使用HUVEC细胞进行血管生成实验,并用LONZA核转仪转染a...

使用HUVEC细胞进行血管生成实验,并用LONZA核转仪转染anti-VEGFR2 siRNASrinivasan Kokatam1, Kanchan Tiwari1, Jenny Schroeder2, Andrea Toell2, Lubna Hussain3, Preeti Kapoor1.1. Lonza India Pvt Ltd, Hyderabad, India; 2. Lonza Cologne GmbH, Cologne, Germany; 3. Lonza Walkersville, Inc., Walkersville, MD, U.S.A.实验材料:英文名中文名品牌货号single donor Clonetics™ HUVECs脐静脉内皮细胞,单一供体LONZA CloneticsC2517AEGM™ 2 Media血管内皮细胞培养基LONZACC-3162ViaLight™ Plus BioAssa......阅读全文

使用HUVEC细胞进行血管生成实验,并用LONZA核转仪转染a...

使用HUVEC细胞进行血管生成实验,并用LONZA核转仪转染anti-VEGFR2 siRNASrinivasan Kokatam1, Kanchan Tiwari1, Jenny Schroeder2, Andrea Toell2, Lubna Hussain3, Preeti Kapoor1.1

细胞核转染技术原理、步骤及应用

全球公认的最高效转染技术,针对免疫细胞、神经细胞、干细胞等几乎所有的难转染细胞系或原代细胞,以及悬浮细胞。    ——Amaxa品牌Nucleofector细胞核转染技术 Amaxa®Nucleofector®技术是Lonza(原Amaxa)公司的ZL创新技术,它综合应用传统的电穿孔技术及细胞特异性

huvec细胞血管生成实验是用完全培养基重悬铺板吗

培养液变黄是因为细胞生长旺盛,代谢活跃,产生大量乳酸和CO2。从而影响了培养基的PH值,细胞也吸收了大部分的培养基影响成分,从而细胞分泌的次级代谢产物逐渐增多,环境越来越不适合细胞的继续生长。这种情况下应该更换新的培养基。细胞悬浮培养: 指的是一种在受到不断搅动或摇动的液体培养基里,培养单细胞及小细

肿瘤细胞诱导血管生成模型实验

细胞培养技术             实验方法原理 无论原发性肿瘤还是继发性肿瘤,一旦生长直径超过1~2 mm,都会有血管生成。这是由于肿瘤细胞自身可分泌多种生长因子,诱导血管生成。

肿瘤细胞诱导血管生成模型实验

            实验方法原理 无论原发性肿瘤还是继发性肿瘤,一旦生长直径超过1~2 mm,都会有血管生成。这是由于肿瘤细胞自身可分泌多种生长因子,诱导血管生成。 实验材料

国产自主第三代电转技术Celetrix——挑战Amaxa技术

某些真核动物细胞,比如原代的T细胞,神经细胞,和干细胞等,其特性决定了被广泛使用的脂质体转染等化学试剂法必定不可能获得可接受的转染效果。而病毒转染的繁琐程序和潜在危害性又使得大规模应用病毒来解决这些细胞的转染实验成为实验者不愿意选择的路径。15年前Amaxa技术出现,改进了古老的电转技术,针对真核细

脂质体介导的真核细胞转染实验——脂质体进行稳定转染

实验材料哺乳动物细胞试剂、试剂盒DMEM仪器、耗材培养箱离心管实验步骤1.  接种细胞(见“脂质体介导短暂表达”步骤1)长至50%汇片。 2.  制备DNA/脂质体混合物,转染细胞(见“脂质体介导短暂表达”步骤2和3)。3.  每孔细胞加入1 ml DMEM-20完全培养液,37℃ 培养箱培养48

细胞转染实验的实验步骤细胞转染

1)转染试剂的准备A.将400ul去核酸酶水加入管中,震荡10秒钟,溶解脂状物。B.震荡后将试剂放在-20摄氏度保存,使用前还需震荡。2)选择合适的混合比例(1:1-1:2/脂质体体积:DNA质量)来转染细胞。在一个转染管中加入合适体积的无血清培养基。加入合适质量的MyoD或者EGFP的DNA,震荡

利用-Polybrene-进行-DNA-转染实验

利用 Polybrene 进行 DNA 转染实验             实验材料 指数生长的哺乳动物细胞

利用-Polybrene-进行-DNA-转染实验

下面讲述的 Polybrene 与 DMSO 转染的方法是 Aubin 等(1997) 方法的改进。利用此方法可以有效地将质粒 DNA 转染中国仓鼠卵巢细胞与角化细胞,产生的转化体比磷酸钙-DNA 沉淀物方法的多 15 倍。但是使用高分子量 DNA 时两种方法的转染效率无明显差别。本实验来源于分子克

利用-Polybrene-进行-DNA-转染实验

实验材料 指数生长的哺乳动物细胞试剂、试剂盒 DMSO(30%) 含血清培养基Giemsa 染液甲醇Polybrene丁酸钠要转染的 DNA仪器、耗材 最低基础培养基组织培养皿实验步骤 材料缓冲液与溶液贮存液、缓冲液与试剂的成分见附录 1。稀释贮存液至所需浓度。DMSO(30%)/含血清培养基第 3

肿瘤细胞诱导血管生成模型实验——细胞培养技术

肿瘤细胞诱导血管生成实验模型可以用于:(1)建立体外实验模型,方便进一步研究;(2)观察肿瘤的生长特点以及其特殊性。实验方法原理无论原发性肿瘤还是继发性肿瘤,一旦生长直径超过1~2 mm,都会有血管生成。这是由于肿瘤细胞自身可分泌多种生长因子,诱导血管生成。实验材料肿瘤细胞试剂、试剂盒DEM藻酸钠N

核转位筛选实验(一)

优点· 可重复性表型检测· 既高通量又不牺牲质量的图像获取· 应用交互式预览,大大减少分析设置时间· 统一的统计方法使结果更准确  躁郁症(BD)是一种高度遗传性的心理疾病,它影响到全球大概1%的人口。1949 年锂被第一次应用于躁郁症,到目前为止锂仍是治疗BD 的主要药物。然而在一半的病例中,锂并

核转位筛选实验(二)

利用交互式的灵活的软件分析数据MetaXpress® 软件中的Translocation-Enhanced 应用模块可以被用来鉴定核中以及定量与细胞核相关的其余部分中ß-catenin-EGFP 的量(图3)。对细胞核区间的划分来源于被Hoechst 核染料染色的区域。然后用第二种波长的光(

huvec细胞和血管内皮细胞有什么区别

上皮细胞 尿常规的上皮细胞,是衰亡、脱落的皮细胞。没有很特定的指向意义。非SLE的人,包括正常人,有了什么相关的炎症,脱落下去,给尿常规见到了,也是有的。上皮细胞根据器官的不同而有所指不同. 内皮细胞 是分布在脑、淋巴结、肺、肝脏、脾脏等等器官组织中的一些有共同特点的吞噬细胞的总称,他们吞噬异物、细

huvec细胞和血管内皮细胞有什么区别

上皮细胞 尿常规的上皮细胞,是衰亡、脱落的皮细胞。没有很特定的指向意义。非SLE的人,包括正常人,有了什么相关的炎症,脱落下去,给尿常规见到了,也是有的。上皮细胞根据器官的不同而有所指不同. 内皮细胞 是分布在脑、淋巴结、肺、肝脏、脾脏等等器官组织中的一些有共同特点的吞噬细胞的总称,他们吞噬异物、细

huvec细胞和血管内皮细胞有什么区别

上皮细胞 尿常规的上皮细胞,是衰亡、脱落的皮细胞。没有很特定的指向意义。非SLE的人,包括正常人,有了什么相关的炎症,脱落下去,给尿常规见到了,也是有的。上皮细胞根据器官的不同而有所指不同. 内皮细胞 是分布在脑、淋巴结、肺、肝脏、脾脏等等器官组织中的一些有共同特点的吞噬细胞的总称,他们吞噬异物、细

真核转染

     一些真核蛋白在原核宿主细胞中的表达不但行之有效而且成本低廉,然而许多在细菌中合成的真核蛋白或因折叠方式不正确,或因折叠效率低下,结果使得蛋白活性低或无活性。不仅如此,真核生物蛋白的活性往往需要翻译后加工,例如二硫键的精确形成、糖基化、磷酸化、寡聚体的形成或者由特异性蛋白酶进行的裂解等等,而

真核细胞转染实验

真核细胞的转染 实验材料 真核细胞 试剂、试剂盒 脂质体 转染液

真核细胞转染实验

学习和掌握外源基因导入真核细胞的主要方法——脂质体介导的转染。了解外源基因进入的一般性方法,观测外源蛋白的表达(绿色荧光蛋白),为染色准备实验材料。实验材料真核细胞试剂、试剂盒脂质体 转染液仪器、耗材CO2孵箱 离心管 6孔板

昆虫细胞转染实验

实验材料 昆虫细胞试剂、试剂盒 胎牛血清脂质体转染剂仪器、耗材 培养皿锥形瓶培养箱离心机转子实验步骤 1.  接种2×106个Sf9细胞于60 mm 培养皿,在含10%胎牛血清的完全培养液或无血清培养液中培养,于27℃培养30~60 min,让细胞贴壁。2.  相应于毎一待转染的培养皿,吸取40

细胞转染实验目的

学习和掌握外源基因导入真核细胞的主要方法—脂质体介导的转染。了解外源基因进入的一般性方法,观测外源蛋白的表达(绿色荧光蛋白),为染色准备实验材料。

细胞转染实验介绍

一、实验目的学习和掌握外源基因导入真核细胞的主要方法——脂质体介导的转染。了解外源基因进入的一般性方法,观测外源蛋白的表达(绿色荧光蛋白),为染色准备实验材料。二、实验原理上图所示是脂质体介导转染的示意图,它显示了外源质粒进入细胞的一般过程。外源基因进入细胞主要有四种方法:电击法、磷酸钙法和脂质体介

昆虫细胞转染实验

实验材料昆虫细胞试剂、试剂盒胎牛血清脂质体转染剂仪器、耗材培养皿锥形瓶培养箱离心机转子实验步骤1.  接种2x106个Sf9细胞于60 mm 培养皿,在含10%胎牛血清的完全培养液或无血清培养液中培养,于27℃培养30~60 min,让细胞贴壁。2.  相应于毎一待转染的培养皿,吸取40 ul 无菌

昆虫细胞转染实验

基本方案             实验材料 昆虫细胞 试剂、试剂盒

昆虫细胞转染实验

基本方案             实验材料 昆虫细胞 试剂、试剂盒

CRISPRCas9基因编辑的两种不同编辑实验流程的应用(三)

Alt-R® CRISPR-Cas9实例分析1、特别优化的crRNA/tracrRNA/sgRNA长度,提高编辑性能以HPRT基因中的12个位点为靶点,分别使用Alt-R® crRNA:tracrRNA、Alt-R® crRNA XT:tracrRNA、Alt-R® sgRNA,与Alt-R®

针对特定细胞选择更有效的实验步骤

GenJet Ver.II,LipoD293及PolyJet针对哺乳动物细胞的DNA体外转染试剂,均为您提供两种不同的转染步骤——一般步骤及高级步骤,这两种步骤分别针对不同的哺乳动物细胞。高级步骤主要针对难转的哺乳动物细胞,例如:MDCK,MDA-MB231,Caco-2等细胞。使用一般的转染步

肿瘤细胞诱导血管生成模型

肿瘤细胞诱导血管生成实验可以用于:把一定数量的肿瘤细胞移植到机体内,诱导宿主局部的血管生成。实验方法原理肿瘤血管生成是指肿瘤微环境诱导的在原有血管基础上生成以毛细血管为主的血管系统,并在肿瘤组织内建立血液循环的过程。肿瘤血管生成与肿瘤微环境密切相关,受多种促血管生成因子和(或)血管生成抑制因子的调节

细胞转染实验的实验步骤

细胞传代(1)试验准备:200ul/1mlTip头各一盒(以上物品均需高压灭菌),酒精棉球,废液缸,试管架,微量移液器,记号笔,培养皿,离心管。(2)弃掉培养皿中的培养基,用1ml的PBS溶液洗涤两次。(3)用Tip头加入1mlTrypsin液,消化1分钟(37。C,5%CO2)。用手轻拍培养瓶壁,