纯水对于HPLC的影响

高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography HPLC)是一种有效可靠的技术,目前已成为许多实验室研究的重要工具。HPLC最常见的一个问题就是溶剂中的污染物对分析结果的影响。颗粒颗粒可以损坏泵和注射器。颗粒也可以堵塞色谱柱并且熔化它,这会导致回压增大。颗粒还会表现为另一种固相,可能改变样品的组分。有机物超纯水中的有机物可能影响色谱峰的分离度和积分、可能导致鬼峰、还可能改变固定相的选测性以及影响色谱基线。离子离子浓度的改变会影响分离结果,部分能吸收UV的离子会对峰产生影响。某些有腐蚀性离子的还会降低高压输液泵等配件的使用寿命。胶体胶体会不可逆的吸附在固定相上面,影响柱的分离效果。微生物微生物会堵塞色谱柱,其代谢产物会增加有机物,颗粒等污染物。瓶装纯净水和蒸馏水是目前部分HPLC分析中使用的纯净水,由于瓶装纯净水和蒸馏水均只是普通纯水而不是超纯水,水中仍含有少量离子和有机物......阅读全文

HPLC填料的选择

基质HPLC填料可以是陶瓷性质的无机物基质,也可以是有机聚合物基质。陶瓷性质的无机物基质主要是硅胶和氧化铝。陶瓷性质的无机物基质刚性大,在溶剂中不容易膨胀。HPLC级的有机聚合物是基于交联的苯乙烯-二乙烯苯或者甲基丙烯酸酯。有机聚合物基质刚性小,更易压缩。溶剂或溶质容易渗入有机质基质中,导致填料颗粒

HPLC入门问题FAQ

HPLC 篇 1 . HPLC 灵敏度不够的主要原因及解决办法 样品量不足:解决办法为增加样品量样品未从柱子中流出:可根据样品的化学性质改变流动相或柱子样品与检测器不匹配:根据样品化学性质调整波长或改换检测器检测器衰减太多:调整衰减即可。检测器时间常数太大:解决办法为降低时间参数检测器池窗污染:解决

HPLC名词术语

色谱图(Chromatogram) : 色谱柱流出物通过检测器时所产生的响应信号对时间的曲线图,其纵坐标为信号强度,横坐标为时间。色谱峰(Peak):色谱柱流出组分通过检测器时产生的响应信号。峰底(Peak Base):峰的起点与终点之间连接的直线。峰高(Peak Height):峰最大值到峰底的距

比较FPLC与HPLC

1、二者原理相同:都是由经典的液体柱层析引入气相色谱理论,并且对相体进  行了改革,配用高压输液泵,采用高灵敏检测器、梯度洗脱装置、自动收集装置和微机等发展起来的现代液相色谱。  2、特点:二者均具有快速、分辨率高、检测灵敏度高、分离效能高等特点,而且FPLC还具有柱容量大、回收效率高及不易使生物大

HPLC维护知识问答

  1、为什么溶剂和样品要过滤?   溶剂和样品过滤非常重要,它会对色谱柱、仪器起到保护作用,消除由于污染对分析结果的影响。  色谱柱:由于填料颗粒很细,色谱柱内腔很小,溶剂和样品中的细小颗粒会使色谱柱和毛细管容易堵塞。  仪器:溶剂和样品中的细小颗粒会增加进样阀的堵塞和磨损,同时也会增加泵头内的蓝

uhplc和hplc区别

hplc是高效液相色谱,uplc是超高效液相色谱,这两个的区别是超高效液相色谱借助于HPLC(高效液相色谱)的理论及原理,涵盖了小颗粒填料、非常低系统体积及快速检测手段等全新技术,增加了分析的通量、灵敏度及色谱峰容量。

HPLC入门问题FAQ

HPLC 篇 1 . HPLC 灵敏度不够的主要原因及解决办法 样品量不足:解决办法为增加样品量 样品未从柱子中流出:可根据样品的化学性质改变流动相或柱子 样品与检测器不匹配:根据样品化学性质调整波长或改换检测器 检测器衰减太多:调整衰减即可。 检测器时间常数太大:解决办法为降低时间参数 检测器池窗

HPLC基础知识

鉴于HPLC应用在药品分析中越来越多,因此每一个药品分析人员应该掌握并应用HPLC。 (一)概论 一、液相色谱理论发展简况 色谱法的分离原理是:溶于流动相(mobile phase)中的各组分经过固定相时,由于与固定相(stationary ph

HPLC基础知识

鉴于HPLC应用在药品分析中越来越多,因此每一个药品分析人员应该掌握并应用HPLC。 (一)概论 一、液相色谱理论发展简况 色谱法的分离原理是:溶于流动相(mobile phase)中的各组分经过固定相时,由于与固定相(stationary phase)发生作用(吸附、分配、离子吸引、排阻、亲和)的

HPLC分类及其原理

HPLC分类有很多种,可以根据不同的依据进行分类。1. 根据流动相和固定相的极性不同,HPLC可以分为正相色谱和反相色谱。正相高效液相色谱: 色谱柱中的固定相是由硅胶、氧化铝等极性化合物组成。当色谱运行时,由于样品中的极性化合物对固定相有较强的亲和力,使它们在色谱柱中的保留时间比非极性化合物长,因此

纯水超纯水的制备操作

随着科学技术的进步,人们对自然界中各类事物的认识都朝着微观化,本质化的方向发展,很多实验、检测对试剂或培养环境中的杂质的要求都达到了ppb级,有的甚至达到ppt级;如在生命科学研究过程中,对水中的多种污染物十分敏感,尤其重金属和可溶性有机物;HPLC中要求的超纯水等等。鉴于此,多个专业研究组织建立了

纯水和超纯水的区别

 纯水又称纯净水,是指以符合生活饮用水卫生标准的水为原水,通过电渗析器法、离子交换器法、反渗透法、蒸馏法及其他适当的加工方法,制得的密封于容器内,且不含任何添加物,无色透明,可直接饮用的水。市场上出售的太空水,蒸馏水均属纯净水。   超纯水是在纯水的基础上进一步将水中的导电介质几乎完全去除,又将水中

纯水与超纯水的区别

参照最常见的GB/T 6682-2008中的定义,分析实验室用水共分三个级别:三级水、二级水和一级水。一级水也就是我们常说的超纯水,三级水、二级水统称为纯化水。● 三级水:指用蒸馏或者离子交换等方法制取的,用于一般化学分析试验;● 二级水:指用多次蒸馏或者离子交换等方法制取的,可以用于部分无机分析试

纯水、超纯水的PH介绍

纯水/超纯水的PH一直以来,经常有客户对纯水的PH提出质疑,问题通常有2类,一是测得RO水偏弱酸性(6.0左右),二是测得RODI水(甚至已经达到10M以上的电阻率)亦呈酸性(PH=6.0左右)。  首先,RO水偏弱酸性是正常的,凡是经由RO技术获得的初级纯水基本都呈弱酸性,这是由于自来水中溶解的C

HPLCICPMS和HPLCAFS助力食品安全检测

  近期,天津滨海新区召开2011年度科学技术奖励大会,隆重表彰为滨海新区科技发展作出突出贡献的单位和科技工作者。天津检验检疫局动植物与食品检测中心申报的天津检验检疫局重点科技项目《食品安全关键因子的新型检测技术研究与应用》(TK041-2009)荣获科学技术进步奖二等奖。   该项目针

超纯水有多重要?

先进、的实验室分析方法搭配高精尖的科学仪器得出的实验结果必然是越来越。其实,要得到高质量的检测数据,实验用试剂起着决定性意义。比如超纯水就是起决定性作用的实验材料。近几年来,实验室分析技术有了很大的改进。与此同时,检测仪器设备也越来越精密、灵敏,这就要求所使用的试剂、稀释剂和水要达到很高的质量标准。

GC和HPLC的区别

Gas Chromatography 气相色谱法气相色谱系统由盛在管柱内的吸附剂(表1) 或惰性固体上涂着液体的固定相和不断通过管柱的气体的流动相组成。将欲分离、分析的样品从管柱一端加入后,由于固定相对样品中各组分吸附或溶解能力不同,即各组分在固定相和流动相之间的分配系数有差别,当组分在两相中反复多

HPLC峰变宽的原因

原因:a.在使用过程中柱本身退化,逐渐降低柱效; b.柱外峰宽效应。一根很好的专用柱用于另一液相色谱系统引起塔板数降低,说明新系统有很大的柱外峰宽效应; c.化学效应,多数是流动相和固定相相互作用所致,改变流动相可使宽峰有所改善。

HPLC的故障及处理

(一) 保留时间变化1.柱温变化       柱恒温2.等度与梯度间未能充分平衡   至少用10倍柱体积的流动相平衡柱3.缓冲液容量不够 用>25mmol/L的缓冲液4.柱污染         每天冲洗柱5.柱内条件变化   稳定进样条件,调节流动相6.柱快达到寿命   采用保护柱(二) 保留时间缩

HPLC基础知识(四)

  4.柱的使用和维护注意事项    色谱柱的正确使用和维护十分重要,稍有不慎就会降低柱效、缩短使用寿命甚至损坏。在色谱操作过程中,需要注意下列问题,以维护色谱柱。① 避免压力和温度的急剧变化及任何机械震动。温度的突然变化或者使色谱柱从高处掉下都会影响柱内的填充状况;柱压的突然升高或降低也会冲动柱内

水质对HPLC的影响

水质对HPLC的影响有机物超纯水中的有机物可能影响色谱峰的分离度和积分、可能导致鬼峰、还可能改变固定相的选测性以及影响色谱基线。离子离子浓度的改变会影响分离结果,部分能吸收UV的离子会对峰产生影响。某些有腐蚀性离子的还会降低高压输液泵等配件的使用寿命。胶体胶体会不可逆的吸附在固定相上面,影响柱的分离

HPLC直接液体导入接口

直接液体导入接口(DLI)是将HPLC的流动相沿着进样杆流动,然后通过一个直径为3-5μm的针孔,使液体射入质谱计的CI离子源中。仅仅大约10-50μl/min的液流,就如小液滴流一样可进入离子源(是传统HPLC流量的1%-5%),否则质谱计的泵系统将被损伤。当它通过一个加热的去溶剂区域时,溶剂蒸发

HPLC的故障及处理

(一) 保留时间变化1.柱温变化 柱恒温。2.等度与梯度间未能充分平衡 至少用10倍柱体积的流动相平衡柱。3.缓冲液容量不够 用>25mmol/L的缓冲液。4.柱污染 每天冲洗柱。5.柱内条件变化 稳定进样条件,调节流动相。6.柱快达到寿命 采用保护柱。(二) 保留时间缩短1.流速增加 检查泵,重新

HPLC基础知识(五)

4.与检测器有关的故障及其排除1)流动池内有气泡   如果有气泡连续不断地通过流动池,将使噪音增大,如果气泡较大,则会在基线上出现许多线状“峰”,这是由于系统内有气泡,需要对流动相进行充分的除气,检查整个色谱系统是否漏气,再加大流量驱除系统内的气泡。如果气泡停留在流动池内,也可能使噪音增大,可采

什么是HPLCUV

高效液相色谱HPLC紫外检测器UV用紫外检测器的高效液相色谱

HPLC如何计算样品含量

你是用什么样的定量方法呢?如果面积归一化法的话就直接用你的待检峰面积除上你的样品所有峰面积和再乘100就是你的样品中待检成分的百分比浓度了。如果是内标或外标法应该要进标准溶液

HPLC的故障及处理

(一) 保留时间变化 1.柱温变化 柱恒温。 2.等度与梯度间未能充分平衡 至少用10倍柱体积的流动相平衡柱。 3.缓冲液容量不够 用>25mmol/L的缓冲液。 4.柱污染 每天冲洗柱。 5.柱内条件变化 稳定进样条件,调节流动相。 6.柱快达到寿命 采用保护柱。 (二) 保留时间缩短 1.流速增

HPLC基础知识(二)

3.离子交换色谱法 固定相是离子交换树脂,常用苯乙烯与二乙烯交联形成的聚合物骨架,在表面未端芳环上接上羧基、磺酸基(称阳离子交换树脂)或季氨基(阴离子交换树脂)。被分离组分在色谱柱上分离原理是树脂上可电离离子与流动相中具有相同电荷的离子及被测组分的离子进行可逆交换,根据各离子与离子交换基团具有不同的

HPLC方法开法哪些事!

  开发方法或方法验证时最重要的一步就是流动相的选择和比例的调整。我想大家肯定都遇到过分离度不好或峰形不好的情况,大部分原因就是流动相没调好,那到底该怎么调,怎么选择呢?看完下文可能你就知道答案了。  01、由强到弱  一般先用90%的乙腈(或甲醇)/水(或缓冲溶液)进行试验,这样可以很快地得到分离