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细胞污染过程中常见的微生物污染和预防(三)

6.非同种细胞污染即细胞交叉污染,一般来自细胞建株和细胞传代过程中两种或两种以上细胞之间的混合污染。一种是由于细胞培养操作时各细胞株所需的器材和溶液没有严格分开,往往会使一种细胞被另一种细胞污染,另一种情况则是提取原代细胞时在消化过程中由于剪割的组织块不够纯,消化时间把握不好,容易把杂质细胞消化混入原代细胞培养中。二、预防细胞污染1.室内环境(1)细胞培养室要有操作间、缓冲间和更衣室;(2)房间装修密闭性较高,且不宜开设外窗,无菌间的房顶、墙壁和地面均应光滑、无死角,室内应有紫外线杀菌装置;(3)实验台和仪器布局应合理。一般来说,二氧化碳培养箱和净化工作台或生物安全柜不应对着门摆放,离心机和显微镜不应离得太远。2.实验用品(1)购买合格的细胞,并留种冻存,必要时可将细胞悬液加入肉汤培养基或琼脂培养基中,观察是否有微生物滋生;(2)细胞培养所用物品的清洗、消毒要彻底,各种溶液灭菌除菌要仔细,操作室及剩余的无菌器材要定期清洁消毒灭菌......阅读全文

细胞污染的一些总结和心得

小生刚开始做细胞培养不久,对于一个细胞培养的新手来说,最怕的就是细胞受污染。所以本人翻阅了一些园子里的关于细胞培养过程中的污染问题的贴子,结合平时查阅资料以及这些天的细胞培养的一些心得,整理出一些关于细胞污染的东东与大家一起分享。希望能对刚踏入细胞培养的同仁们有些帮助,也希望各位达人作出补充,大家共

实用哺乳动物细胞培养手册(下)

细胞培养所用玻璃及塑料制品的清洗与消毒清洗在组织细胞培养中,体外细胞对任何有害物质都非常敏感。微生物产品附带杂物,上次细胞残留物及非营养成分的化学物质,均能影响培养细胞的生长。因此对新使用玻璃器 皿和重新使用的培养器皿都要严格彻底的清洗,且要根据器皿的组成材料不同,选择不同 的清洗方法。玻璃器皿的清

《食品中致病菌限量》(GB29921-2013)问答

  一、标准的制定目的  致病菌是常见的致病性微生物,能够引起人或动物疾病。食品中的致病菌主要有沙门氏菌、副溶血性弧菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌等。据统计,我国每年由食品中致病菌引起的食源性疾病报告病例数约占全部报告的40%至50%。  《食品安全法》规定,食品安全标准应当包括食品、食品相

细胞培养技术

实验概要细胞培养是指从体内组织取出细胞摹拟体内出现环境,在无菌、适当温度及酸碱度和一定营养条件下,使期生长繁殖,并维持其结构和功能的一种培养技术。细胞培养的培养物为单个细胞或细胞群。主要设备细胞培养设施和基本条件  1、实验室设计  细胞培养是一种无菌操作技术,要求工作环境和条件必须保证无微生物污染

细胞培养常见问题解答(二)

16 细胞欲冷冻保存时, 细胞冷冻管内应有多少细胞浓度?冷冻管内细胞数目一般为1x106 cells/ml vial, 融合瘤细胞则以5x106 cells/ml vial 为宜。17 应如何避免细胞污染?细胞污染的种类可分成细菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉浆菌。主要的污染原因为无菌操作技术不当、操作室

《食品中致病菌限量》(GB29921-2013)问答

一、标准的制定目的  致病菌是常见的致病性微生物,能够引起人或动物疾病。食品中的致病菌主要有沙门氏菌、副溶血性弧菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌等。据统计,我国每年由食品中致病菌引起的食源性疾病报告病例数约占全部报告的40%至50%。  《食品安全法》规定,食品安全标准应当包括食品、食品相关产品中的致病

细胞培养污染拯救及预防方法

概论§ 污染是细胞培养的大敌。预防和避免污染是细胞培养成功的关键之一。§ 一开始就要十分重视,防止污染,否则会前功尽弃,不仅浪费时间,而且浪费人力、物力,甚至造成无法弥补的损失。(一)污染的类型§ 细胞培养过程中的污染不仅仅指微生物,而且还包括所有混入培养环境中的、对细

冬棚养虾水质调理不可忽视

  12月,露天养殖已结束,但这个时候正是冬棚养殖,尤其是南方区域的冬棚养虾进入最关键的时期。此时,昼夜温差已经很大,外源水的藻相大都出现异常。若是棚内水质底质一旦没调理好,或引进了藻相不佳的外源水,池塘藻相、水质就会出现较大的变化,轻则对虾应激厌食、重则缺氧中毒。所以,这段时间随时查看池水变化是日

细胞培养的污染及控制

污染的类型细胞培养过程中的污染不仅仅指微生物,而且还包括所有混入培养环境中的、对细胞生存有害或造成细胞不纯的物质,包括生物和化学物质。一、细菌污染细菌污染是实验室细胞培养中常见的污染,即使在细胞培养液中加入了抗菌素(一般为预防剂量),也可能因为操作不慎而引起污染。最常见的有革兰氏阳性菌,如枯草杆菌以

PCR技术 PCR技术的应用

一滴残留在裙子上的精液使得美国总统Bill Clinton不得不坦承他与白宫实习生有不正当的关系。因为他知道现在的生物科技就连一个精子也能被用来做为证据。这种将极微量的生物标本化为可供鉴定的现代技术正是PCR(Polymerase chain reaction)--聚合

江西省医疗机构临床实验室管理办法实施细则

    第一章 总则     第一条 为加强我省医疗机构临床实验室的建设与管理,提高临床检验水平,保证医疗质量和医疗安全,根据《医疗机构临床实验室管理办法》,结合我省实际,制定本实施细则。    

接种、分离纯化和培养技术

一、接种  将微生物接到适于它生长繁殖的人工培养基上或活的生物体内的过程叫做接种。1、接种工具和方法  在实验室或工厂实践中,用得最多的接种工具是接种环、接种针。由于接种要求或方法的不同,接种针的针尖部常做成不同的形状,有刀形、耙形等之分。有时滴管、吸管也可作为接种工具进行液体接种。在固体培养基表面

PCR实验污染与对策

PCR反应的zui大特点是具有较大扩增能力与极高的灵敏性,但令人头痛的问题是易污染,极其微量的污染即可造成假阳性的产生。一、污染原因1、标本间交叉污染:标本污染主要有收集标本的容器被污染,或标本放置时,由于密封不严溢于容器外,或容器外粘有标本而造成相互间交叉污染;标本核酸模板在提取过程中,由于吸样枪

PCR检测方法

PCR反应的zui大特点是具有较大扩增能力与极高的灵敏性,但令人头痛的问题是易污染,极其微量的污染即可造成假阳性的产生。污染原因一、标本间交叉污染:标本污染主要有收集标本的容器被污染,或标本放置时,由于密封不严溢于容器外,或容器外粘有标本而造成相互间交叉污染;标本核酸模板在提取过程中,由于吸样枪污染

PCR污染与对策

PCR反应的最大特点是具有较大扩增能力与极高的灵敏性,但令人头痛的问题是易污染,极其微量的污染即可造成假阳性的产生.污染原因  (一)标本间交叉污染:标本污染主要有收集标本的容器被污染,或标本放置时,由于密封不严溢于容器外,或容器外粘有标本而造成相互间交叉污染;标本核酸模板在提取过程中,由于吸样枪污

实用哺乳动物细胞培养手册(一)

细胞培养所用玻璃及塑料制品的清洗与消毒清洗在组织细胞培养中,体外细胞对任何有害物质都非常敏感。微生物产品附带杂物,上次细胞残留物及非营养成分的化学物质,均能影响培养细胞的生长。因此对新使用玻璃器 皿和重新使用的培养器皿都要严格彻底的清洗,且要根据器皿的组成材料不同,选择不同 的清洗方法。玻璃器皿的清

微生物检测技术及其在食品安全中的应用

  【摘要】 随着科技发展和人们生活水平的提高,食品安全事件频发。如今,微生物污染造成的食源性疾病是世界食品安全中最突出的问题,食品微生物检测是食品质量安全控制方面的重要技术之一,对控制微生物引起的食源性疾病具有重要作用。本文以我国食品安全的现状为切入点,分析了食品微生物检测技术的重要性,探讨了食品

春节来了!让科学家告诉你如何做一个健康的吃货!

  马上就要过年了,吃货的春天又将来临,想必大家都已经准备好了上好的食材,时刻准备着磨刀嚯嚯向猪羊。或与家人团圆欢聚,或与朋友把酒言欢,或畅谈发小一吐不快,或智斗姑姨险避相亲,但是都逃不开一个字儿:吃!那么问题就来了:怎么海吃海喝才能不长肉呢?我们来看看达尔文怎么说:物竞天择,适者生存!这是什么意思

接种、分离纯化和培养技术

一、接种将微生物接到适于它生长繁殖的人工培养基上或活的生物体内的过程叫做接种.1、接种工具和方法在实验室或工厂实践中,用得最多的接种工具是接种环、接种针.由于接种要求或方法的不同,接种针的针尖部常做成不同的形状,有刀形、耙形等之分.有时滴管、吸管也可作为接种工具进行液体接种.在固体培养基表面要将菌液

接种、分离纯化和培养技术

一、接种    将微生物接到适于它生长繁殖的人工培养基上或活的生物体内的过程叫做接种.1、接种工具和方法    在实验室或工厂实践中,用得最多的接种工具是接种环、接种针.由于接种要求或方法的不同,接种针的针尖部常做成不同的形状,有刀形、耙形等之分.有时滴管、吸

细胞培养常见问题解答(四)

另:这里补充一下培养用品的消毒,供参考:细胞培养的最大危险是发生培养物的细菌,真菌和病毒等微生物的污染,污染主要是由于操作者的疏忽而引起,常见的原因有操作间或周围空间的不洁,培养器皿和培养液消毒不合格或不彻底,由于有关培养的每个环节的失误均能导致培养失败,故细胞培养的每个环节都应严格遵守操作常规,防

PCR污染与对策

PCR反应的最大特点是具有较大扩增能力与极高的灵敏性,但令人头痛的问题是易污染,极其微量的污染即可造成假阳性的产生. 一、污染原因 1、标本间交叉污染:标本污染主要有收集标本的容器被污染,或标本放置时,由于密封不严溢于容器外,或容器外粘有标本而造成相互间交叉污染;标本核酸模板在提取过程中,由于吸样

幽门螺杆菌研究进展

幽门螺杆菌研究进展幽门螺杆菌及其感染  1 概述  胃细菌学的研究,长期来是一个被忽视的领域。1983年Marshall和Warren从慢性活动性胃炎患者胃粘膜活检标本中分离到幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)是对这一领域重要的突破。此后不久即在国际消化病学界引起了巨大轰动,

Nature里程碑:除基因突变,“太干净”也会导致儿童癌症

  导致ALL的两步关键过程图片来源:Nature Reviews Cancer(doi:10.1038/s41568-018-0015-6)  伦敦癌症研究所的Mel Greaves教授是这篇题为“A causal mechanism for childhood acute lymphoblast

细胞培养的注意事项(二)

13.如何选择正确的血清种类?14.可否使用与原先培养条件不同的血清种类?不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源,所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清,在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同,血清使用错误常会造成细胞无法存活。15.血清灭活是否必须?这个问题

微生物组研究:关乎人类的未来

当人类第一次认识到微生物的存在时,并不知道这种个头微小的生命体是地球生态系统的基石、关系人类健康的重要因素——它不仅将极大地帮助人类克服当今所面临的生存挑战,还能提供人类未来生存之道。如今,人类基因组的神秘面纱已渐渐揭开,微生物组又成为各国生命科学竞争的焦点,纷纷启动微生物组研究计划。科学家们呼吁,

微生物组研究:关乎人类的未来

当人类第一次认识到微生物的存在时,并不知道这种个头微小的生命体是地球生态系统的基石、关系人类健康的重要因素——它不仅将极大地帮助人类克服当今所面临的生存挑战,还能提供人类未来生存之道。如今,人类基因组的神秘面纱已渐渐揭开,微生物组又成为各国生命科学竞争的焦点,纷纷启动微生物组研究计划。科学家们呼吁,

石蜡包埋组织的DNA提取及其应用

近10年来,现代分子生物学技术越来越广泛地被用于人类疾病研究的诸领域,为了解病理状态下基因组DNA的变化积累了新资料。目前认为,人类基因组并非人们想像的那样稳定,诸如基因重排、扩增、缺失,突变和DNA甲基化类型改变等时有发生,这些改变对于基因表达和调控,以及疾病过程的发展与转归等方面均具有重要意义。

刘双江纪海丽:微生物组研究:关乎人类的未来

  当人类第一次认识到微生物的存在时,并不知道这种个头微小的生命体是地球生态系统的基石、关系人类健康的重要因素——它不仅将极大地帮助人类克服当今所面临的生存挑战,还能提供人类未来生存之道。如今,人类基因组的神秘面纱已渐渐揭开,微生物组又成为各国生命科学竞争的焦点,纷纷启动微生物组研究计划。科学家们呼

PCR检测方法(一)

PCR反应的最大特点是具有较大扩增能力与极高的灵敏性,但令人头痛的问题是易污染,极其微量的污染即可造成假阳性的产生。污染原因一、标本间交叉污染:标本污染主要有收集标本的容器被污染,或标本放置时,由于密封不严溢于容器外,或容器外粘有标本而造成相互间交叉污染;标本核酸模板在提取过程中,由于吸样枪污染导致