蛋白质N端测序样品要求
检测仪器:岛津 PPSQ-31A 蛋白多肽自动测序仪 一、 蛋白质N端测序的主要应用:样品:蛋白质,多肽样品的氨基酸序列测定2.优势:能连续测定 60 个以上的氨基酸序列3.来源:天然提取(动物/植物/微生物);合成多肽;重组蛋白等二、 样品要求:纯度:>95(基于摩尔数)2.含量:50-100pmol(液体体积控制在 20ul)3.修饰封闭:N 端未被封闭4.样品形式:液体;干粉;PVDF 膜5.无干扰物:蛋白酶;氨基酸;胺;盐分;乙醛;去污剂等三、 客户提供信息:纯度:纯度检测结果及图谱信息2.修饰:样品可能修饰情况3.制备方法:如 SDS,HPLC 及其它方式4.验证目的:提供理论序列5.表观分子量其它注意事项:邮寄要求:使用干冰冷冻保2.液体样品:可用溶剂:蒸馏水、TFA 水溶液、醋酸水溶液、乙氰水溶液以及三甲基胺水......阅读全文
DNA的黏端和平端的区别
用限制酶切割后得到的末端齐平就是平末端,一长一短就是粘性末端根据限制性内切酶切割DNA所产生的产物末端,发现限制性内切酶对DNA的切割有两种方式,即平切和交错切。所谓平切,就是限制性内切酶在DNA双链的相同位置切割DNA分子,这样产生的末端就是平末端。交错切就是限制性内切酶在DNA双链的不同位置切割
蛋白质结构分析小帮手岛津蛋白测序仪PPSQ51A/53A梯度系列
在生物体内包含有各种功能的蛋白质,这些蛋白质经过处理后成为成熟蛋白质并被释放到细胞外,它们在相互作用下可能会导致疾病。为了了解这些疾病的病因、并在疾病的预防、诊断、治疗及药物开发研究等方面取得进展,鉴定微量样品氨基酸序列的蛋白质鉴定分析工作就变得越来越重要。蛋白质N-端的序列组成对于蛋白质整体的生物
首张人类蛋白质组测序草图绘成
据物理学家组织网19日报道,在人类基因组图谱(人类生命的基因“蓝图”)发布20年后,国际人类蛋白质组组织宣布,他们绘制出了人类蛋白质组首张测序草图,有望帮助科学家更好地理解生命并治疗疾病。 研究发表于最新一期《自然·通讯》杂志。研究成员之一、加拿大英属哥伦比亚大学血液研究中心的克里斯托弗·奥威尔
Nature-Methods-|-朝思暮想:单细胞蛋白质组测序之梦
近期,Nature Methods 杂志技术编辑Vivien Marx发表文章 A dream of single-cell proteomics,探讨了单细胞蛋白组学的发展,提出了该技术有可能会面对的问题和潜在解决方案。单细胞蛋白质组测序的梦想并不遥远(Credit: S. Larochell
生物物理所揭示N端乙酰化修饰促进Sir3的转录沉默功能
8月11日,Nature structural & Molecular Biology 在线发表了中科院生物物理研究所生物大分子国家重点实验室许瑞明课题组的最新研究成果。该文章题为Nα-acetylated Sir3 stabilizes the conformation of a nu
成功的端到端称重数据集成
成功的端到端称重数据集成February 27, 2018 -设计单机配料控制解决方案,满足您特定的流程需求称重流程数据向更高级别 MES 或 ERP 系统的高效传输,可确保包括配料控制系统在内的制造过程更高效、更透明。透明度提高后,即可改善资产使用、降低运营成本,从而更易符合认证标准或行业规定的要
DNA结构3′端和5′端的差异
中文名称3′端英文名称3′-end定 义DNA或RNA单链带有游离3′-羟基或其磷酸酯的一个末端。一条核酸链通常从5′端到3′端书写。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)中文名称5′端英文名称5′-end定 义DNA或RNA单链带有游离5′-羟基或其磷酸酯的一个末端。
用质谱数据对肽段从头测序实验(一)
实验方法原理单级质谱测序是分析肽段的阶梯序列,即相邻肽段间相差一个氨基酸残基,用质谱分析肽阶梯,通常用 MALDI-TOF,MS 分析。 MS/MS 测序用的是上文所述用于数据库检索的 CID 谱,但碎片离子由人工完全解析。用于MS 序列分析的肽阶梯是由化学或酶法降解肽段产生,由 C 未端或N未端断
用质谱数据对肽段从头测序实验
实验方法原理 单级质谱测序是分析肽段的阶梯序列,即相邻肽段间相差一个氨基酸残基,用质谱分析肽阶梯,通常用 MALDI-TOF,MS 分析。 MS/MS 测序用的是上文所述用于数据库检索的 CID 谱,但碎片离子由人工完全解析。用于MS 序列分析的肽阶梯是由化学或酶法降解肽段产生,由 C 未端或N未端
研究人员创建精准N糖蛋白质组学分析方法
复旦大学化学系教授杨芃原团队、中科院计算技术研究所研究员贺思敏团队、国家蛋白质科学中心(上海)研究员黄超兰团队合作,创建了基于质谱的高通量糖基化肽段分析方法,为精准N糖蛋白质组学提供了新技术。9月5日,相关研究成果发表于《自然—通讯》。 糖基化是最复杂的蛋白后修饰之一。与其他蛋白后修饰相比
蛋白质中O,N原子的数量计算公式
蛋白质中O,N原子的数量计算公式:O原子数=肽链数×2+肽键数+R基上的O原子数=各氨基酸中O原子的总数-脱去的水分子数。N原子数=肽链数+肽键数+R基上的N原子数=各氨基酸中N原子的总数。
用质谱数据对肽段从头测序实验
方案一 方案二 方案三 实验方法原理 单级质谱测序是分析肽段的阶梯序列,即相邻肽段间相差一个氨基酸残基,用质谱分析肽阶梯,通常用 MALD
蛋白质自动测序仪的工作原理
蛋白质测序仪主要检测的是蛋白质一级结构(氨基酸序列),其基本原理沿用艾德蒙(Edman)化学降解法,这也是经典的蛋白质测序方法。利用 Edman化学降解法测定蛋白质或多肽N末端序列,在测定过程中,氨基酸残基依次与异硫氰酸苯酯(PITC)作用,从蛋白质N末端依次切割下来,形成稳定的PTH氨基酸后进
蛋白质自动测序仪的日常维护
流动相的选择采用与检测器相匹配且黏度小的“HPLC”级溶剂,经过蒸馏和0.45μm的过滤去除纤维毛和未溶解的机械颗粒等,经过0.2μm的过滤可除去有紫外吸收的杂质对试样有适宜的溶解度。避免使用会引起柱效损失或保留特性变化的溶剂[1]。 水的等级需用纯化水,因为不纯物的存在会增加去离子的吸光率,
蛋白质自动测序仪的基本结构
蛋白质自动测序仪结构非常复杂,基本组成构件包括反应器、转换器、进样器、氨基酸分析系统和信息软件处理系统[1]。 反应器反应器中进行 Edman化学降解反应中偶联反应和环化裂解反应。在偶联反应之前有一个样品固定过程,即将蛋白质样品固定在纤维板上或将转印有蛋白质斑点的聚偏二氟乙烯膜(FVDF)放置
蛋白质质谱测序技术和仪器国产化
2015年10月17日,第二届全国质谱分析学术报告会在浙江大学紫荆港校区体育馆盛大开幕,在5位院士的精彩报告后,多位学者做了高水平的大会报告。 复旦大学杨芃原教授:蛋白质质谱测序技术和仪器国产化 复旦大学教授杨芃原教授做题为《蛋白质质谱测序技术和仪器国产化》的报告。蛋白质质谱测
氨基酸序列的测定方法
有两种方法,一是直接测序列法,常用Edman降解法,在弱碱性条件下多肽连N端氨基酸(阿尔发)与PITC反应,标记为苯氨基硫代甲酰蛋白质。肽链中的第一个肽键变弱,在无水酸的存在下发发生降解,第一个氨基酸(AA1)经过分子重排成为PTH-AA1结合层析技术即可确定氨基酸的性质。C端氨基酸残基分析,可用;
氨基酸序列的测定方法
有两种方法,一是直接测序列法,常用Edman降解法,在弱碱性条件下多肽连N端氨基酸(阿尔发)与PITC反应,标记为苯氨基硫代甲酰蛋白质。肽链中的第一个肽键变弱,在无水酸的存在下发发生降解,第一个氨基酸(AA1)经过分子重排成为PTH-AA1结合层析技术即可确定氨基酸的性质。C端氨基酸残基分析,可用;
DNA连接酶黏端和平端的区别
黏端和平端的区别:用限制酶切割后得到的末端齐平就是平末端,一长一短就是粘性末端根据限制性内切酶切割DNA所产生的产物末端,发现限制性内切酶对DNA的切割有两种方式,即平切和交错切。所谓平切,就是限制性内切酶在DNA双链的相同位置切割DNA分子,这样产生的末端就是平末端。交错切就是限制性内切酶在DNA
上海药物所发展出蛋白质C端化学修饰新方法
蛋白质的化学修饰可改善蛋白的理化性质,赋予蛋白新的生理学功能,如延长半衰期、标记靶标受体、调节蛋白-蛋白相互作用等,在生物技术及药学研究中具有重要意义。相较于蛋白质氨基酸侧链及N端修饰技术的发展,蛋白质C端修饰策略比较匮乏。其中,经典的C端修饰方法主要为化学酶法,需要在目标蛋白质的C端融合特定标
复旦大学等创建精准N糖蛋白质组学分析方法
复旦大学化学系教授杨芃原团队、中科院计算技术研究所研究员贺思敏团队、国家蛋白质科学中心(上海)研究员黄超兰团队合作研究,创建了基于质谱的高通量糖基化肽段分析方法pGlyco2.0,为精准N糖蛋白质组学提供了新技术。今天,相关研究成果以《pGlyco2.0:基于综合质控和一步质谱法的精准N糖蛋白质
丹磺酰化法分析蛋白质-N末端氨基酸实验
实验方法原理蛋白质的α-氨基与丹磺酰氯(DNS-Cl 是一种荧光物质) 反应, 生成DNS-蛋白质, 经水解可生成DNS-氨基酸。通过聚酰胺薄膜层析分析DNS-氨基酸, 可确定蛋白质的N-末端氨基酸。此法灵敏度高, 也可用于蛋白质的氨基酸组成的测定。聚酰胺对极性物质的吸附作用是: 它能和被吸附物质间
丹磺酰化法分析蛋白质-N末端氨基酸实验
丹磺酰化法 实验方法原理 蛋白质的α-氨基与丹磺酰氯(DNS-Cl 是一种荧光物质) 反应, 生成DNS-蛋白质, 经水解可生成DNS-氨基酸。通过聚酰
丹磺酰化法分析蛋白质-N末端氨基酸实验
实验方法原理 蛋白质的α-氨基与丹磺酰氯(DNS-Cl 是一种荧光物质) 反应, 生成DNS-蛋白质, 经水解可生成DNS-氨基酸。通过聚酰胺薄膜层析分析DNS-氨基酸, 可确定蛋白质的N-末端氨基酸。此法灵敏度高, 也可用于蛋白质的氨基酸组成的测定。聚酰胺对极性物质的吸附作用是: 它能和被
第三期柱子封端的双封端三封端到底指的是什么
(1)以气体A为研究对象,在玻璃管由水平转到竖直位置的过程中,设玻璃管横截面积是S,PA=76cmHg,VA=14S,PA′=76cmHg-L=70cmHg,VA′=lA2S,有玻意耳定律得:PAlA1S=PA′lA2S lA2=P0l1P0?6=76×1476?6cm=15.2cm从状态①→③有玻
大连化物所定量蛋白质组学新技术新方法研究取得进展
近日,中科院大连化学物理研究所生物分离分析新材料与新技术研究组(1809组)邹汉法、叶明亮研究员等人在定量蛋白质组学新技术新方法研究方面取得新进展。相关研究成果发表在最新一期的Angew. Chem. Int. Ed.上(2013年52卷,9205-9209页)。 该项研究工作利用胰蛋
n基因
(1)切割基因时选用不同限制酶,形成的黏性末端不同,这样可以防止基因自身环化和不正确的连接.切割完成后,需用DNA连接酶将两基因连接成GFP-N融合基因(以下称融合基因),由于GFP基因切割是左端,而N基因切割是右端,因此该融合基因的上游基因为N基因.(2)由于融合基因的两端限制酶切割位点分别为Ka
肱骨近端支架治疗肱骨近端骨折病例分析2
讨论肱骨近端骨折保守治疗争议 对于无移位和2部分骨折而言,长期临床观察认为保守治疗和手术治疗对其生活质量无明显影响。然而,保守治疗患者在制动早期往往出现肩关节明显疼痛、肩关节僵硬等症状。保守方式骨折端无法满意复位,也会出现骨折畸形愈合、关节面坍塌等并发症,给患者造成很大的身体和精神伤害。由
肱骨近端支架治疗肱骨近端骨折病例分析1
肱骨近端骨折约占所有成人骨折的5%。随着全球老龄化加剧,老年人发病率增加最为明显。在临床实践中,接近80%的肱骨近端骨折采用保守治疗,尤其是无明显移位和高龄患者。然而,对于3、4部分骨折等特定的骨折类型,保守处理往往预后较差,应该手术治疗。近年来随着医学科技的迅速发展,新的内置物和手术器械不断涌现,
川大华西医院研究者破译蛋白质测序难题
原文地址:http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2024/3/518754.shtm