免疫组化实验原理和步骤（二）
免疫组化问题解答1、染色过强 a 抗体浓度过高戒孵育时间过长 。降低抗体滴度、抗体孵育时间：室温1小时、或4度过夜 b 孵育温度过高超过37度。 一般在室温20-28度 c DAB显色时间过长戒浓度过高 显色时间不超过5-12分钟，以显微镜下观察为准。2、非特异性背景染色a 操作过程中冲洗不充分 ：每步冲洗3次每次5分钟。b 组织中含过氧化物酶未阻断：可再配置新鲜3%H2O2封闭孵育时间延长。c 组织中含内原性生物素：正常非免疫动物血清再封闭。d 血清蛋白封闭不充分：延长血清蛋白封闭时间。3、染色弱a 抗体浓度过低、孵育时间过短：提高抗体浓度、孵育时间不能少于60分钟。b 试剂超过有效使用时间：应更换试剂。c 操作中添加试剂时缓冲液未沥干：每步滴加试剂前沥干切片中多余的缓冲液使试剂稀释（应防止切片干燥）。d 室温太低：低于15度，要改放在37度孵育箱孵育30-60分钟，或4度冰箱过夜。e蛋白封闭过度：封闭不要......阅读全文
多聚螯合物酶组化实验——EPOS－法
长期以来，许多的研究者希望 IHC 方法更敏感、更稳定、更简单，要求多步检测系统简化，但敏感性要进一步提高，使这一技术面临巨大的挑战。在实践中，往往是步骤减少了，敏感性也降低，这是一对矛盾。一种新的多聚螯合物酶二步法在 1995 年被隆重推出，该方法与简单的二步法相比较，具有很高的敏感性、稳定性和特
多聚螯合物酶组化实验——UIP－法
实验方法原理UIP（universal immuno-enzyme polymer）法，即通用免疫酶复合物法，是 Nichirei 发明的一种新型免疫组化染色方法。其基本原理及工作流程与 EnVision 法相似，不同的是 UIP 复合物为 HRF 氨基酸-抗鼠或抗兔 IgG 复合物（N-Histo
多聚螯合物酶组化实验——PowerVision－法
实验方法原理PowerVision 系统的原理是连接抗体上紧密地连接上许许多多的酶分子，呈串珠状排列，由于利用了一种小的呈线性或很小枝状多功能试剂作为骨架分子，与酶和免疫球蛋白交联，排列紧密，形成串珠状多聚物，因此相对分子质量较小。其特点是简便、敏感。其操作流程同 EnVision 法，但一抗的稀释
多聚螯合物酶组化实验——EnVision－法
实验方法原理抗原-抗体反应结合后，第二抗体上标记有多聚化合物（葡聚糖）酶复合物（EnVision 复合物），与第一抗体结合，进而由酶作用底物进行显色定位。EnVision 复合物是利用一种多聚化合物将 HRP 或 AKP 和第二抗体（抗鼠或抗兔 IgG）同时标记在一个多聚化合物上，即形成酶-多聚化合
蛋白质分析技术(ELISA、Western－Blot、免疫荧光与免疫组化技...2
（2）间接法：细胞→3％多聚甲醛固定和渗透化→封闭→针对蛋白的特异抗体→洗涤→荧光素标记的二抗→洗涤 → 荧光显微镜观察或流式细胞计分析凋亡相关蛋白TFAR19蛋白的表达和细胞定位分析TFAR19（PDCD5）是由本研究室在国际上首先报导的一个拥有自己知识产权的人类新基因，前期的功能研究表明，它是促
血液细胞，流式细胞分析及免疫组化试剂的研制
血液细胞分析试剂研发血液常规想必是大家很熟悉的临床检测项目了，传统的检查方法是人工借助显微镜，对血液中的红细胞，白细胞，血小板进行计数和白细胞分类，费时费力。随着血液细胞分析技术的发展，自动化设备也应运而生，操作简单，准确性高，可以快速出具检测报告。那么血液细胞分析相匹配的试剂主要包括稀释液，溶血剂
免疫组化法检测细胞内表达的各种蛋白
①S100蛋白:S100蛋白是一组低分子量的钙结合蛋白，相对分子量为10x103~12x103，其氨基酸序列在脊椎动物中高度保守，与钙调蛋白具有高度同源性。目前，共发现有20种结构与功能相似、存在于不同部位，可以调节细胞内和细胞外Ca2+的S100蛋白，包括S100A1~S100A13,S100
免疫组化非特异性背景染色及其控制方法
一、非特异性染色的识别常出现在组织边缘、胶原纤维及血浆渗出处，坏死组织及固定不良的组织中心处。表现为弥漫性，均匀性的背景染色。也可以是随机分布的阳性反应产物点、团或块状。二、非特异性染色的原因1. Ig与Fc受体结合多见于冰冻切片（特别是淋巴造血组织，淋巴细胞，单核细胞，组织细胞表面多），主要是和二
免疫组化具体步骤中的一些问题
问：我现在刚开始做石蜡切片免疫组化,具体操作过程中有些问题想要咨询一下1.脱蜡至水:二甲苯I II 各10分钟后 100% 95% 85% 75%酒精各多久呢(因看各个版本的介绍都不同) 弱弱的问:只搞一个浓度的酒精如95%时间稍微长一些可以吗2.抗原修复:可以枸橼酸加热至沸腾再放入切片保温5-10
免疫组化的二抗还有区别的么！要怎么选？
免疫组化大家基本上都做过，你知道有二抗，也应该知道免疫组化的原理就是一抗结合到目标蛋白，再有二抗来进行信号放大，大概是这样： 但是你知道二抗的信号放大实际上有多种方法……这就需要你进行二抗标记方法的选择，最简单的二抗标记方法是直接法： 就是直接在二抗上标记酶，比如HRP，来进行显色，这样的二
免疫组化法检测细胞内表达的各种蛋白
①S100蛋白:S100蛋白是一组低分子量的钙结合蛋白，相对分子量为10x103~12x103，其氨基酸序列在脊椎动物中高度保守，与钙调蛋白具有高度同源性。目前，共发现有20种结构与功能相似、存在于不同部位，可以调节细胞内和细胞外Ca2+的S100蛋白，包括S100A1~S100A13,S100
植物蛋白质组学和糖基化实验
实验材料链霉亲和素-过氧化物酶 牛胰核糖核酸酶 B
免疫学实验中性粒细胞趋化试验介绍
中性粒细胞趋化试验介绍： 中性粒细胞对病原体的吞噬大致包括趋化、调理、吞噬和杀菌几个步骤，是一个非常复杂的过程。中性粒细胞在趋化因子的作用下，定向移动走向细菌周围，经过调理素作用的细菌易黏附在中性粒细胞上，使中性粒细胞膜内陷，通过胞饮作用将细菌吞入形成吞噬小包，与细胞内的溶酶体融合成噬溶酶
免疫组化染色过程中存在的问题、原因分析及对策
良好的免疫组化染色切片是正确判断染色结果的基础和前提。由于免疫组化染色过程中存在很多步骤或环节，每一个步骤或环节都可能影响到染色的最终结果，因此，要做好一张高质量的免疫组化切片并不是一件非常容易的事。需要病理技术员和病理医生密切配合、相互协调、共同努力才能保证做出合格的免疫组化切片。虽然免疫组化染
根蛋白免疫组化试剂盒的存放以及注意事项
根蛋白免疫组化试剂盒的存放以及注意事项: ELISA试剂盒收到后立即储存于2-8℃下：效期见试剂盒标签；一切成分在2-8℃下可保存至有效期。运用前：一切试剂平衡至室温：不同批次的试剂不能交流运用。 1.停止液：1瓶：12ml：0.5M硫酸：储存于2-8℃至有效期 。 2. 胎球蛋白
免疫组化染色机跟染色机一样吗
不一样。免疫组化染色机是一种用于生物学、基础医学领域的医学科研仪器，于2015年10月28日启用。技术指标可同时染30张片子。染色机主要功能病理切片染色。染色机采用全不锈钢制造，机械调速具有无噪音、调速方便等优点，适用于麻、棉、人造丝、混纺的无缝内衣、丝袜、丝绸等。
免疫组化染色机跟染色机一样吗
不一样。免疫组化染色机是一种用于生物学、基础医学领域的医学科研仪器，于2015年10月28日启用。技术指标可同时染30张片子。染色机主要功能病理切片染色。染色机采用全不锈钢制造，机械调速具有无噪音、调速方便等优点，适用于麻、棉、人造丝、混纺的无缝内衣、丝袜、丝绸等。
免疫组化染色过程中存在的问题、原因分析及其对策
良好的免疫组化染色切片是正确判断染色结果的基础和前提。由于免疫组化染色过程中存在很多步骤或环节，每一个步骤或环节都可能影响到染色的最终结果，因此，要做好一张高质量的免疫组化切片并不是一件非常容易的事。需要病理技术员和病理医生密切配合、相互协调、共同努力才能保证做出合格的免疫组化切片。虽然免疫组化染色
免疫组化染色中“杂音”染色片的种类及解决办法
免疫组化除正常的真实的阳性信号外常常会遇到不正常的背景着色，这些非正常的着色称为“杂音”染色。“杂音”染色种类繁多，产生的原因也多种多样，为了便于说明，笔者将其归纳为下面几种。1、全片着色全片着色是指整个切片全都染上了颜色，着色的强度可深可浅，总之，分不清那些组织是阳性那些组织是阴性。出现这种现象的
解析免疫组化染色出现无色片的原因及解决方法
良好的免疫组化染色切片是正确判断染色结果的基础和前提。由于免疫组化染色过程中存在很多步骤或环节，每一个步骤或环节都可能影响到染色的最终结果，因此，要做好一张高质量的免疫组化切片并不是一件非常容易的事。需要病理技术员和病理医生密切配合、相互协调、共同努力才能保证做出合格的免疫组化切片。虽然免疫组化染色
免疫组化染色机跟染色机一样吗
不一样。免疫组化染色机是一种用于生物学、基础医学领域的医学科研仪器，于2015年10月28日启用。技术指标可同时染30张片子。染色机主要功能病理切片染色。染色机采用全不锈钢制造，机械调速具有无噪音、调速方便等优点，适用于麻、棉、人造丝、混纺的无缝内衣、丝袜、丝绸等。
免疫组化方法原理解述及其中关键环节2
12、复染：目的是形成细胞轮廓，从而更好地对目标蛋白进行定位，经常用苏木素复染（胞核染料）。注意苏木素复染时间要看当时的室温、溶液的新旧、目标抗原的定位等情况，一般数秒-数分钟，胞浆蛋白可以适当时间长一点，而胞核蛋白则要短。不过这个如果染色不理想可以补救的。即：染色深则分化时间稍长些即可；染色浅则再
罗氏和Five－Prime－Therapeutics开发免疫组化化学伴随诊断试剂
分析测试百科网讯 近日，临床阶段生物技术Five Prime Therapeutics今天表示，正在与Roche合作开发免疫组化化学伴随诊断试剂，用于Five Prime的研究候选药物Bemarituzumab（一种抗FGFR2b抗体）和FPA150（一种B7 -H4抗体）。图片来源于网络
免疫组化染色过程中存在的问题、原因分析及其对策
良好的免疫组化染色切片是正确判断染色结果的基础和前提。由于免疫组化染色过程中存在很多步骤或环节，每一个步骤或环节都可能影响到染色的最终结果，因此，要做好一张高质量的免疫组化切片并不是一件非常容易的事。需要病理技术员和病理医生密切配合、相互协调、共同努力才能保证做出合格的免疫组化切片。虽然免疫组化染色
免疫组化方法的即用型二步法步骤简介
1）脱蜡、水化组织切片。 2）根据所应用的一抗的特殊要求，对组织切片进行预处理。 3)0.3%或3%H2O2去离子水孵育5分钟-30分钟，以阻断内源性过氧化物酶，PBS或TBS冲洗。 4）滴加一抗，室温或37℃孵育30~60分钟，或4℃过夜，PBS或TBS浸洗3分钟×5次。 5）滴加en
免疫组化染色过程中存在的问题、原因分析及其对策
良好的免疫组化染色切片是正确判断染色结果的基础和前提。由于免疫组化染色过程中存在很多步骤或环节，每一个步骤或环节都可能影响到染色的最终结果，因此，要做好一张高质量的免疫组化切片并不是一件非常容易的事。需要病理技术员和病理医生密切配合、相互协调、共同努力才能保证做出合格的免疫组化切片。虽然免疫组
阔然生物多重荧光免疫组化助力肿瘤精准诊疗再升级
病理诊断在肿瘤精准诊疗中扮演着非常重要的角色，病理检查是肿瘤诊断的金标准。 随着病理形态和分型越来越复杂，医疗行业的需求逐渐由定性判断转为预测性诊断，而当前的行业结构并不完善。 一方面，传统病理诊断已经越来越无法满足临床的需求，传统方法精确度不足，且目前国内存在医疗资源分布不均，病理科的巨大
中元汇吉首发病理产品－提供精准肿瘤免疫组化检测
分析测试百科网讯 2021年3月28日，第十八届中国国际检验医学暨输血仪器试剂博览会（简称“CACLP”）在重庆国际博览中心召开。在本次展会上，重庆中元汇吉生物技术有限公司发布了全新病理新产品线，向观众展现了拥有完全自主知识产权的全自动免疫组化染色仪 EXH1000，可为用户提供更加准确、高效、
原位分子杂交和免疫组化SP法对PTEN的检测
原位分子杂交和免疫组化SP法对PTEN的检测 【摘要]目的：研究原位分子杂交和免疫组化sP法检测PTEN mRNA及其蛋白在HCC中的表述隋况。方法：56例肝细胞肝癌组织、17例肝硬化组织手术切除标本，经40g／L福尔马林固定，4 m厚连续切片，HE染色，病理诊断证实。结果：HCC组织中，PTENm
免疫组化方法原理解述及其中关键环节1
一、酶免疫组化的关键环节1、标本固定：固定的目的是①防止标本从玻片上脱落；②除去防碍抗原-抗体结合的类脂，使抗原抗体结合物易于获得良好的染色结果；③固定的标本易于保存。2、脱水、石蜡包埋和制片：脱水用梯度乙醇（由低到高）充分脱水、对组织要完全浸蜡、切片时刀片要干净和锋利。否则，容易裂片和脱片等。3、