蛋白质N端测序样品要求
检测仪器:岛津 PPSQ-31A 蛋白多肽自动测序仪 一、 蛋白质N端测序的主要应用:样品:蛋白质,多肽样品的氨基酸序列测定2.优势:能连续测定 60 个以上的氨基酸序列3.来源:天然提取(动物/植物/微生物);合成多肽;重组蛋白等二、 样品要求:纯度:>95(基于摩尔数)2.含量:50-100pmol(液体体积控制在 20ul)3.修饰封闭:N 端未被封闭4.样品形式:液体;干粉;PVDF 膜5.无干扰物:蛋白酶;氨基酸;胺;盐分;乙醛;去污剂等三、 客户提供信息:纯度:纯度检测结果及图谱信息2.修饰:样品可能修饰情况3.制备方法:如 SDS,HPLC 及其它方式4.验证目的:提供理论序列5.表观分子量其它注意事项:邮寄要求:使用干冰冷冻保2.液体样品:可用溶剂:蒸馏水、TFA 水溶液、醋酸水溶液、乙氰水溶液以及三甲基胺水......阅读全文
蛋白质测序的测定步骤
1 多肽链的拆分。由多条多肽链组成的蛋白质分子,必须先进行拆分。几条多肽链借助非共价键连接在一起,称为寡聚蛋白质,如,血红蛋白为四聚体,烯醇化酶为二聚体;可用8mol/L尿素或6mol/L盐酸胍处理,即可分开多肽链(亚基).2 测定蛋白质分子中多肽链的数目。通过测定末端氨基酸残基的摩尔数与蛋白质分子
自动多肽/蛋白质测序仪
2007年实验室对蛋白质测序仪的需求 Edman降解法是测定蛋白质序列的经典方法,该方法由瑞士生物化学家佩尔·维克托于1950年创立。Edman降解法通常是以周期的形式来表征。对于一个完整的周期,异硫氰酸苯酯标记上指定肽段的N末端,环化,之后被标记的氨基酸在酸性条件下从肽链中游离出
蛋白质测序——Edman降解法
蛋白质测序可用于: (1)鉴定蛋白质; (2)表征蛋白质翻译后修饰。 (3)分析蛋白质一级结构与功能的关系。实验方法原理主要有质谱法,利用蛋白质测序仪进行测序以及利用蛋白质对应DNA或mRNA进行间接测序。传统的蛋白质测序实验一般包括以下步骤:1.肽链的拆开和分离;2.测定蛋白质分子中多肽链的数目;
人N端前脑钠素(NTpro-BNP)ELISA试剂盒
人N端前脑钠素(NT-pro BNP)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内) 原理 本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗人 NT-pro BNP单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 NT-pro BNP与单抗结合,加入生物素化的抗人NT-pro B
小鼠N端前脑钠素(NTpro-BNP)ELISA试剂盒
小鼠N端前脑钠素(NT-pro BNP)ELISA试剂盒 原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗小鼠 NT-pro BNP 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 NT-pro BNP与单抗结合,加入生物素化的抗小鼠NT-pro BNP,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的St
人N端前脑钠肽(NTproBNP)酶联免疫分析(ELISA)
人N端前脑钠肽(NT-proBNP)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中N端前脑钠肽(NT-proBNP)的含量。实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人N端前脑钠肽(NT-proBNP)水平。用纯化
注意事项/蛋白质测序仪
1.样品信息包括:样品编号、样品数量、样品量、浓度、蛋白质或多肽、样品纯度、溶剂种类。 2.样品N端未被封闭,不含干扰物质:去污剂、胺、盐分、氨基酸、非挥发性缓冲液、蛋白酶。 3.样品形式:最好是冻干粉或溶解于纯水的蛋白溶液。 4.样品如被修饰,请详细告知修饰方式。提供样品组织来源及制备方法信
蛋白质的微量测序分析实验
实验材料 蛋白质试剂、试剂盒 凝胶缓冲液谷胱甘肽疏基乙酸考马斯亮蓝仪器、耗材 电泳仪微量注射器实验步骤 1. 制备分离胶和积层胶溶液灌制变性微型凝胶。 2. 组装垂直凝胶电泳装置。 3. 将80 ml 4×凝胶缓冲液稀释至320 ml。将200 ml 1×凝胶缓冲 液倒入下层缓冲液槽。4.
蛋白质的微量测序分析实验
本方案1 测定N-末端封闭蛋白质的内部序列 实验材料 蛋白质 试剂、试剂盒
蛋白质的微量测序分析实验
基本方案1 测定N-末端封闭蛋白质的内部序列 实验材料 蛋白质
科学依据/蛋白质测序仪
自著名的 Edman 降解技术成功从 N 末端开始测定蛋白质序列以来,蛋白质的结构分析有了重大进展。岛津 PPSQ -21A 蛋白测序仪(Protein sequencer)能够适于多种方法制备的样品。可进行 Pmol 水平的氨基酸序列分析。 LC 分析采用恒溶剂成分洗脱方式,氨基酸的鉴定、装置维护
蛋白质测序仪的工作原理
目前用的蛋白测序仪一般是用Edman化学降解法。简单的说就是用化学试剂把肽链N端最后一个氨基酸降解下来,然后用层析的手段分离。然后再降解下一个,如此循环。
蛋白质测序的目的和方法
所谓蛋白质测序,主要指的是蛋白质的一级结构的测定。蛋白质的一级结构(Primary structure)包括组成蛋白质的多肽链数目。很多场合多肽和蛋白质可以等同使用。多肽链的氨基酸顺序,它是蛋白质生物功能的基础。
酿酒行业N/蛋白质含量检测好方法
啤酒的生产是基于酵母的发酵,糖主要来自淀粉的麦芽(尽管其他谷物也可以使用)。酿造的基本原料是水、麦芽酵母和啤酒花来给啤酒调味。酿造过程通常包括几个步骤,从大麦的麦芽,直到包装和分销瓶装啤酒。氮蛋白含量的测定是一项基础性的检测方法,对酿造的各个环节都有很大的影响。意大利VELP是分析仪器解决方案提供商
大鼠N端前脑钠素(NTpro-BNP)ELISA试剂盒说明
原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗大鼠 NT-pro BNP 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 NT-pro BNP与单抗结合,加入生物素化的抗大鼠NT-pro BNP,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入底物工作液显
蛋白质的微量测序分析实验2
测定N-末端封闭蛋白质的内部序列 实验材料 蛋白质 试剂、试剂盒 乙酸NaOH丽春红染料三氟乙酸 仪器、耗材 纤维素膜离心管滤膜 实验步骤 1. 电泳分离目标蛋白并转移到硝酸纤维素膜。 2. 将硝酸纤维素膜放入盛有50 ml 含0.1
蛋白质的微量测序分析实验1
验材料蛋白质试剂、试剂盒凝胶缓冲液谷胱甘肽疏基乙酸考马斯亮蓝仪器、耗材电泳仪微量注射器实验步骤1. 制备分离胶和积层胶溶液灌制变性微型凝胶。 2. 组装垂直凝胶电泳装置。 3. 将80 ml 4×凝胶缓冲液稀释至320 ml。将200 ml 1×凝胶缓冲 液倒入下层缓冲液槽。4. 剩余的1×
小小纳米孔破解蛋白质测序难题
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创建精准N糖蛋白质组学分析方法
《pGlyco2.0:基于综合质控和一步质谱法的精准N糖蛋白质组学糖肽分析方法》(pGlyco 2.0 enables precision N-glycoproteomics with comprehensive quality control and one-step mass s
色谱柱中封端?双封端与单封端指?
封端:键合步骤之后,用小分子硅烷将裸露的硅羟基键合,以便获得更大的覆盖率。封端多用于反相色谱键合中。封端可消除或减少可能发生的二级反应。没有封端的反相色谱填料通常比封端的有复杂多样的选择性。碱性物质在不封端的填料上,容易产生拖尾。封端基团在酸性条件下易水解,封端填料也不能在pH小于2的条件下使用。因
气相蛋白质测序仪的用途介绍
中文名称气相蛋白质测序仪英文名称gas-phase protein sequencer定 义用气相层析检测氨基酸衍生物的方法来测定蛋白质或多肽序列的仪器。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)
人N端前脑钠素(NTpro-BNP)ELISA试剂盒使用说明
原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗人 NT-pro BNP单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 NT-pro BNP与单抗结合,加入生物素化的抗人NT-pro BNP,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,
德国FESTO的端到端能力
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蛋白质自动测序仪的发展历史
1953年,瑞典化学家Edman采用异硫氰酸苯酯法测定蛋白质的N端序列,为氨基酸自动测序奠定了基础。 1967年,Edman和Begg根据异硫氰酸苯酯法测定原理设计了第一台蛋白质自动测序仪(旋转杯蛋白质测序仪),为蛋白质自动测序以及蛋白质自动测序仪的商品化生产提供了理论支持和样机。 1971
新技术实现单端高通量测序的平衡易位携带者筛查
染色体平衡易位是人类中最多见的一类染色体结构畸变,在新生婴儿中的发生率约为1/500~1/1000。平衡易位携带者通常没有临床表征,传统的诊断办法无法识别胚胎的染色体平衡易位携带状态。如今,研究人员攻克技术难关,成功研发BaseMapping技术,实现了单端高通量测序的平衡易位携带者筛查。 新
DNA的黏端和平端的区别
用限制酶切割后得到的末端齐平就是平末端,一长一短就是粘性末端根据限制性内切酶切割DNA所产生的产物末端,发现限制性内切酶对DNA的切割有两种方式,即平切和交错切。所谓平切,就是限制性内切酶在DNA双链的相同位置切割DNA分子,这样产生的末端就是平末端。交错切就是限制性内切酶在DNA双链的不同位置切割
Sirt1-N端结构域调控Srit1去乙酰化酶活性
近日,来自美国华盛顿大学医学院的研究人员在国际期刊cell reports发表了他们的最新研究进展,他们发现去乙酰化酶Sirt1的N端结构域能够促进内源性Sirt1与NF-kB p65结合,执行去乙酰化酶活性。这项研究发现了调控Sirt1去乙酰化酶活性的新机制,具有一定意义。 研究人员指出,N
首张人类蛋白质组测序草图绘成
据物理学家组织网19日报道,在人类基因组图谱(人类生命的基因“蓝图”)发布20年后,国际人类蛋白质组组织宣布,他们绘制出了人类蛋白质组首张测序草图,有望帮助科学家更好地理解生命并治疗疾病。 研究发表于最新一期《自然·通讯》杂志。研究成员之一、加拿大英属哥伦比亚大学血液研究中心的克里斯托弗·奥威尔
Nature-Methods-|-朝思暮想:单细胞蛋白质组测序之梦
近期,Nature Methods 杂志技术编辑Vivien Marx发表文章 A dream of single-cell proteomics,探讨了单细胞蛋白组学的发展,提出了该技术有可能会面对的问题和潜在解决方案。单细胞蛋白质组测序的梦想并不遥远(Credit: S. Larochell
成功的端到端称重数据集成
成功的端到端称重数据集成 February 27, 2018 - 设计单机配料控制解决方案,满足您特定的流程需求 称重流程数据向更高级别 MES 或 ERP 系统的高效传输,可确保包括配料控制系统在内的制造过程更高效、更透明。 透明度提高后,即可改善资产使用、降低运营成本,从而更易符合认证