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细胞培养 中常遇见的有细菌污染、真菌污染、支原体污染、病毒污染等，说起支原体污染，估计细胞培养的同学就开始犯愁了，细胞培养的老手都知道，支原体污染非常不易察觉，怎么才能检测支原体污染呢?1、细菌 、真菌污染的检测(1)肉眼观察 细菌 、真菌污染常在传代、换液、加样等开放性操作之后发生，而且增生迅速，若有污染，在48小时内可明显观察到。如培养液变混浊，或略加振荡有很多漂浮物漂起。(2)镜下观察 在倒置显微镜的高倍镜下可见培养液中有大量圆球状颗粒漂浮，即为细菌 污染。若细胞之间有丝状、管状、树枝状或卵形的物质常为真菌污染。(3)接种观察 采用普通肉汤接种或用未加双抗药物的培养液接种，也可发现是否有污染。支原体是一种大小介于细菌 和病毒之间(最小直径0.2um)并独立生活的微生物.约有1%可通过滤菌器。支原体无细胞壁形态呈高度多形性.可为圆形、丝状或梨形。支原体形态多变，在光......阅读全文
小生刚开始做细胞培养不久，对于一个细胞培养的新手来说，最怕的就是细胞受污染。所以本人翻阅了一些园子里的关于细胞培养过程中的污染问题的贴子，结合平时查阅资料以及这些天的细胞培养的一些心得，整理出一些关于细胞污染的东东与大家一起分享。希望能对刚踏入细胞培养的同仁们有些帮助，也希望各位达人作出补充，大家共
支原体这种微小的微生物(直径0.2-0.8 µm)，是细胞培养中令人头疼的大问题。支原体污染可能来自培养基、血清或实验操作者，会影响细胞生长率、细胞形态、基因表达、细胞代谢和细胞活力。支原体感染不易察觉，因此对培养细胞定期进行支原体检测就非常重要。 污染实验室培养细胞的支原体
支原体是一种大小介于细菌和病毒之间(最小直径0．2um)并独立生活的微生物．约有1%可通过滤菌器。支原体无细胞壁形态呈高度多形性．可为圆形、丝状或梨形。 支原体形态多变，在光境下不易看清内部结构。电镜下观察支原体膜为三层结构．其中央有电干密度大的密集颗粒群或丝状的中心束。支原体多吸附或散在于
支原体是一种大小介于细菌和病毒之间(最小直径0．2um)并独立生活的微生物．约有1%可通过滤菌器。支原体无细胞壁形态呈高度多形性．可为圆形、丝状或梨形。 支原体形态多变，在光境下不易看清内部结构。电镜下观察支原体膜为三层结构．其中央有电干密度大的密集颗粒群或丝状的中心束。支原体多吸附或散在于细胞表面
最近看大家常提到支原体污染，就翻了翻书，做了些笔记，现在贴出来和大家分享：支原体是一种大小介于细菌和病毒之间(最小直径0．2um)并独立生活的微生物。约有1%可通过滤菌器。支原体无细胞壁形态呈高度多形性。可为圆形、丝状或梨形。支原体形态多变，在光境下不易看清内部结构。电镜下观察支原体膜为三层结构。其
由于影响因素过多，细胞/组织培养中出现的一些问题往往很难分析并得到解决，因此被人戏称为“黑色艺术”或“巫术”。本文列举了一些动物细胞/组织培养中常见的问题及解决方法。 1.培养试剂的保存：血清：-5oC - -20oC 保存，避免反复冻融。培养基: 2oC – 8oC避光保存。
用好的血清，细胞一定状态良好？养细胞细心、体贴像照顾小孩纸，细胞一定「平平安安」？但 MTT 等一些细胞实验结果却异常。因为你的细胞已悄悄被支原体污染了。支原体是一种生命力顽强的细菌，它和其他细菌的区别在于，支原体没有细胞壁，只有柔软的细胞膜。娇小的身材（0.15-0.3μm）让它可以轻松穿过滤器。
最近看大家常提到支原体污染，就翻了翻书，做了些笔记，现在贴出来和大家分享：支原体是一种大小介于细菌和病毒之间(最小直径0．2um)并独立生活的微生物。约有1%可通过滤菌器。支原体无细胞壁形态呈高度多形性。可为圆形、丝状或梨形。支原体形态多变，在光境下不易看清内部结构。电镜下观察支原体膜为三层结构。其
细胞培养技术是离体方法中主要的一种，是从动物体内取出细胞，模拟体内的生理环境，在无菌、适温、丰富的营养条件下，使离体细胞生存、生长并维持结构和功能的一门技术。细胞实验是科学探究的基础，细胞实验服务可以提供包括细胞侵袭检测、细胞划痕检测以及细胞增殖实验等的研究。细胞体外培养实验对于科学研究至关重要，然
70、 血清解冻后发现有絮状沉淀物出现，该如何处理?血清中沉淀物的出现有许多种原因，但最普遍的原因是由于血清中脂蛋白的变性所造成，而血纤维蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解冻后，也会存在于血清中，亦是造成沉淀物的原因之一。但这些絮状沉淀物，并不影响血清本身的质量。 若欲去除这些絮
细胞培养技术是离体方法中主要的一种，是从动物体内取出细胞，模拟体内的生理环境，在无菌、适温、丰富的营养条件下，使离体细胞生存、生长并维持结构和功能的一门技术。细胞实验是科学探究的基础，细胞实验服务可以提供包括细胞侵袭检测、细胞划痕检测以及细胞增殖实验等的研究。细胞体外培养实验对于科学研究至关重要，然
细胞株若受到细菌、真菌、支原体、或是特定病毒等之污染时，会严重的影响实验的结果。而细菌、真菌等之微生物污染时，较易自培养基等的外观变化察觉。但是若受到支原体之污染时，细胞之外观较无明显变化，但是其污染会造成细胞之生长速率缓慢、细胞产生病变之型态改变等等变化。各国细胞库支原体污染的统计表，如下：&nb
培养细胞时，发现细胞增殖变慢、形态渐渐改变，是血清或培养基的问题吗？很有可能是你的细胞污染了~~~~~支 原 体 污 染细胞污染可分为细菌、霉菌、酵母菌、支原体污染，其中支原体污染发生的概率>50%。支原体(Mycoplasma) 是最小的原核生物，约0.1-0.3μm，可穿透0.22-0.4
支原体是一类缺乏细胞壁的原核细胞型微生物，大小一般在0.3-0.5μm之间，呈高度多形性，有球形、杆形、丝状、分枝状等多种形态。它不同于细胞，也不同于病毒。支原体用普通染色法不易着色，用姬姆萨染色很浅，革兰染色为阴性。支原体可在鸡胚绒毛尿囊膜上或细胞培养中生长，营养要求比细菌高。细胞培养（特别是传代
孩子感冒咳嗽老不好，吃了抗生素也没有用，小心是支原体惹的祸。支原体与人类健康关系最为密切的有4种，即肺炎支原体、人型支原体、解脲支原体与生殖支原体。其中，肺炎支原体对宝宝的危害最大，是引发肺炎的祸首之一（后三者主要引起泌尿生殖道感染），称为支原体肺炎。支原体一年四季都可侵袭宝宝，春季尤其猖獗，小自婴
一、简介：支原体的大小为 0.1～0.3μm，可通过滤菌器，常给细胞培养工作带来污染的麻烦。菌落小（直径 0.1~1.0 mm），在固体培养基表面呈特有的「油煎蛋」状。无细胞壁，不能维持固定的形态而呈现多形性，对渗透压敏感，对抑制细胞壁合成的抗生素不敏感。革兰氏染色不易着色，故常用 Giemsa 染
细胞培养中最令人头疼的问题之一是支原体的污染。在人们日常生活工作环境中，支原体无处不在，它可以通过人的毛发、口腔、穿着的衣服、动物的皮毛以及日常的细胞培养的操作环境造成对细胞污染。据说有11%的细胞株均受到不同程度的支原体污染，更有统计细胞培养中支原体感染发生率达到63%，对实验结果会产生不可预期的
细胞污染是细胞培养的大敌，预防和避免污染是细胞培养成功的关键。一旦轻敌就会前功尽弃，不仅浪费时间，而且浪费人力、物力，甚至造成无法弥补的损失。而且小编的童鞋也经常向我抱怨：每到毕业季，就蓝瘦，香菇是因为细胞死了一批又一批，毕业遥遥无期啊！那么如何打一场漂亮的细胞保卫战呢？下面就跟随小编一起来学起来吧
26、PFHM-II 和HYBRIDOMA-SFM之间有什么差别？ PFHM-II (Protein-free Hybridoma Medium)是不包含有蛋白质的单克隆抗体生产培养基。如果作为杂交瘤生产培养基使用，PFHM-II可能需要补充低水平的血清。HYBRIDOMA-SFM即是杂交瘤生产培养
在细胞培养过程中会出现这样或那样的问题，这些问题从细胞生长角度来说，针对细胞不贴壁、生长缓慢、生长不好，甚至死亡的原因，我们做以下分析并提出相对应的解决方法。一、培养细胞不贴壁可能原因： •胰蛋白酶消化过度；•支原体污染；•培养基pH值过碱（NaHCO3分解）；•细胞老化；•接种细胞起始浓
在本章节我们解释了转染体系的关键组分对细胞转染 实验的效率有何影响，并且合理的给予您一些关于如何使它们更有利于您研究方面的提示。 【组织培养试剂】 一般提示：优化您的细胞生长条件。只使用新鲜配制的培养基和添加剂，并经可能减少所用试剂的变更。 基础培养基—目前所使用的各
实验方法原理1975年，Kohler和Milstein发现将小鼠骨髓瘤细胞和绵羊红细胞免疫的小鼠脾细胞进行融合，形成的杂交细胞既可产生抗体，又可无限增殖，从而创立了单克隆抗体杂交瘤技术。这一技术上的突破不仅为医学与生物学基础研究开创了新纪元，也为临床疾病的诊、防、治提供了新的工具。 制备单
实验方法原理 1975年，Kohler和Milstein发现将小鼠骨髓瘤细胞和绵羊红细胞免疫的小鼠脾细胞进行融合，形成的杂交细胞既可产生抗体，又可无限增殖，从而创立了单克隆抗体杂交瘤
淋巴细胞杂交瘤单克隆抗体技术 实验方法原理 1975年，Kohler和Milstein发现将小鼠骨
1975年，Kohler和Milstein发现将小鼠骨髓瘤细胞和绵羊红细胞免疫的小鼠脾细胞进行融合，形成的杂交细胞既可产生抗体，又可无限增殖，从而创立了单克隆抗体杂交瘤技术。这一技术上的突破不仅为医学与生物学基础研究开创了新纪元，也为临床疾病的诊、防、治提供了新的工具。 制备单克隆抗体包括动物免疫
13.离心动物细胞的离心速率： 回收动物细胞，离心速率一般为300g，5 - 10 分钟，离心强度过大将造成细胞破裂死亡。 14.细胞生长缓慢：1）换用了不同的培养基或血清，解决方法是可比较不同培养基成分，用生长实验比较以前批次和新批次的血清， 提高接种细胞数，使
无血清培养基的出现是培养基发展历程上的一个里程碑，其一般是在合成培养基的基础上，引入成分完全明确的或部分明确的血清替代成分，使培养基能满足动物细胞培养的要求，又可有效的克服因使用血清所引发的问题。进入20世纪80年代后，新的无血清培养基不断问世，人们经过研究发现，只要在培养基中增加某些适于细胞生长的
检测抗体的方法应根据抗原的性质、抗体的类型不同，选择不同的筛选方法，一般以快速、简便、特异、敏感的方法为原则。 常用的方法有: 1. ELISA用于可溶性抗原蛋白质、细胞和病毒等McAb的检测。 2. RIA用于可溶性抗原、细胞McAb的检测。 3. FACS荧光激活细胞分类仪用于检查细胞
念珠菌污染呈链状排列，呈卵圆形散在细胞周边和细胞之间。图5 白色念珠菌污染 常见的细胞污染之一，左侧为倒置显微镜下视图，右侧为革兰氏染色图片，其中，长梭型的是处于分裂期的链珠菌酵母污染很容易观察到，培养物变浑浊，尤其在后期。一般pH值变化很小，严重时，pH值升高。显微镜下呈卵圆形或球形颗粒，有些会芽
每当John Hogenesch看到自己实验员的脸上布满阴云，他就知道细胞培养又出了岔子。这时他就会建议，“检查下支原体污染吧”。 在细胞研究领域，支原体是臭名昭著的污染源，许多实验室都深受其害。日前宾夕法尼亚大学的研究人员发现，支原体污染比我们想象的更加普遍，Nature网站特别刊文对此进行