应用原代细胞进行高通量复杂炎症分析（二）
抗炎化合物抑制黏附分子潜在抗炎化合物比较多通路炎症实验高通量实验评估抗炎化合物效力总结- 我们通过检测标记抗体与粘附分子的结合，可以有效的评估抗炎化合物的效能。- 我们已经测试了多种炎症因子和抗炎药物组合对HUVEC细胞的不同处理条件下，细胞炎症标记，如VCAM,E-selectin，HLA-DR,CD31的表达水平。- 运用多通道的IsoCyte 或 SpectraMax® M5可以有效监测炎症标记的上调和下调。- 我们的数据包括利用3种已知的抗炎化合物：AG126，SB202190和PDTC来评估抗炎分子的效力。- 在高通量兼容模式下，我们可以在96孔和384孔板水平上用多通路炎症实验检验抗炎化合物的效力。......阅读全文
应用原代细胞进行高通量复杂炎症分析（二）
抗炎化合物抑制黏附分子潜在抗炎化合物比较多通路炎症实验高通量实验评估抗炎化合物效力总结- 我们通过检测标记抗体与粘附分子的结合，可以有效的评估抗炎化合物的效能。- 我们已经测试了多种炎症因子和抗炎药物组合对HUVEC细胞的不同处理条件下，细胞炎症标记，如VCAM,E-selectin，HLA-DR,
应用原代细胞进行高通量复杂炎症分析（一）
前言炎症反应的一个重要步骤是细胞表面抗原与血管中免疫细胞的特异性结合。因此，对这些分子变化的及时监控，如VCAM,E-selectin，以及内皮细胞上的HLADR等等，可以为细胞水平的炎症模型提供有效的生理指标上的支持。我们用多通道荧光读取人原代细胞表面的炎症标记，并在此基础上评估不同介质对炎症反应
原代细胞应用困局
经过一次传代后，原代细胞培养物就会成为二级细胞培养物，也称为细胞株。然而，尽管称为细胞株，但其寿命是有限的（除非如前所述永生化）。这种有限的分裂能力体内的细胞相似，一旦细胞在体内完全分化以发挥其特殊功能，细胞将停止增殖-这是固有的癌症保护性衰老过程。此外，某些原代细胞有丝分裂后，无论是在体内或体
如何进行细胞原代培养
如何进行细胞原代培养细胞原代培养和传代培养的区别原代细胞(primary cell) 是指从机体的组织(如人组织、小鼠组织、大鼠组织和兔组织等)经蛋白酶或其它的方法获得单个细胞并在体外进行模拟机体培养的细胞，称为原代细胞。一般认为，培养的原代的第1代细胞和传代到第10代以内的细胞统称为原代细胞培养。
如何进行细胞原代培养
如何进行细胞原代培养细胞原代培养和传代培养的区别原代细胞(primary cell) 是指从机体的组织(如人组织、小鼠组织、大鼠组织和兔组织等)经蛋白酶或其它的方法获得单个细胞并在体外进行模拟机体培养的细胞，称为原代细胞。一般认为，培养的原代的第1代细胞和传代到第10代以内的细胞统称为原代细胞培养。
原代细胞培养的应用
1、为研究生物体细胞的生长、代谢、繁殖提供有力的手段； 2、为传代培养创造条件； 3、服务于临床实践，用于药物筛选等。
原代细胞培养之——细胞分离技术（二）
（2） 胶原酶（Collagenase）消化法 胶原酶是一种从细菌中提取出来的酶，对胶原有很强的消化作用。适于消化纤维性组织、上皮组织以及癌组织，它对细胞间质有较好的消化作用，对细胞本身影响不大，可使细胞与胶原成分脱离而不受伤害。该酶分离效果好，即使有钙、镁离子存在仍有活性，故可用PBS和含血清的
原代细胞基本实验技术小结（二）
D 原代细胞传代技术 一、贴壁细胞的消化法传代 1、吸除或倒掉瓶内旧培养液。 2、加入1ml左右消化液（胰蛋白酶或与EDTA混合液）轻轻摇动培养瓶，使瓶底细胞都浸入溶液中。 3、消化2-5分钟后把培养瓶放置在显微镜下进行观察，发现原贴壁的细胞逐渐趋于圆形，在还未漂起时，弃去消化液，加入培养液终止消化
浅谈原代细胞培养那些事（二）
四、原代细胞培养流程（例：乳鼠肺组织）1.取材：将1-3天新生乳鼠尾巴提起，整个身体浸入装有75%酒精的烧杯中3秒左右（默数5下），取出放置到灭菌的培养皿中，移入工作台内。小鼠仰位固定在泡沫塑料板上，大头针分别固定头、尾和四肢。用碘酒、75%酒精消毒胸廓部位皮肤。在胸廓正中线中位处，用两把眼科弯镊夹
SpectraMax－M系列微孔板读板机应用集锦（三）
应用原代细胞进行高通量复杂炎症分析炎症反应的一个重要步骤是细胞表面抗原与血管中免疫细胞的特异性结合。因此，对这些分子变化的及时监控，如VCAM, E-selectin，以及内皮细胞上的HLADR等等，我们用多通道荧光读取人原代细胞表面的炎症标记，并在此基础上评估不同介质对炎症反应的调节作用。
llumina高通量测序平台的应用（二）
3、可逆化学阻断技术测序 利用边合成边测序(Sequencing by synthesis)的原理，加入改造过的DNA聚合酶和带有4种荧光标记的dNTP。这些核苷酸是“可逆终止子”，因为3’羟基末端带有可化学切割的部分，每个循环它只容许掺入单个碱基。去除其他多余的dNTP后，用激光扫描
高通量细胞分析设备简介
仪器主要用途：可用于细胞的定性和定量分析（包括检测细胞表面和细胞浆抗原、细胞因子、细胞内DNA、RNA含量等，定量分析细胞内pH值，蛋白总含量、DNA及RNA含量、免疫表现、细胞周期动力学、细胞特殊配体、细胞生物活性鉴定、细胞凋亡研究、细胞功能分析、钙流等），并将具有将特定形状或功能的细胞从混合
体外培养的原代细胞是如何进行培养的
体外培养的原代细胞是如何进行培养的，如果我们在进行体外培养，则就是一个原代细胞划细胞植株要要体外进行一个持续性的培养，则就是必须进行传代。这样方便于获得稳定的细胞植株或是大量的同种细胞，同时还可以维持细胞的种类的一个延续，传代培养的累计次数则就是细胞的代数。同时对于不同的动物与人的正常细胞在体外培养
原代细胞分析之全攻略
原代细胞转录组学和蛋白质组学NanoString Technologies的科学家发现，细胞群体的RNA平均表达水平不一定与群体中单个细胞的RNA表达相同。例如，有些基因持续在低水平表达，而另一些则在短时间内大量表达。对宏观测定而言，这样的表达模式被平均化。该公司独特的数字表达谱分析系统能直接对单个
用新型自动细胞成像系统和细胞分析软件进行基...（二）
评价化合物对心机细胞毒性的作用评价心肌细胞毒性影响，使用各种不同的心肌细胞毒性化合物处理 24 小时，然后活细胞通过 Hoechst 核染料分子标记后，MitoTracker Orange 染料标记和 AF-488 连接的鬼笔环肽染料来检测细胞骨架的完整性。利用 ImageXpress Pi
高通量细胞分析产品推荐
生化药物筛选虽然十多年前就已经规范化了，但药物疗效并不是总能实现预期效果的。在试管中看起来效果不错的靶标，在动物或者人类试验中却结果不佳，这一部分是由于毒性的问题，另外一部分则是由于药物在体内被处理的过程，与在单纯化学相互作用环境中的不同。科学家们希望能通过以细胞为基础的分析方法，来进行药物研发
单细胞多组学高通量测序平台（二）
虽然single-cell sequencing的方法仍在不断推出，但是目前使用最为广泛、商业化成熟的方法仍是10×Genomics公司推出的ChromiumTM系统。1.2以RNA-seq为例介绍高通量单细胞测序技术单细胞测序的最主要难点是如何在短时间内分离得到最可能多的单个细胞，早期的技术代表F
原代细胞培养经典案例和细胞药筛介绍（二）
3、神经元细胞原代培养 步骤：1）出生 2 d SD大鼠经戊巴比妥钠麻醉后，碘酒、75％乙醇消毒腹部皮肤，依次剪开皮肤、肌肉、皮下筋膜，无菌操作下取出胚胎放入预冷的D-Hanks平衡盐液中。2）在解剖显微镜下分离并取出胚胎大脑皮层，除去脑膜，剪碎组织成约1mm3大小，加入胰酶-EDTA消化液并放入3
人原代牙周膜干细胞的背景与应用！
人原代牙周膜干细胞来源于人的正常牙组织，牙周病是口腔疾病中的常见病和多发病，常导致牙周支持组织破坏或缺损。目前，牙周支持组织重建主要依赖机械、药物或引导组织再生技术，随着分子生物学、组织工程学和干细胞技术的飞速发展，牙周组织再生工程技术成为牙周病治疗研究的热点，牙周膜干细胞(Periodontal
原代细胞如何抵抗粘膜系统二次感染
原代细胞是机体T淋巴细胞中的一个特殊亚群，它们在淋巴组织中的比例很低，但富集于上皮粘膜系统，比如皮肤，呼吸道，肠道以及道等等。这类细胞是T细胞分化过程中形成的细胞，在胚胎发育为新生个体的过程中会逐步地向各组织迁移。其中，TCR中保守的γ链对于γδT细胞的迁移以及功能的实现都十分关键。不过，新的证据表
新生大鼠心肌细胞原代培养实验（二）
3. 用第二套手术器械进行下列操作。用眼科直镊和眼科弯剪把培养皿中的心脏周边的血凝块及纤维组织剔除掉，放在另一个预先装好D-Hank's液的培养皿中，把心脏组织再洗一遍后，将心脏组织放在另外一个培养皿中(或者其它合适容器中，视个人习惯)，加少许 0.06%胰酶，用眼科弯剪将心脏
原代细胞的培养
原代细胞的培养是指直接从机体取下细胞、组织和器官后立即进行培养。因此，较为严格地说是指成功传代之前的培养，此时的细胞保持原有细胞的基本性质，如果是正常细胞，仍然保留二倍体数。但实际上，通常把第一代至第十代以内的培养细胞统称为原代细胞培养。[1] 最常用的原代细胞的培养有组织块培养和分散细胞培养
细胞原代培养
一、原理将动物机体的各种组织从机体中取出，经各种酶（常用胰蛋白酶）、螯合剂（常用EDTA）或机械方法处理，分散成单细胞，置合适的培养基中培养，使细胞得以生存、生长和繁殖，这一过程称原代培养。二、仪器、材料及试剂仪器：培养箱（调整至37℃），培养瓶、青霉素瓶、小玻璃漏斗、平皿、吸管、移液管、纱布、手术
原代细胞分离技术
实验概要本文介绍了原代细胞分离技术，包括悬浮细胞的分离方法和实体组织材料的分离方法。实体组织材料的分离方法有机械分散和消化分离两种。实验步骤1. 悬浮细胞的分离方法 1) 将血液、羊水、胸水或腹水等悬液直接转至离心管中，1000rpm/分钟离心5分钟。 2) 去掉上清，离心沉淀用无钙、镁的P
原代细胞传代技术
一、贴壁细胞的消化法传代1、吸除或倒掉瓶内旧培养液。2、加入1ml左右消化液（胰蛋白酶或与EDTA混合液）轻轻摇动培养瓶，使瓶底细胞都浸入溶液中。3、消化2-5分钟后把培养瓶放置在显微镜下进行观察，发现原贴壁的细胞逐渐趋于圆形，在还未漂起时，弃去消化液，加入培养液终止消化。4、用吸管将贴壁的细胞吹打
什么是原代细胞？
原代细胞（primary culture cell）是指从机体取出后立即培养的细胞。有人把培养的第1代细胞与传10代以内的细胞统称为原代细胞培养。原代细胞不仅广泛应用于分子、细胞生物学和生物医学基础研究，如蛋白质组学、基因组学、细胞株（系）研究、DNA，RNA和遗传学研究等，还可应用于当今热门的生物
什么是原代细胞
原代细胞（primary culture cell）是指从机体取出后立即培养的细胞。有人把培养的第1代细胞与传10代以内的细胞统称为原代细胞培养。原代细胞不仅广泛应用于分子、细胞生物学和生物医学基础研究，如蛋白质组学、基因组学、细胞株（系）研究、DNA，RNA和遗传学研究等，还可应用于当今热门的
原代细胞分离技术
取人或动物体内（或胚胎）的组织，将其剪碎至1mm3的组织块，再采用的如下方法进行分离培养：一、悬浮细胞的分离方法1、将血液、羊水、胸水或腹水等悬液直接转至离心管中，1000rpm/分钟离心5分钟。2、去掉上清，离心沉淀用无钙、镁的PBS清洗后1000rpm/分钟离心5分钟。此步重复两次。3、用培养基
原代细胞组成结构
原代细胞组成结构1、 血清：操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血红细胞迅速小心地分离。2、 血浆：EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。3、 细胞上清液：1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。4、 组
原代细胞复苏技术
. 原代细胞冻存复苏技术简介在ELISPOT检测的应用中，往往需要用到冻存的淋巴细胞样品作为检测细胞。由于ELISPOT检测的是细胞的免疫功能，不仅仅需要保持细胞的存活率，而且还要保证细胞的功能不发生变化。传统的细胞冻存方法通常是为了保存细胞株，对细胞存活率的要求不高，更没考虑保持细胞原有的免疫状态