动物细胞培养及外源基因导入的原理和操作步骤（二）
实验试剂细胞营养液（DMEM液体培养基，10％胎牛血清，双抗100单位/ml），消化液（0.05％胰酶，0.53mM EDTA·Na），Hank’s液。2. 2×HBS液（280mMNaCl, 10mMKCl, 1.5mMNaHPO4·2H2O, 12mM葡萄糖，50mMHepes，pH7.05, 0.2μ过滤除菌），CaCl2（2.5M，0.2μ过滤除菌）溶液，超纯水（灭菌）。3. PBS，蛋白酶K，NP40，RNaseA，无水乙醇，酚/氯仿，DNA上样缓冲液，琼脂糖，TAE电泳缓冲液，EB。实验设备1. 10cm细胞培养皿2. 50ml、15ml一次性离心管3. 10ml玻璃吸管（灭菌），与玻璃吸管配套的吸球及胶管4. 二氧化碳培养箱5. 倒置显微镜6. 20μl，200μl微量移液器7. 1.5ml离心管（灭菌）8. 200μl微量移液器头9. 1ml微量移液器10. 低速台式离心机11. 高速台式离心机12. 4°C，－......阅读全文
动物细胞培养
动物细胞培养 基本练习 2.2 无菌技术I：吸取与移液 练习2 细胞培养介绍 2.2 无菌技术I：吸取与移液 练习3无菌技术II：准备培养基 练习4：单层细胞的换液 练习5：玻璃器皿的清洗和灭菌 练习
动物细胞培养的培养步骤
注：所有步骤应在无菌无毒的超净工作台进行。胰蛋白酶处理时间不宜过长。取离体的动物组织，器官或细胞，剪碎并加入胰蛋白酶分解成单个细胞，配置形成细胞悬液。制备动物细胞培养液体培养基（需加入血清，保证无菌无毒），将细胞接种至培养基，放入二氧化碳培养箱中进行初代培养。当细胞增殖达到一定程度，出现接触抑制现象
动物细胞培养和动物细胞培养的区别有哪些？
1、培养基不同：植物细胞（固体培养基），动物细胞（液体培养基）。 2、培养基的成分不同：动物细胞培养必须利用动物血清，植物组织培养则不需要，而需要加入植物生长素。 3、产物不同：植物组织培养最后一般得到新的植物个体，而动物细胞培养因为动物体细胞一般不能表达其全能性，因此得到的是只含同一种的细
动物细胞培养1
动物细胞的培养对（1）动物体外细胞实验较体内实验便利可多次使用具有广泛的用途（2）药物和病毒等的机制研究（3）临床前实验等的研究。实验材料动物细胞试剂、试剂盒水磷酸盐缓冲液PH试纸仪器、耗材移液管细胞培养基紫外灯玻璃器皿
动物细胞培养7
无Ca2＋和Mg2＋的 Dulbecco 磷酸盐缓冲液（D-PBSA）的制备与灭菌实验方法原理目的在常压下使用的等渗盐溶液的制备。应用用于稀释浓缩液．如稀释2.5％腆蛋白酶；胰蛋自酶消化前的预漂洗，收集细胞或换试剂时的清洗溶液。因为它不含Can+和Mg汁，NaHCO3或葡萄糖，所以不适合长时间孵育。
动物细胞培养方法
体外培养的动物细胞可分为原代细胞与传代细胞。原代细胞是指从机体取出后立即培养的细胞，进行传代培养后的细胞即称为传代细胞。 任何动物细胞的培养均需从原代细胞培养开始。动物很多组织的细胞，如幼年动物的肾、肺、卵巢、精巢、肌肉及肿瘤等组织的细胞较易培养，而神经细胞等则较难培养。原代细胞培养步骤如下：首先取
动物细胞培养培养液成分
体外细胞培养所需营养物质与体内基本相同，例如，需要糖、氨基酸、无机盐、促生长因子、微量元素等。将细胞所需的上述物质按其种类和所需数量严格配制而成的培养基，称为合成培养基。由于动物细胞生活的内环境还有一些成分尚未研究清楚，所以需要加入动物血清以提供一个类似生物体内的环境，因此在使用合成培养基时，通
动物细胞培养的培养步骤介绍
注：所有步骤应在无菌无毒的超净工作台进行。胰蛋白酶处理时间不宜过长。取离体的动物组织，器官或细胞，剪碎并加入胰蛋白酶分解成单个细胞，配置形成细胞悬液。制备动物细胞培养液体培养基（需加入血清，保证无菌无毒），将细胞接种至培养基，放入二氧化碳培养箱中进行初代培养。当细胞增殖达到一定程度，出现接触抑制现象
动物细胞培养的培养条件简介
1、无菌、无毒的环境：对培养液和所有培养用具进行无菌处理，通常还要在培养液中加入一定量的的抗生素，以防被污染。此外应定期更换培养液，以便清除代谢产物防止细胞代谢产物累积对细胞自身产生危害。 2、营养物质：无机物（无机盐、微量元素等），有机物（糖、氨基酸、促生长因子等） 3、血清和血浆 (提供
动物细胞培养——细胞培养介绍
实验方法原理目的细胞培养的评判性检查。应用检查常规维持的一致性；在复苏、传代、冻存前培养状况的评估；对新的或实验性情形反应的评估；确认明显的污染物。训练目标熟悉不同类型和不同密度的细胞培养的外观；数码或胶片相机的使用；灭菌物品和污染物间的区别，健康的和不健康的培养物间的区别；培养物生长阶段的评估。监
动物细胞培养的应用
培养各种正常或病变的动物细胞，用于生理病理研究。培养动物细胞，用于判断和检测某些物质对于细胞的毒性大小。作为动物基因工程的受体细胞。作为皮肤或器官移植的供体细胞。
动物细胞大规模培养介绍
所谓动物细胞大规模培养技术（large-scale culture technology）是指在人工条件下（设定pH、温度、溶氧等），在细胞生物反应器（bioreactor）中高密度大量培养动物细胞用于生产生物制品的技术。目前可大规模培养的动物细胞有鸡胚、猪肾、猴肾、地鼠肾等多种原代细胞及人二倍
动物细胞培养的简介
在所有的细胞离体培养中，最困难的是动物细胞培养。下面是它所需要的特殊条件。 ⑴血清：动物细胞离体培养常常需要血清。最常用的是小牛血清。血清提供生长必需因子，如激素、微量元素、矿物质和脂肪。在这里，血清等于是动物细胞离体培养的天然营养液。 ⑵支持物：大多数动物细胞有贴壁生长的习惯。离体培养常用
论动物细胞的灌注培养
动物细胞的培养技术自上世纪初出现以来，经历了一个多世纪的发展，获得了很大的进步。不仅建立了许多细胞系和培养了许多类型的原代细胞，而且开发了人工合成培养基和无血清培养基，并且出现了细胞工程，哺乳动物细胞的大规模培养获得了工业化的应用，用于生产重组蛋白、单克隆抗体等生物药、载体病毒、病毒性疫苗等。开发了
动物细胞培养的原理
动物细胞在液体培养基上进行正常的生命活动，并发生有丝分裂进行增殖。
动物细胞培养的原理
动物细胞在液体培养基上进行正常的生命活动，并发生有丝分裂进行增殖。
动物细胞培养的要求
动物细胞培养在所有的细胞离体培养中，最困难的是动物细胞培养。下面是它所需要的特殊条件。⑴血清：动物细胞离体培养常常需要血清。最常用的是小牛血清。血清提供生长必需因子，如激素、微量元素、矿物质和脂肪。在这里，血清等于是动物细胞离体培养的天然营养液。⑵支持物：大多数动物细胞有贴壁生长的习惯。离体培养常用
动物细胞培养主要仪器
一、洁净间摆放的仪器（一）提供细胞培养环境的仪器l.CO2培养箱指能精密控制并提供恒温、恒湿、洁净、恒定CO2浓度的仪器，利用该仪器可使用培养皿、多孔板（(6-96孔板）、培养方瓶等进行细胞培养。根据容积大小，有60-190L台式，也有上下堆叠落地式。根据通气状况，一般通CO2和空气，也有3气（CO
动物细胞培养——基本练习
实验方法原理这部分是一名实习生或学生应当首先接触的内容。大部分是简单易懂并易于操作的，为了使实验比较有趣，操作方案和备选方案以相互参考的方式详细列出。每一个操作方案中材料部分的指定数量见操作说明，但可以按比例调节。表2.1中黑体部分的练习是必需的。首先有必要参观介绍组织培养的设施，这可以使实习生．见
动物细胞培养的定义
动物细胞培养是从动物机体中取出相关的组织，让它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中让这些细胞生长和增殖。培养产品一般是细胞产品或细胞分泌物。
动物细胞大规模培养方法
根据动物细胞的类型，可采用贴壁培养、悬浮培养和固定化培养等三种培养方法进行大规模培养。 一、动物细胞生长特性及培养温度 1.细胞生长缓慢，易污染，培养需用抗生素 2.细胞大，无细胞壁，机械强度低，环境适应性差 3.需氧少，不耐受强力通风与搅拌 4.群体生
动物细胞大规模培养方法
根据动物细胞的类型，可采用贴壁培养、悬浮培养和固定化培养等三种培养方法进行大规模培养。 一、动物细胞生长特性及培养温度 1.细胞生长缓慢，易污染，培养需用抗生素 2.细胞大，无细胞壁，机械强度低，环境适应性差 3.需氧少，不耐受强力通风与搅拌 4.群体生长效应，贴壁生长（锚地依赖性） 5.培养过程产
哺乳动物细胞培养过程－－培养条件
哺乳动物细胞培养过程 & 培养条件导语：哺乳动物细胞在培养过程中会经过组织提取，原代培养，传代培养等过程。传代培养会根据具体情况分为细胞株培养和细胞系培养。哺乳动物细胞培养过程哺乳动物细胞在培养过程中会经过组织提取，原代培养，传代培养等过程。传代培养会根据具体情况分为细胞株培养和细胞系培养。如下对各
哺乳动物细胞培养过程－－培养条件
哺乳动物细胞培养过程哺乳动物细胞在培养过程中会经过组织提取，原代培养，传代培养等过程。传代培养会根据具体情况分为细胞株培养和细胞系培养。如下对各个过程进行简述：原代培养：从动物机体取出组织后切碎，经过各种酶（常用胰蛋白酶），螯合剂（常用EDTA）结合机械方法（吸液管反复吸吹）处理，分散成单细胞，置于
动物细胞培养的应用介绍
培养各种正常或病变的动物细胞，用于生理病理研究。培养动物细胞，用于判断和检测某些物质对于细胞的毒性大小。作为动物基因工程的受体细胞。作为皮肤或器官移植的供体细胞。
动物细胞培养的基本过程
一、准备工作准备工作对开展细胞培养异常重要，工作量也较大，应给予足够的重视，准备工作中某一环节的疏忽可导致实验失败或无法进行。准备工作的内容包括器皿的清洗、干燥与消毒，培养基与其他试剂的配制、分装及灭菌，无菌室或超净台的清洁与消毒，培养箱及其他仪器的检查与调试。二、取材在无菌环境下从机体取出某种组织
动物细胞大规模培养技术2
2、固定化方法的选择 (1) 培养规模 由于各种固定化系统可以获得相同的细胞密度，且细胞的产率主要取决于细胞的扩散，因此反应器的体积是培养规模放大的主要决定因素。虽然微载体系统可以提供最大的单元操作，但其他系统也可以通过增加单元套数而获得放大。 (2) 培养方式 除了海藻酸钙包埋法外，其他固定化基质
动物细胞大规模培养的意义
动物细胞大规模培养是指在人工条件下（设定配合、温度、溶氧等）在细胞生物反应器中高密度大量培养动物细胞用于生产生物制品的技术。目前可大规模培养的动物细胞有鸡胚、猪肾、猴肾、地鼠肾等多种原代细胞及人二倍体细胞、虫（中华仓鼠卵巢）细胞、BHK-21（仓鼠肾细胞）Vero细胞（非洲绿猴肾传代细胞，是贴壁依赖
动物细胞大规模培养技术1
一、前言动物细胞培养开始于本世纪初1962年，动物细胞培养规模开始扩大，发展至今已成为生物、医学研究和应用中广泛采用的技术方法，利用动物细胞培养生产具有重要医用价值的酶、生长因子、疫苗和单抗等，动物细胞培养已成为医药生物高技术产业的重要部分。利用动物细胞培养技术生产的生物制品已占世界生物高技术产品市
动物细胞大规模培养技术3
五、动物细胞无血清培养技术 动物细胞无血清培养是生物科学领域中的重要研究课题之一。由于无血清培养基可以是完全采用已知分子结构和构型组分的低蛋白或无蛋白培养基。因而它不仅为研究和阐明细胞生长、增殖和分化的调节机制提供了有力的工具，而且为现代生物技术，尤其是细胞工程的应用准备了更好的条件。下面就动物细