活性成分及功效
活性成分 含仙鹤草素、仙鹤草内酯(Agrimonolide)、鞣质(为焦性儿茶酚鞣质、没食子鞣质等(6.67%-13.71%))、甾醇、有机酸、酚性成分、皂甙。 功效 仙鹤草能收敛止血、截疟、止痢、解毒,临床用于咳血魁血,崩漏下血,疟疾,血痢,脱力劳伤,痈肿疮毒,阴痒带下。
单糖和多糖活性成分的便捷质控方案:离子色谱
中药里的单糖和多糖作为活性成分,日益成为人们关注的焦点。然而传统检测糖的气相色谱法、液相色谱法和毛细管电泳法大多需要经过复杂的衍生化处理,且灵敏度和分离效果不理想。赛默飞的离子色谱法无需衍生即可分离测定样品中的糖类化合物,且分离度好,检测灵敏度高。无需配制淋洗液的“只加水”技术为客户提供最便捷的
希腊科学家揭秘植物生物活性成分之谜
地球上大部分植物对于我们来说都是未解的谜题,很大程度上来说,大部分的植物种类的化学构成都未能经过完整的分析。 科学家们对植物进行了几个世纪的研究,但仍然对植物知之甚少。雅典研究人员试图揭开植物的神秘面纱。 作为欧洲研究项目的一部分,此次研究收集了南太平洋、非洲、拉丁美洲以及地中海约2
简述枸橼酸钾溶液的主要活性成分
本品含枸橼酸钾(C6H5K3O7H2O)#5应为标示量的95.0~105.0% 性状:本品为无色的澄明液体;气芳香,味甜微苦。 鉴别:本品显钾盐与枸橼酸盐的鉴别反应(中国药典1995年版二部附录Ⅲ)。 检查:相对密度应为1.045~1.052(中国药典1995年版一部附录ⅥA)。PH值应为
仙鹤草提取物的来源及活性成分
来源 仙鹤草别名脱力草、瓜香草、老牛筋、狼芽草。来源为蔷薇科植物龙芽草Agrimonia pilosa Ledeb.的地上部分。 全草夏、秋季采收。芽冬、春季新株萌发前采收。植物形态多年生草本,高达1m,全株具白色长毛。根茎短,常生1或数个根芽(越冬芽)。茎直立,被疏柔毛及腺毛。羽状复叶互生,
中药山茱萸活性成分能够保护海马神经元
透射电镜(×4000)下见10 μmol/L的5-羟甲基糠醛预处理后H2O2损伤大鼠海马神经元内部分线粒体肿胀,形态多正常。 研究发现炮制过的山茱萸抗衰老作用明显,尤其是抗脑部衰老,其活性成分5-羟甲基糠醛对H2O2损伤的大鼠海马神经元具有一定保护作用,可以提高损伤细胞中超氧化物歧化酶的活力,
罗汉果提取物的活性成分及应用
活性成分 果中含非糖甜味的成分,主要是三萜甙类:罗汉果甜苷(mogroside)Ⅴ及Ⅳ,苷Ⅴ的甜度是蔗糖(srcrose)的256-344倍,苷Ⅳ的甜度为蔗糖的126倍。还含大量葡萄糖(glucose)[6],果糖(fructose)占14%。又含锰、铁、镍、硒、锡、碘、钼等26种无机元素、蛋
欧盟确定未来5年将批准的农药活性成分
欧盟成员国己经建议欧盟批准5个低毒农药活性成分,其中2个抗病毒剂是“低风险”活性成分,另外3个天然衍生物是“基本物质成分”。低风险抗病毒剂凤果花叶病毒菌株VX1和VC 1登记有效期15年,由荷兰公司Valto于2013年申请,用于番茄。另外3个基本物质是粘性木炭、过氧化氢和尊麻属,获得无限登记有
常山提取物的活性成分及药理作用
活性成分 常山含有效成分黄常山碱,简称常山碱,主要为黄常山碱甲、乙及丙,三者为互变异构体。还含黄常山定以及4-喹唑酮、伞形花内酯等。从根及叶中分离出的退热碱和异退热碱,相应地就是黄常山碱乙和黄常山碱甲。叶含生物碱总置约0.5%,其中黄常山碱的含量比根中的多10~20倍。另含少量三甲胺。根含总生
胃蛋白酶的活性如何调节?
胃蛋白酶的活性可以通过多种方式进行调节。首先,胃蛋白酶原在酸性环境下被激活成为胃蛋白酶,而胃蛋白酶的活性可以被胃酸的浓度所影响。其次,胃液中的黏液可以保护胃黏膜免受胃蛋白酶的损伤,从而间接地调节胃蛋白酶的活性。此外,胃液中的其他物质,如胃泌素和抑胃肽等,也可以影响胃蛋白酶的分泌和活性。最后,一些
PKA(蛋白激酶A)的活性如何测定
目的研究蛋白激酶C(protein KinaseC,PKC)和蛋白激酶A(protein kinaseA,PKA)在甲状腺癌发生过程中的作用.方法利用酶的放射分析方法测定手术切除经病理证实的18例甲状腺癌患者和17例甲状腺癌患者手术切除的肿瘤组织中PKC和PKA活性水平.结果甲状腺癌组织中胞膜和胞浆
关于菜豆蛋白的药理活性的介绍
1、抑制α-淀粉酶 许多植物产生α-淀粉酶抑制剂,它们能抵御昆虫并保护植物。这些抑制剂分为三种类型。菜豆素是20世纪70年代首先被分离出来的其中之一。它是一种与叫做糖蛋白(Glycoprotein)的糖联系在一起的蛋白质。这种α-淀粉酶抑制剂能有效抵御动物α-淀粉酶,但对相应的微生物或植物酶没
钙调蛋白参与调控靶酶活性
Ca2+-CaM复合体具有结合并调控下游靶酶的功能。现已确定的靶酶有磷酸化酶激酶、鸟苷酸环化酶、磷脂酶A2、肌球蛋白轻链激酶、磷酸二酯酶、钙调蛋白激酶(CaMK)等。Ca2+-CaM复合体形成后,下游的靶酶活力会有不同程度的增加。在动物中,钙调蛋白在肾上腺和脑中 cAMP的合成与降解的过程中扮演
生物活性物质蛋白质的简介
蛋白质是由许多α氨基酸按照一定的序列通过酰胺键 (或肽键)缩合而成的,具有较稳定的构象并具有一定生物功能的生物大分子。蛋白质是生命的载体,任何有生命的机体都不可能离开蛋白质。蛋白质在生命活动和种族繁衍中有重要的生物学意义,承担着强大的功能。 ① 结构功能:蛋白质是生物组织和细胞的组成成分,并发
简述乳铁蛋白的抗菌活性
乳铁蛋白最早被发现并广泛研究的生物学功能是它的抑菌能力。乳铁蛋白具有广谱的抗革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌和真菌的能力,可以有效抑制大肠杆菌、伤寒沙门杆菌、链球菌、嗜肺军团菌、金黄色葡萄球菌的生长。临床上给予患者乳铁蛋白口服治疗后,减少了胃肠道细菌的感染,但不影响乳酸杆菌和双歧杆菌的生长。 通常认
免疫球蛋白生物学活性
免疫球蛋白的重要生物学活性为特异性结合抗原,并通过重链C区介导一系列生物学效应(表2-2),包括激活补体、亲和细胞而导致吞噬、胞外杀伤及免疫炎症,最终达到排除外来抗原的目的。(一)抗原结合作用抗体分子在结合抗原时,其Fab片段的V区与抗原决定簇的立体结构(构象)必须吻合,特别与高变区的氨基酸残基直接
蛋白质制备过程中如何保持蛋白活性?
蛋白质的制备是一项十分细致的工作。涉及物理学、化学和生物学的知识很广。高分子蛋白质具有一定的立体构象,相当不稳定,极易变性、变构,为得到天然状态的蛋白质,尽量采用温和的手段,如中性、低温、避免起泡等,还要注意防腐。动物材料中的蛋白质有些可溶的形式存在于体液(如血浆、消化硫等)中,可以不必经过提取直接