维真稳转株构建流程(一)
稳转株即稳定表达细胞株,指的是基于某一细胞系构建的持续过表达或干扰某特定基因的细胞系。慢病毒感染-药物筛选法是目前广泛应用的稳转株构建方法,具有高效整合、目标细胞广泛等特点。一.准备及预实验确定细胞系相关信息,需包括如下内容目标细胞系培养条件目标细胞增殖速度支原体污染情况注:为避免慢病毒感染后细胞死亡,务必保证细胞无支原体污染! 预实验确定MOI值查阅文献确定慢病毒在目标细胞系中的MOI;参考查阅得到的数据,设计梯度实验,摸索最适MOI。预实验确定筛选药物用量:查阅Puromycin/Blastincidin等在目标细胞系中稳转株筛选的致死用量信息;参考查阅得到的数据,确定3个药物浓度梯度(如没有相关信息,则需将药物浓度梯度范围增大,数量增多至6个);Day0将细胞铺于6孔板中,使Day1细胞融合度约90%;Day1按(2)中设置的药物梯度,加入药物;Day4换液,并重新加入药物; Day7观察,找到致死率1......阅读全文
维真稳转株构建流程
稳转株即稳定表达细胞株,指的是基于某一细胞系构建的持续过表达或干扰某特定基因的细胞系。慢病毒感染-药物筛选法是目前广泛应用的稳转株构建方法,具有高效整合、目标细胞广泛等特点。 一.准备及预实验 确定细胞系相关信息,需包括如下内容 目标细胞系培养条件 目标细胞增殖速度 支原体污染情况
维真稳转株构建流程(二)
平板挑取法 计数100个多克隆稳转株细胞,接种于一个10cm培养盘中;注:尽量吹打均匀,防止细胞聚团。过夜培养后,观察并寻找单个细胞的位置,并在盘底做标记;培养培养2周;注:培养的第一周不要换液,接下来每3-4天换液。待标记处的细胞扩增为肉眼可见的白点,在移液器尖端吸取一点胰酶,缓慢滴至细胞处,待细
维真稳转株构建流程(一)
稳转株即稳定表达细胞株,指的是基于某一细胞系构建的持续过表达或干扰某特定基因的细胞系。慢病毒感染-药物筛选法是目前广泛应用的稳转株构建方法,具有高效整合、目标细胞广泛等特点。一.准备及预实验确定细胞系相关信息,需包括如下内容目标细胞系培养条件目标细胞增殖速度支原体污染情况注:为避免慢病毒感染后细胞死
知识分享:维真腺病毒系统产品手册
产品说明书 本产品仅限用于研究,严禁用于疾病诊断。 本产品仅供购买方内部研究使用,未经维真生物公司书面许可,严禁转售。 产品有限责任担保 维真生物公司保证您收到的产品符合产品目录上的规格。本担保规定了维真生物公司更换产品的责任。维真生物公司不提供其他任何形式的对于产品商业或健康用途的保证
知识分享:维真稳转株构建流程
稳转株即稳定表达细胞株,指的是基于某一细胞系构建的持续过表达或干扰某特定基因的细胞系。慢病毒感染-药物筛选法是目前广泛应用的稳转株构建方法,具有高效整合、目标细胞广泛等特点。 一.准备及预实验 确定细胞系相关信息,需包括如下内容 目标细胞系培养条件 目标细胞增殖速度 支原体污染情况
维真生物现货AAV产品,质量高,周期短!
维真生物已建立预制AAV成品库,涵盖各类血清型、启动子、功能元件等,多达千余种AAV对照和AAV工具,病毒滴度1E13 vg/ml以上,搭配不同的血清型和启动子,满足多样化实验需求。1、对照AAV包括各类过表达、干扰和敲除的对照病毒,大量广谱与组织特异性启动子,非荧光与携带各类荧光基团如GFP、RF
精选文献速递-|-维真生物5月高分文献汇总
维真生物始终致力于腺病毒、慢病毒、腺相关病毒载体的设计和各类病毒产品的制备,打造一站式基因基础研究CRO服务平台,为全球科研工作者提供分子克隆、基因编辑、病毒包装、细胞系建立、筛选检测、基因与细胞治疗等相关产品与服务,助力基础科研与基因治疗的高速发展!据知了窝平台不完全统计,2024年5月份引用维真
我国科研团队首次观测到真高维多体非局域性
记者3日从中国科学技术大学获悉,中国科学院院士、该校教授郭光灿团队柳必恒研究组与同行合作,在实验上实现了高保真度高维多光子纠缠态制备,并首次观测到真高维多体非局域性的存在。该研究成果日前发表在《自然·通讯》上。量子非局域性是量子力学最深刻的现象之一,揭示了量子物理与经典物理本质上的区别,同时也为量子
知识分享:维真-CreloxP-重组系统腺相关病毒产品说明
一.Cre-loxP重组系统作用原理 Cre重组酶和loxP位点 Cre重组酶(Cyclization Recombination Enzyme)由大肠杆菌噬菌体P1的Cre基因编码,是由343个氨基酸组成的38kD的蛋白质。它不仅具有催化活性,而且与限制酶相似,能够特异性识别loxP位点。
刘真:练就体细胞克隆猴技术绝活
几天前,刘真转发了一条招聘博士后的通知。“我们的设备去年底到位,年后开始调试,实验室已经开始运转了。”刘真告诉科技日报记者。 全球首例体细胞克隆猴的成功,让刘真成为猕猴体细胞克隆技术的世界“冠军”,也成为中国科学院神经科学研究所(以下简称“神经所”)最年轻的课题组负责人。 2017年底,“中
真研究问题,研究真问题
原文地址:http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2023/7/505806.shtm
维A酸和异维A酸如何影响皮肤细胞?
维A酸和异维A酸通过影响皮肤细胞的生长和分化,从而对痤疮等皮肤问题产生治疗作用。 具体来说,维A酸是一种维生素A的代谢中间体,它通过调节表皮细胞的有丝分裂和表皮细胞的更新,促进正常角化,影响上皮代谢,对上皮角细胞的生长和角质层的脱落有明显的促进作用。它还可以促使已有的粉刺去除,同时抑制新的粉刺
中国“真激光”显示技术还原“真世界”
88000流明高亮度真激光投影机点亮布达拉宫(中科极光供图) 近年来,显示技术的发展速度越来越快,分辨率从480p、1080p到4k、8K,使得电视、投影机等显示产品也迎来发展的快车道。2012年,国际电信联盟(ITU)针对高画质影像制定了最新标准BT.2020,作为未来影音广播的技术标准。 日
健康白酒是真健康还是真忽悠?
近两年来,酒企纷纷推出以“健康”为卖点的白酒产品。当白酒再次力推“健康”概念时,难免让人联想到10年前“喝酒能保肝护肝”的那场风波。而今,又有哪些企业再次入局?当白酒与健康这两个话题再次碰撞,是否又成为新一轮概念炒作? “健康”或成白酒行业发展方向 2014年,深陷产业调整的白酒企业仍未走出
为基层减负,“减真负、真减负”
减轻村级组织工作事务负担、精简村级工作机制和牌子、改进村级组织出具证明工作……近日,中共中央办公厅、国务院办公厅印发了《关于规范村级组织工作事务、机制牌子和证明事项的意见》,紧盯具体问题,持续为村级组织和村干部松绑减负,这是党中央部署推进基层减负常态化的又一有力举措。 2019年“基层减负年”以来
中国“真激光”显示技术还原“真世界”
88000流明高亮度真激光投影机点亮布达拉宫(中科极光供图) 近年来,显示技术的发展速度越来越快,分辨率从480p、1080p到4k、8K,使得电视、投影机等显示产品也迎来发展的快车道。2012年,国际电信联盟(ITU)针对高画质影像制定了最新标准BT.2020,作为未来影音广播的技术标准
真核生物激活细胞免疫疗法的技术原理
该疗法运用全数字DNA细胞智能分析仪对患者病患处进行分析,确定患病原因以及病变程度和状态,根据每个患者不同细胞病变程度。利用其完好的真核生物、DNA细胞,精准修复,安全无痛去除白斑病灶组织,检测患者原始DNA对现有的破坏链条,进行修复,促进皮肤正常细胞快速生长恢复细胞功能和特性,达到正常标准,恢
真核生物激活细胞免疫疗法的技术介绍
“真核生物激活细胞免疫疗法”是我国治疗外阴白斑病一种极为有效新方法,它与以往传统治疗方法完全不同,传统方法治疗外阴白斑,只能达到甚微的近期效果,如长期或治疗不当会产生毒副作用,甚至加重加剧病情恶化。"真核生物激活细胞免疫疗法"先进、科学、有效,治疗外阴白斑可以达到标本兼治的功效。如今,它已经成为
Science:构建出真涡虫细胞类型转录组图谱
真涡虫是一类相对简单的动物,具有不同寻常的生物学特征:成年真涡虫维持着其他有机体仅在胚胎中短暂存在的发育信息和祖细胞(progenitor cell)。真涡虫获得人们的大量研究,部分原因在于它们具有再生丢失的或受损的身体部位的独特能力。图片来自Christopher Fincher/Whiteh
维A酸如何影响皮肤细胞?
维A酸通过调节表皮细胞的有丝分裂和表皮细胞的更新,促进正常角化,影响上皮代谢,对上皮角细胞的生长和角质层的脱落有明显的促进作用。 具体来说,维A酸是一种维生素A的代谢中间体,它的作用机制包括: 调节表皮细胞的有丝分裂周期,使细胞周期缩短,促进细胞增殖和分化; 促进正常角化,影响上皮代谢,对
真核生物的特点及与原核细胞的区别
真核生物(eukaryotes)由真核细胞构成的生物。包括原生生物界、真菌界、植物界和动物界。真核生物是所有单细胞或多细胞的、其细胞具有细胞核的生物的总称,它包括所有动物、植物、真菌和其他具有由膜包裹着的复杂亚细胞结构的生物。 真核生物与原核生物的根本性区别是前者的细胞内有以核膜为边界的细胞核,因此
被“真”单细胞光环掩盖的高通量分析
01、二代“真”单细胞蛋白质组学质谱:timsTOF Ultra 2023年6月5日,在第71届ASMS会议上,布鲁克公司重磅发布了timsTOF Ultra,“真”单细胞蛋白质组学正式进入第二代。图1:成熟可复制的单细胞蛋白质组学解决方案 布鲁克第二代“真”单细胞蛋白质组学方案,打破单细胞
真核转染
一些真核蛋白在原核宿主细胞中的表达不但行之有效而且成本低廉,然而许多在细菌中合成的真核蛋白或因折叠方式不正确,或因折叠效率低下,结果使得蛋白活性低或无活性。不仅如此,真核生物蛋白的活性往往需要翻译后加工,例如二硫键的精确形成、糖基化、磷酸化、寡聚体的形成或者由特异性蛋白酶进行的裂解等等,而
维C助基因杀掉癌细胞
注射维生素C可能有助于战胜血癌。小鼠研究表明,这种营养物质能告诉失控的细胞停止分裂和死亡。 包括急性和慢性白血病在内的一些血癌,通常涉及一种影响TET2基因的突变。该基因能确保某类干细胞成熟为白细胞,然后死亡。但TET2基因突变会导致这些细胞分裂不受控制,最终导致癌症。有数据统计,美国每年由
三维细胞培养技术
三维细胞培养以常见支架三维培养模型为主,该模型能更好地模拟细胞在体的生长自然环境。定义三维细胞培养技术 ( three-dimensionalcell culture, TDCC ) 是指将具有三维结构不同材料的载体与各种不同种类的细胞在体外共同培养, 使细胞能够在载体的三维立体空间结构中迁移、生长
B细胞的高维表征分析
B淋巴细胞B淋巴细胞亦可简称B细胞,来源于骨髓的多能干细胞。B细胞在抗原刺激下可分化为浆细胞,浆细胞可合成和分泌抗体(免疫球蛋白),主要执行机体的体液免疫(humoralimmunity)。 B细胞的分化发育是由骨髓中的造血干细胞分化发育而来。与T淋巴细胞相比,它的体积略大
细胞的真核转染及共聚焦显微镜观察
实验概要本实验介绍了细胞瞬时转染与传代、细胞的裂解及共聚焦显微镜观察。主要试剂1. 裂解缓冲液配方:1%NP-40,100mM NaCl,20mM TRis pH8.0,5mM EDTA,5mM MgCl2,10% Glycerol。2. 细胞培养液成分:RPMI1640基本培养液 10%胎牛血清
甘肃真气研究所称真气运行治愈癌症
甘肃41名医疗骨干9天“打通任督二脉”日前引发关注,据了解,真气运行学医务骨干培训班是甘肃省卫生厅与李少波真气运行研究所合办的,已办过几期。研究所教师称,真气运行法可治心脏病、高血压等80多种疑难杂症。所长李天晓说,研究所培训费标准是1800元,没有经过物价部门审核。■追踪报道 >>关于骨干班
真核生物特征
原核细胞功能上与线粒体相当的结构是质膜和由质膜内褶形成的结构,但后者既没有自己特有的基因组,也没有自己特有的合成系统。真核生物的植物含有叶绿体,它们亦为双层膜所包裹,也有自己特有的基因组和合成系统。与光合磷酸化相关的电子传递系统位于由叶绿体的内膜内褶形成的片层上 。原核生物中的蓝细菌和光合细菌,虽然
泡了8年化石,发现迄今最早的多细胞真核生物
她泡了8年的化石,做了无数次实验,也曾想过要放弃,但她最终还是坚持了下来,于是有了今天的成果——1月25日,中国科学院南京地质古生物研究所(以下简称南京古生物所)研究员朱茂炎领导的地球-生命系统早期演化团队在《科学进展》(Science Advances)杂志发文,报道了团队在华北燕山地区16.3亿