纯水对于HPLC的影响

高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography HPLC)是一种有效可靠的技术,目前已成为许多实验室研究的重要工具。HPLC最常见的一个问题就是溶剂中的污染物对分析结果的影响。颗粒颗粒可以损坏泵和注射器。颗粒也可以堵塞色谱柱并且熔化它,这会导致回压增大。颗粒还会表现为另一种固相,可能改变样品的组分。有机物超纯水中的有机物可能影响色谱峰的分离度和积分、可能导致鬼峰、还可能改变固定相的选测性以及影响色谱基线。离子离子浓度的改变会影响分离结果,部分能吸收UV的离子会对峰产生影响。某些有腐蚀性离子的还会降低高压输液泵等配件的使用寿命。胶体胶体会不可逆的吸附在固定相上面,影响柱的分离效果。微生物微生物会堵塞色谱柱,其代谢产物会增加有机物,颗粒等污染物。瓶装纯净水和蒸馏水是目前部分HPLC分析中使用的纯净水,由于瓶装纯净水和蒸馏水均只是普通纯水而不是超纯水,水中仍含有少量离子和有机物......阅读全文

HPLC峰变宽的原因

原因:a.在使用过程中柱本身退化,逐渐降低柱效; b.柱外峰宽效应。一根很好的专用柱用于另一液相色谱系统引起塔板数降低,说明新系统有很大的柱外峰宽效应; c.化学效应,多数是流动相和固定相相互作用所致,改变流动相可使宽峰有所改善。

HPLC基础知识(一)

鉴于HPLC应用在药品分析中越来越多,因此每一个药品分析人员应该掌握并应用HPLC。I.概论     一、液相色谱理论发展简况色谱法的分离原理是:溶于流动相(mobile phase)中的各组分经过固定相时,由于与固定相(stationaryphase)发生作用(吸附、分配、离子吸引、排阻、亲和

什么是HPLCUV

高效液相色谱HPLC紫外检测器UV用紫外检测器的高效液相色谱

水质对HPLC的影响

高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography \ HPLC)是一种有效可靠的技术,目前已成为许多实验室研究的重要工具。HPLC最常见的一个问题就是溶剂中的污染物对分析结果的影响。颗粒颗粒可以损坏泵和注射器。颗粒也可以堵塞色谱柱并且熔化它,这会导致回压增

HPLC良好的连接方略

毛细管对高效液相色谱分离的影响 若高效液相色谱 (HPLC) 系统采用了不适当的连接方式或者应用不正确的毛细管,均可能导致均可能导致不良的峰扩宽,色谱柱的最佳分离效率就更无从谈起。甚至还可能发生使用的柱子越细,其洗脱峰的扩宽反而越大的情况。本文将详细介绍毛细管对高效液相色谱分离的影响,

HPLC基础知识(七)

V.HPLC应用一、样品测定1.流动相比例调整:由于我国药品标准中没有规定柱的长度及填料的粒度,因此每次新开检新品种时几乎都须调整流动相(按经验,主峰一般应调至保留时间为6~15分钟为宜)。所以建议第一次检验时请少配流动相,以免浪费。弱电解质的流动相其重现性更不容易达到,请注意充分平衡柱。2.样品配

HPLC基础知识(三)

3.柱外效应速率理论研究的是柱内峰展宽因素,实际在柱外还存在引起峰展宽的因素,即柱外效应(色谱峰在柱外死空间里的扩展效应)。色谱峰展宽的总方差等于各方差之和,即:    σ2=σ2柱内+σ2柱外+σ2其它柱外效应主要由低劣的进样技术、从进样点到检测池之间除柱子本身以外的所有死体积所引起。为了减少柱外

水质对HPLC的影响

高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography \ HPLC)是一种有效可靠的技术,目前已成为许多实验室研究的重要工具。HPLC最常见的一个问题就是溶剂中的污染物对分析结果的影响。1、颗粒颗粒可以损坏泵和注射器。颗粒也可以堵塞色谱柱并且熔化它,这会导致回

HPLC基础知识(二)

3.离子交换色谱法 固定相是离子交换树脂,常用苯乙烯与二乙烯交联形成的聚合物骨架,在表面未端芳环上接上羧基、磺酸基(称阳离子交换树脂)或季氨基(阴离子交换树脂)。被分离组分在色谱柱上分离原理是树脂上可电离离子与流动相中具有相同电荷的离子及被测组分的离子进行可逆交换,根据各离子与离子交换基团具有不同的

HPLC-故障及排除方法

诊状 可能的原因 解 决 方 法 ( 一 ) 保留时间变化 1. 柱温变化柱恒温2. 等度与梯度间未能充分平衡至少用 10 倍柱体积的流动相平衡柱3. 缓冲液容量不够用 >25mmol/L 的缓冲液4. 柱污染每天冲洗柱5. 柱内条件变化稳定进样条件 , 调节流动相6. 柱快达到寿命采用保护柱( 二

HPLC流动相如何选择

对于一般的反相柱,用甲醇/水或乙腈/水作流动相。甲醇/水作流动相时,如果得到的色谱图出的峰分的不完全,可以加大水的比例。如果出得峰太靠后而分离效果又不错,可加大甲醇的比例,可使峰出的早一些。对于一些难分离的物质,要选用乙腈/水作流动相。由于高效液相色谱中流动相是液体,它对组分有亲和力,并参与固定相对

HPLC方法开法哪些事!

  开发方法或方法验证时最重要的一步就是流动相的选择和比例的调整。我想大家肯定都遇到过分离度不好或峰形不好的情况,大部分原因就是流动相没调好,那到底该怎么调,怎么选择呢?看完下文可能你就知道答案了。  01、由强到弱  一般先用90%的乙腈(或甲醇)/水(或缓冲溶液)进行试验,这样可以很快地得到分离

水质对HPLC的影响

  高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography \ HPLC)是一种有效可靠的技术,目前已成为许多实验室研究的重要工具。HPLC最常见的一个问题就是溶剂中的污染物对分析结果的影响。   1、颗粒   颗粒可以损坏泵和注射器。颗粒也可以堵塞色谱柱并

HPLC如何计算样品含量

你是用什么样的定量方法呢?如果面积归一化法的话就直接用你的待检峰面积除上你的样品所有峰面积和再乘100就是你的样品中待检成分的百分比浓度了。如果是内标或外标法应该要进标准溶液

HPLC的故障及处理

(一) 保留时间变化1.柱温变化 柱恒温。2.等度与梯度间未能充分平衡 至少用10倍柱体积的流动相平衡柱。3.缓冲液容量不够 用>25mmol/L的缓冲液。4.柱污染 每天冲洗柱。5.柱内条件变化 稳定进样条件,调节流动相。6.柱快达到寿命 采用保护柱。(二) 保留时间缩短1.流速增加 检查泵,重新

HPLC与FPLC的异同

  FPLC全称为快速蛋白液相色谱(Fast protein liquid chromatography),其原理与GX液相色谱理论类似,是由经典的液体柱层析引入气相色谱理论,并且对相体进行了改革,配用高压输液泵,采用高灵敏检测器、梯度洗脱装置、自动收集装置和微机等发展起来的现代液相色谱。  近些年

HPLC基础知识(五)

4.与检测器有关的故障及其排除1)流动池内有气泡   如果有气泡连续不断地通过流动池,将使噪音增大,如果气泡较大,则会在基线上出现许多线状“峰”,这是由于系统内有气泡,需要对流动相进行充分的除气,检查整个色谱系统是否漏气,再加大流量驱除系统内的气泡。如果气泡停留在流动池内,也可能使噪音增大,可采

超纯水有多重要?

先进、的实验室分析方法搭配高精尖的科学仪器得出的实验结果必然是越来越。其实,要得到高质量的检测数据,实验用试剂起着决定性意义。比如超纯水就是起决定性作用的实验材料。近几年来,实验室分析技术有了很大的改进。与此同时,检测仪器设备也越来越精密、灵敏,这就要求所使用的试剂、稀释剂和水要达到很高的质量标准。

基于温度梯度的HPLC分析——温度梯度淋洗的HPLC方法

在近年来所开发的一系列液相色谱方法中,温度梯度淋洗方法有着独特的应用,尤其是在要求以纯水为流动相的色谱分析中。本文介绍了如何将已存在保留时间的模型发展成为温度梯度淋洗的HPLC方法。 在高效液相色谱(HPLC)的方法开发中,原则上都是采用反复试验法来建立的,实验室用户根据自己的经验来改变一

纯水和超纯水的区别及纯水仪的工作原理

纯水和超纯水是分子 和细胞实验中常用的实验试剂,不同的实验需要的水的级别是不一样的,常常遇见刚进实验室的同学常有个疑问:纯水和超纯水是一样的么?下文主要讲述了纯水和超纯水区别以及纯水仪和超纯水仪的工作原理。 纯水和超纯水区别 在正确选择实验室超纯水机之前,我们必须很好地了解如下几个概念

纯水和超纯水的区别及纯水仪的工作原理

纯水和超纯水是分子  和细胞实验中常用的实验试剂,不同的实验需要的水的级别是不一样的,常常遇见刚进实验室的同学常有个疑问:纯水和超纯水是一样的么?下文主要讲述了纯水和超纯水区别以及纯水仪和超纯水仪的工作原理。 纯水和超纯水区别 在正确选择实验室超纯水机之前,我们必须很好地了解如下几个概念

什么是实验室超纯水系统,超纯水,纯水

  实验室超纯水系统   首先,对于实验室超纯水系统,也就是自来水或蒸馏水经过精细滤芯和活性炭滤芯进行预处理,过滤泥沙等颗粒物和吸附异味等,让自来水或蒸馏水变得更加干净,然后再经过反渗透设备进行水质纯化脱盐,纯化水进入储水箱储存起来,其水质能够到达国家三级水规范,一起反渗透设备产水的废水排掉。  反

工业纯水设备—edi超纯水设备

  随着科技的发展,我国的超纯水制取技术在近几十年来不断的发生变化,最为明显的一个区别就在于使用edi超纯水设备制取超纯水时可以将化学药品的使用减少到最低,提高水的利用率,今天将针对于每小时5吨的edi超纯水设备进行简单的讲解。  edi超纯水设备采用的是电去离子技术,而它采用的是电渗析膜分离技术与

纯水超纯水的应用和制备

随着科学技术的进步,人们对自然界中各类事物的认识都朝着微观化,本质化的方向发展,很多实验、检测对试剂或培养环境中的杂质的要求都达到了ppb级,有的甚至达到ppt级;如在生命科学研究过程中,对水中的多种污染物十分敏感,尤其重金属和可溶性有机物;HPLC中要求的超纯水等等。鉴于此,多个专业研究组织建立了

工业纯水设备—edi超纯水设备

   随着科技的发展,我国的超纯水制取技术在近几十年来不断的发生变化,最为明显的一个区别就在于使用edi超纯水设备制取超纯水时可以将化学药品的使用减少到最低,提高水的利用率,今天将针对于每小时5吨的edi超纯水设备进行简单的讲解。  edi超纯水设备采用的是电去离子技术,而它采用的是电渗析膜分离技术

工业纯水设备—edi超纯水设备

 随着科技的发展,我国的超纯水制取技术在近几十年来不断的发生变化,最为明显的一个区别就在于使用edi超纯水设备制取超纯水时可以将化学药品的使用减少到最低,提高水的利用率,今天将针对于每小时5吨的edi超纯水设备进行简单的讲解。  edi超纯水设备采用的是电去离子技术,而它采用的是电渗析膜分离技术与离

纯水超纯水的应用和制备

  随着科学技术的进步,人们对自然界中各类事物的认识都朝着微观化,本质化的方向发展,很多实验、检测对试剂或培养环境中的杂质的要求都达到了ppb级,有的甚至达到ppt级;如在生命科学研究过程中,对水中的多种污染物十分敏感,尤其重金属和可溶性有机物;HPLC中要求的超纯水等等。鉴于此,多个专业研究组织建

工业纯水设备—edi超纯水设备

   随着科技的发展,我国的超纯水制取技术在近几十年来不断的发生变化,最为明显的一个区别就在于使用edi超纯水设备制取超纯水时可以将化学药品的使用减少到最低,提高水的利用率,今天将针对于每小时5吨的edi超纯水设备进行简单的讲解。  edi超纯水设备采用的是电去离子技术,而它采用的是电渗析膜分离技术

纯水超纯水系统如何选购

  纯水超纯水系统如何选购? 可以从以下几点来购买适合的纯水系统:        1、产水水质要求  系统产水电阻率(或者是电导率二者成导数关系)要求达到多少兆欧.厘米(MΩ·cm)  系统热源指标要求达到多少 Eu/ml  系统产水菌落数要求小于多少 cfu/ml  系统产水TOC 总有机污染物希

纯水机之纯水的利益

  比方,水中含钙,但不医生告知你喝水补钙,而让你多喝牛奶,多吃钙片获取其中的活性钙(有机钙)。那些不能被人体接收的物质只能通过肝脏、肾脏排出,增添了肝脏的累赘。  水中必定要有矿物质和微量元素吗?依照医学常识,水在人体中重要担负“运输大队长”的职务,人体只有通过水分才干把人体所须要的养分物质运送到