免疫组化实验原理和步骤（二）

免疫组化（Elivison二步法）

（1）石蜡切片置于67℃烘箱中，烘片2小时，脱蜡至水，用pH7.4的PBS冲洗三次，每次3分钟（3×3’）。（2）取一定量pH=6.0柠檬酸盐缓冲液，加入微波盒中，微波加热至沸腾，将脱蜡水化后的组织切片置于耐高温塑料切片架上，放入已沸腾的缓冲液中，中档微波处理10分钟，取出微波盒流水自然泠却，从缓冲

免疫组化Elivison二步法

1、石蜡切片置于67℃烘箱中，烘片2小时，脱蜡至水，用pH7.4的PBS冲洗三次，每次3分钟（3×3’）。2、取一定量pH=6.0柠檬酸盐缓冲液，加入微波盒中，微波加热至沸腾，将脱蜡水化后的组织切片置于耐高温塑料切片架上，放入已沸腾的缓冲液中，中档微波处理10分钟，取出微波盒流水自然泠却，从缓冲液中

关于免疫组化法的操作步骤介绍

　　1． 切片常规脱蜡至水。如需抗原修复，可在此步后进行　　2.缓冲液洗 3min/2 次。　　3. 为了降低内源性过氧化物酶造成的非特异性背景染色，将切片放在 Hydrogen Peroxide Block 中孵育 10-15 分钟。　　4. 缓冲液洗 5min/2 次。　　5. 滴加 Ultra

微生物组影响免疫反应复杂化

这项研究今天发表在Journal of Clinical Investigation该研究还表明，这种抗微生物免疫反应可以由免疫细胞对之前与细菌接触的记忆触发，这进一步复杂化了身体接受救命新器官的能力。“以前，我们认为人类器官移植比受保护的实验室动物更不容易被接受的原因是，人类可以在器官细胞上产生交

心脏内粘液瘤的免疫组化检查

　　心脏粘液瘤是原发于心腔内最多见的一种真性肿瘤。一般认为属良性，有一些复杂的表现和恶性倾向，但也有人认为是恶性程度较低的真性肿瘤。　　免疫组化检查：作为病源探索研究已发现家族性心脏粘液瘤所有患者的细胞中染色体均有异常（单倍体），表明细胞内脱氧核糖核酸（DNA）含量不正常，而非家族性散发的心脏粘液瘤

石蜡切片(paraffin－sections)免疫组化染色步骤

1、载玻片的处理：抗原修复过程中,由于高温、高压、辐射等诸多因素的影响，极易造成脱片。这里选用ZLI-9001 APES、ZLI- 9003 HistogripTM或ZLI-9005 Poly-L-Lysine等几种试剂，对已清洗的载玻片进行处理。具体方法如下：（1）APES：现用现配。将洗净的玻片

免疫组化技术要点与常见问题

在免疫组化过程中，为了更好的说明问题和查找原因，最好设置阳性对照片（已知的高表达相应抗原的组织）和阴性对照组织片（不加一抗但是加二抗系统/不加任何 抗体两组），所有操作过程应完全一致。 染色弱或者没有染色（按照先后顺序，先排除一些简单的原因）:

免疫组化Elivison二步法

1、石蜡切片置于67℃烘箱中，烘片2小时，脱蜡至水，用pH7.4的PBS冲洗三次，每次3分钟（3×3’）。2、取一定量pH=6.0柠檬酸盐缓冲液，加入微波盒中，微波加热至沸腾，将脱蜡水化后的组织切片置于耐高温塑料切片架上，放入已沸腾的缓冲液中，中档微波处理10分钟，取出微波盒流水自然泠却，从缓冲液中

怎么看免疫组化结果检查单

1、CK-P(-)—不是癌。2、LCA（-）、CD3（肿瘤细胞一）、CD2（肿瘤细胞一）—不是淋巴瘤（恶性肿瘤）。3、Syn（-）、CgA（-）、CD56（-）—不是神经内分泌来源的肿瘤。4、Ki67(+)>80%—增殖指数很高，提示是恶性肿瘤。延展回答：做免疫组化的主要目的还是为了定位，以确定其与

免疫组化SP（streptavidinperosidase）法步骤

SP（streptavidin-perosidase）法，即链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法。按标记物质的种类，如荧光染料、放射性同位素、酶（主要有辣根过氧化物酶和碱性磷酸酶）、铁蛋白、胶体金等，可分为免疫荧光法、放射免疫法、酶标法和免疫金银法等。按染色步骤可分为直接法（又称一步法）和间接法（二

免疫组化染色具体操作步骤

　　免疫组化染色具体操作步骤介绍 　　 （以美国ZYMED公司SP试剂盒为例） 　　 1、石蜡切片脱蜡至水。 　　 2、3%H2O2室温孵育5~10分钟，以消除内源性过氧化物酶的活性。 　　 4、蒸馏水冲洗，PBS浸泡5分钟，（如需采用抗原修复，可在此步后进行）。 　　 5、 5~10%正

免疫组化染色具体操作步骤

   免疫组化染色具体操作步骤介绍    （以美国ZYMED公司SP试剂盒为例）    1、石蜡切片脱蜡至水。    2、3%H2O2室温孵育5~10分钟，以消除内源性过氧化物酶的活性。    4、蒸馏水冲洗，PBS浸泡5分钟，（如需采用抗原修复，可在此步后进行）。    5、 5~10%正常山羊血

免疫组化技术的原理、分类和优点

一、免疫组化技术的基本原理应用免疫学及组织化学原理，对组织切片或细胞标本中的某些化学成分进行原位的定性、定位或定量研究，这种技术称为免疫组织化学技术或免疫细胞化学技术。众所周知，抗体与抗原之间的结合具有高度的特异性。免疫组化正是利用这一特性，即先将组织或细胞中的某些化学物质提取出来，以其作为抗原或半

细胞爬片的免疫组化染色鉴定

实验概要本实验介绍了细胞爬片的免疫组化染色鉴定操作流程及注意事项。主要试剂PBS，0.5%Triton X-100(DPBS配)，3%H2O2，封闭血清 (5%正常二抗血清DPBS液)，一抗(PBS配，滴度1：200，湿盒)，二抗工作液(湿盒)，C液(湿盒)，DAB显色液，苏木素，树胶主要设备20m

免疫组化Elivison二步法

1、石蜡切片置于67℃烘箱中，烘片2小时，脱蜡至水，用pH7.4的PBS冲洗三次，每次3分钟（3×3’）。2、取一定量pH=6.0柠檬酸盐缓冲液，加入微波盒中，微波加热至沸腾，将脱蜡水化后的组织切片置于耐高温塑料切片架上，放入已沸腾的缓冲液中，中档微波处理10分钟，取出微波盒流水自然泠却，从缓冲液中

细胞爬片的免疫组化染色鉴定

实验概要本实验介绍了细胞爬片的免疫组化染色鉴定操作流程及注意事项。主要试剂PBS，0.5%Triton X-100(DPBS配)，3%H2O2，封闭血清 (5%正常二抗血清DPBS液)，一抗(PBS配，滴度1：200，湿盒)，二抗工作液(湿盒)，C液(湿盒)，DAB显色液，苏木素，树胶主要设备20m

免疫组化技术的原理、分类和优点

一、免疫组化技术的基本原理应用免疫学及组织化学原理，对组织切片或细胞标本中的某些化学成分进行原位的定性、定位或定量研究，这种技术称为免疫组织化学技术或免疫细胞化学技术。众所周知，抗体与抗原之间的结合具有高度的特异性。免疫组化正是利用这一特性，即先将组织或细胞中的某些化学物质提取出来，以其作为抗原或半

免疫组化检测技术共识【完整版】（五）

做好免疫组化染色必须注意的问题（一）

一、为达到免疫组织化学技术的要求，组织固定越新鲜越好。在免疫组化最后结果的判断时，常可见到均匀一片的似非特异性染色的现象，经多方研究认为，它是一种假性非特异性的染色。因为肿瘤组织中含有的抗原较易发生扩散弥散，肿瘤细胞无限制的生长和生长过速，导致肿瘤中间部分组织血液供给困难，造成缺血坏死，坏死细胞中的

做好免疫组化染色必须注意的问题（四）

九、选择合适的抗体至今为止，应用于临床的常用抗体有几十种，在这当中又可分为两种类型。1.浓缩型抗体根据近几年来使用的情况认为，它有许多优点，但也有许多不足之处：①可作为各种疾病检测的常备抗体。在各单位的常规活检诊断中，有常见的病例，也有罕见的病例，尤其是后者，有时很长时间才遇到一例，这就给抗体的应用

免疫组化染色方法（SP法和SABC法）

SP法1）脱蜡、水化；2）PBS洗2～3次各5分钟；3）3%H2O2（80%甲醇）滴加在TMA上，室温静置10分钟；4）PBS洗2～3次各5分钟； 5）抗原修复；6）PBS洗2～3次各5分钟；7）滴加正常山羊血清封闭液,室温20分钟。甩去多余液体。8）滴加Ⅰ抗50μl，室温静置1小时或者4℃过夜或者

免疫组化技术的原理、分类和优点介绍

一、免疫组化技术的基本原理应用免疫学及组织化学原理，对组织切片或细胞标本中的某些化学成分进行原位的定性、定位或定量研究，这种技术称为免疫组织化学技术或免疫细胞化学技术。众所周知，抗体与抗原之间的结合具有高度的特异性。免疫组化正是利用这一特性，即先将组织或细胞中的某些化学物质提取出来，以其作为抗原或半

免疫组化检测技术共识【完整版】（二）

SPA－在免疫组化中的应用——间接法

实验方法原理由于 SPA 能结合 IgG 的 Fc 段，因此就成为天然的抗 IgG，酶标记的 SPA 可代替酶标记的 IgG 抗血清，从而测定和定位组织内的 IgG 或免疫复合物。实验材料石蜡切片试剂、试剂盒H2O2TBS第一抗体SPA-HRPDAB二甲苯乙醇树胶实验步骤1. 石蜡切片常规脱蜡至水。

酶免疫组化技术的优缺点有哪些

应用免疫学及组织化学原理，对组织切片或细胞标本中的某些化学成分进行原位的定性、定位或定量研究，这种技术称为免疫组织化学技术或免疫细胞化学技术。抗体与抗原之间的结合具有高度的特异性。组织或细胞中凡是能作抗原或半抗原的物质，如蛋白质、多肽、氨基酸、多糖、磷脂、受体、酶、激素、核酸及病原体等都可用相应的特

酶标记抗体免疫组化染色知识点

　　（一）直接法：将酶直接标记在特异性抗体上，与组织细胞内相应的抗原进行特异性反应，形成抗原-抗体-酶复合物，最后用酶底物显色。直接法的优点在于操作简便及特异性强，缺点是敏感性低，制备的抗体种类有限。　　（二）间接法：将酶标记在第二抗体上，先将第一抗体（特异性抗体）与相应的组织抗原结合，形成抗原抗体

免疫组化技术在病理诊断中的应用

由于免疫组化具有特异性强、灵敏度高、定位准确等特点，且能将形态研究与功能研究有机地结合在一起，所以，这门新技术已被广泛地应用于生物学和医学研究的许多领域。在病理学研究中，免疫组化技术的作用和意义更为重要。以肿瘤研究为例，在免疫组化技术出现以前，对肿瘤的诊断和分类还局限于细胞水平，而引入免疫组化技术后

SPA－在免疫组化中的应用——PAP－法

SPA 可为多种示踪物（如荧光素、酶、胶体金、铁蛋白）所标记，应用较广泛的为酶标记 SPA 和金标记 SPA 技术。标记 SPA 常用的酶为 HRP，可应用于间接法染色，SPA 在 PAP 法中可代替桥抗体。实验方法原理SPA 除与标记物结合后用于代替第二抗体外，其本身可作为桥抗体用于 PAP 染色

做好免疫组化染色必须注意的问题（二）

四、切片的附贴必须牢固，必须使用合适的粘贴剂。免疫组织化学染色前的前期准备工作，就是必须对新的载玻片进行处理，新的载玻片表面看起来很干净，有人认为不需要进行任何的处理，都能够适合使用，这是一种错误的想法。新出厂的载玻片，表面复盖着开一层油脂样的物质，如果不加以处理，对切片的附贴是极为不利的。我们的做

酶免疫组化的关键环节相关介绍

　　1）标本固定　　固定的目的是①防止标本从玻片上脱落；　　②除去妨碍抗原-抗体结合的类脂，使抗原抗体结合物易于获得良好的染色结果；　　③固定的标本易于保存。固定剂的选择一般用4%多聚甲醛，但睾丸组织、眼可能要选用Bouin’s液或mDF液效果较好。　　2）脱水、石蜡包埋和制片　　脱水用梯度乙醇（由