使用中空纤维切向流过滤(HFTFF)优化高浓度抗体工艺2

如图2所示,1.0mm内径纤维的起始通量高于0.5mm内径纤维(18L/m2/hr vs. 12L/m2/hr)。正如预期,通量随IgG溶液浓度的增加而降低。运行过程中,TMP恒定为5psig,直到接近运行结束时,增加至约10psig。此时,通量降低至0L/m2/hr。图2同时显示,在整个运行过程中,总压力降低于8psig,说明膜污染较低。这表明,1.0mm纤维在浓缩过程中,可获得更好的过滤器通量。使用UV分光光度法检测IgG终溶液的浓度,计算为约226mg/mL,浓缩7.5倍。使用1.0mm内径纤维需要使用更大的管路,以达到71mL/min的流速。由于滞留体积的增加,不能获得高于250mg/mL的浓度。但是,在优化的条件下,可获得更高的浓度。剪切率实验由于使用HF膜进行IgG浓缩时的压力降更低,所以可使用更高的进样流速/剪切率,缩短处理时间。为检测剪切率对滤液流速的影响,将IgG溶液(~100mg/mL)在逐步增加的进样流速/......阅读全文

使用中空纤维切向流过滤(HF-TFF)优化高浓度抗体工艺2

如图2所示,1.0mm内径纤维的起始通量高于0.5mm内径纤维(18L/m2/hr vs. 12L/m2/hr)。正如预期,通量随IgG溶液浓度的增加而降低。运行过程中,TMP恒定为5psig,直到接近运行结束时,增加至约10psig。此时,通量降低至0L/m2/hr。图2同时显示,在整个运行过程中

使用中空纤维切向流过滤(HF-TFF)优化高浓度抗体工艺1

背景/介绍抗体(Abs),或免疫球蛋白(Ig),被广泛用于许多不同的科研和治疗性应用1。特别是,单克隆抗体(mAbs)在诊断、蛋白质纯化以及医疗应用中的使用显著增加2-5。妨碍治疗性mAbs使用的一个主要障碍是皮下注射需要使用较高的浓度,因为这是优先选择的给药方法。按FDA要求,皮下给药时,注射体积

中空纤维切向流过滤纯化HSV疫苗

简介单纯疱疹病毒2型(HSV-2)是溃疡性生殖器疱疹的主要病原,全球每年新增感染达2300万例,其治疗方式主要围绕口服抗病毒治疗展开,但已有HSV-2候选疫苗进入临床试验,包括灭活、活性衰减、亚单位、DNA及多肽疫苗等,其中,野生型病毒删除UL5和UL29基因构建的复制缺陷型HSV-2疫苗株病毒(d

TFF切向流超滤膜清洗步骤

TFF切向流超滤膜清洗步骤1.   把滤过液和回流液出口连接到清洗罐。  2.   关掉清洗罐的排液阀、打开回流和滤过口的阀门。  3.   如果您的系统采用的是离心泵,可将泵的出口阀关闭;如果您的系统采用 的是变速泵,请把泵速调到最低。  4.  从清洗剂选择表中,选出能去除系统内的堵塞物的适当清

切向流超滤(TFF)的原理、特点及其应用

切向流超滤(TFF)能快捷、高效地进行生物分子的分离与纯化处理;可用于低至10毫升、高达数千升样品溶液的浓缩和脱盐处理;也可以用于不同大小生物分子的分离、细胞悬液收集、以及发酵液和细胞裂解液的澄清。为什么要使用切向流超滤● 易于装配,操作简单-用管路和少许管路配件,简单地连接切向流超滤装置、泵以及压

切向流超滤(TFF)的原理、特点及其应用

切向流超滤(TFF)能快捷、高效地进行生物分子的分离与纯化处理;可用于低至10毫升、高达数千升样品溶液的浓缩和脱盐处理;也可以用于不同大小生物分子的分离、细胞悬液收集、以及发酵液和细胞裂解液的澄清。 为什么要使用切向流超滤● 易于装配,操作简单-用管路和少许管路配件,简单地连接切向流超滤装置、泵以及

切向流过滤的脱辅基血红蛋白的制备新方法

来自美国俄亥俄州立大学等的科学家们在2020年第117期的《Biotechnology and Bioengineering》杂志上发表了题为“Novel Manufacturing Method for Producing Apohemoglobin and its Biophysical

使用中空纤维洗滤,实现自动化换液(一)

洗滤是指使用切向流过滤(TFF)技术进行“漂洗”或从溶液中去除某种较小的分子(如杂质、盐离子、溶剂、小分子蛋白)。相对于透析膜管,洗滤操作速度更快,处理量更大。通过选择合适的膜,也可以进行缓冲液置换、调整颗粒粒径分布、改变盐离子浓度、并在澄清操作中最大可能地提高收率。缓冲液置换,即使用超滤膜快速、温

使用串联切向流过滤高效浓缩慢病毒载体

简介VSV-G-假型自我灭活慢病毒载体是不可或缺的生物实验工具之一,与之前的γ-逆转录病毒载体不同的是,慢病毒载体可转导非分裂细胞,并可携带更多的转基因盒,在细胞中的转基因表达时间也更长,即可获得更高的滴度,而其遗传毒性相对较低。一般情况下产毒细胞上清液中的载体滴度足以转导常规细胞系,但原代细胞较难

通过中空纤维洗滤纯化纳米颗粒

简介相较于传统的纳米颗粒纯化方法,如超速离心、搅拌室过滤、透析或者层析方法,中空纤维洗滤(中空纤维切向流过滤)是一种更加高效、快速的替代方法。中空纤维洗滤可以用于纯化多种纳米颗粒,包括脂质体、胶乳颗粒、磁珠以及纳米管1,2。中空纤维洗滤是一种基于膜分离的技术,膜孔径的大小决定了大分子或颗粒是被截留还

中空纤维膜过滤技术在病毒类疫苗中的应用(二)

2.中空纤维膜过滤技术     2.1中空纤维膜过滤原理简介     中空纤维膜过滤技术属于切向流过滤技术(Tangential Flow Filtration, TFF)的范畴,又称错流过滤(Cross-Flow Filtration,CFF),其操作原理如图1:料液以一定的流速在膜的上表

mRNA药物制备的关键技术——切向流过滤的高效应用

mRNA药物作为一种新型的生物制药技术,因其在治疗和预防疾病方面的潜力而受到广泛关注。切向流过滤(TFF)技术高效率、高回收率特点,在mRNA药物制备中作用很大。一、什么是mRNA?mRNA是细胞中的一种核糖核酸,它携带遗传信息,指导细胞制造特定的蛋白质。在mRNA药物中,人工合成的mRNA被设计用

霍尔斯自动系列又添猛将!K2TFFLab自动切向流过滤系统为你而来

自十八世纪六十年代起,工业革命改变了制造业的发展,从纯手工到机械化。而如今的二十一世纪,随着工业设备的数字化兴起,我们正在进入一场新的科技革命,这也让我们迈向了智能化阶段。霍尔斯(HOLVES)想用户之想,通过设备的不断升级改造,提高实验效率与产品质量。新的一年已经来临,我们正式且荣幸地向大家介绍最

使用切向流过滤法纯化血红蛋白

在现代医学中,输血是出血性休克、贫血等病症重要的治疗方法,也是常规手术的重要组成部分,但是肝炎及AIDS等小概率传播风险,总是干扰着输血的安全进行。此外,输血前,还需对供体血液进行分型,并与受体血型交叉匹配,以避免出现排异现象。对此,一种相对简便的替代方法是,使用血红蛋白(Hb)类氧载体(HBOCs

使用中空纤维洗滤,实现自动化换液(二)

洗滤(缓冲液置换)洗滤即向样品容器中添加清洗缓冲液,漂洗出可透过膜的小分子物质。在连续型洗滤过程中,缓冲液被连续补充到料液中,其流量与流出中空纤维膜组件的滤液的流量相同。见图4所示。连续型洗滤如图2所示,在密封系统内进行,缓冲液添加量可自动调节,以保持料液总体积不变。[注意:也可以使用额外的双泵头来

小型切向流超滤系统简介

了解切向流超滤技术切向流过滤(TFF),也叫错流过滤(CFF),是指液体流动方向与过滤方向相垂直的过滤形式。液体流动在过滤介质表面产生剪切力,减小了滤饼层或凝胶层的堆积,从而保证了稳定的过滤速度。根据被截留的颗粒或分子大小可分为微滤MF、超滤UF、纳滤NF和反渗透RO。TFF技术目前被广泛应用于制药

场流分离技术用于药物成分的分馏

中空纤维场流分离技术(HF5)与非对称场流分离技术(AF4)相结合的场流分离技术(FFF)是一种性能强大的蛋白质、抗体类药物成分分离、分馏的新方法。 场流分离法(F4)是多种不同的分子和颗粒分离技术的总称。其中使用最为广泛的是非对称场流分离技术AF4。这种非对称场流分离技术的工作原理是:

PVC中空纤维超滤膜的制备工艺

1、前处理 超滤法在水处理及其他工业净化、浓缩、分离过程中,可以作为工艺过程的预处理,也可以作为工艺过程的深度处理。在广泛应用的水处理工艺过程中,常作为深度净化的手段。根据中空纤维超滤膜的特性,有一定的供水前处理要求。因为水中的悬浮物、胶体、微生物和其他杂质会附于膜表面,而使膜受到污染。由于超滤膜水

中空纤维过滤技术在百白破疫苗中的应用(一)

前言     百日咳、白喉、破伤风混合疫苗简称百白破疫苗,它是由百日咳疫苗、精制白喉和破伤风类毒素按适量比例配制而成,用于预防百日咳、白喉、破伤风三种疾病。目前使用的有吸附百日咳疫苗、白喉和破伤风类毒素混合疫苗(吸附百白破)和吸附无细胞百日咳疫苗、白喉和破伤风类毒类混合疫苗(吸附无细胞百白破)。

如何利用新型固定床生物反应器开发高产量活病毒疫...2

2.5. 病毒收获收获原液通过由Sartopure PP38μm过滤器和Sartopore 2 0.8/0.45μm过滤器组成的两步深层过滤器链,收集进入二级容器。在运行4中,罐初步清空后,生物反应器用额外的1L新鲜培养基润洗,以冲洗掉固定床中所有残料的病毒颗粒。该冲洗液通过深层过滤器,以TFF

中空纤维膜过滤技术在病毒类疫苗中的应用(五)

3.2.2 实验结果    我们分别使用中空纤维 750k和500k超滤柱(GE)、300k和500k超滤膜包(分别来自于两家进口品牌) 进行流感病毒尿囊液的浓缩洗滤,考察处理速度、病毒 HA收率、总蛋白和浓缩液澄清度等指标。使用中空纤维和膜包进行浓缩,均采用先浓缩后洗滤的策略,先浓缩20倍即开始滤

中空纤维过滤技术在百白破疫苗中的应用(二)

中空纤维脱去戊二醛实验     实验系统:Quixstand系统    实验膜类型:10KD的滤柱(UFP-10-E-4MA)实验条件:泵转速-260rpm ,上样体积 1000ml,过膜压力15psi 。    实验料液: 加入戊二醛进行解毒的百日咳料液工艺流程第(6)步。    实验过程: 实验

中空纤维的概念

中空纤维是指纤维轴向有细管状空腔的化纤。贯通纤维轴向具有管状空腔的化学纤维。可用于冬装、被褥和衬垫用絮片等;组装成微滤、超滤、透析、气体分离、反渗透及蒸发渗透器等。

中空纤维的制备

1.采用环形中空、C形或偏心中空喷丝板通过熔纺(涤纶等)或溶液纺成纤;2.用中空型(个别用C形)喷丝板,通过干湿纺或熔纺成纤,有些中心部还需通入空气或不同组成的凝固液,制成系列产品。

中空纤维膜过滤技术在病毒类疫苗中的应用(六)

3.3 小结    本文的研究结果表明:    中空纤维 750k超滤膜成功的用于狂犬病毒收获液的浓缩和洗滤,膜处理量大于 70L/m2,平均处理速度达 61 LMH,处理时间仅 1.2小时,病毒收率近 100%,浓缩后产品外观澄清度好,病毒纯度 22% (面积归一化法),比膜包提高 7%。

切向流过滤中的分子舞蹈与技术革新

探索科学世界,我们常常被那些看似平凡却充满奥秘的技术所吸引。嘿,准备好了吗?今天我们要继续探索这个听起来有点枯燥但实际上非常酷炫的科技——切向流过滤。我想如果分子世界也有派对,那么切向流过滤技术一定派对中的“superhero”。它不仅能够巧妙地解决分子们在过滤过程中的“拥挤”问题,还能优雅地引导蛋

中空纤维膜过滤技术在病毒类疫苗中的应用(一)

生命科学和生物技术的日新月异对疫苗的发展提供了新的契机:疫苗快速规模化生产、质量标准不断提高以及新技术的开发应用成为行业的技术发展趋势。 新型中空纤维膜过滤技术具有温和低剪切力、容尘量高、操作灵活、寿命长成本低、易于放大等优点,解决了病毒颗粒浓缩时易堵膜和对剪切力敏感易聚集两大技术难题,提供

中空纤维膜过滤技术在病毒类疫苗中的应用(四)

3.1.3 讨论     使用 Sepharose 4FF分子筛分析柱对浓缩液进行分析,快速检定浓缩液中杂质的残留,并比较病毒和杂质的分离情况,结果见图 5所示。     使用两种不同的超滤膜进行浓缩,所得浓缩液中病毒颗粒的积分面积相当,因此 750k中空纤维和 300k膜包都可以很好的截留病毒

中空纤维膜过滤技术在病毒类疫苗中的应用(三)

3.中空纤维浓缩病毒培养液实例    相对于其他杂蛋白和DNA等杂质,病毒颗粒具有较大的分子量,因而可以使用超滤膜过滤和分子筛等技术按照分子量大小进行分离分级,建立通用的病毒纯化工艺。病毒类疫苗通常使用微载体细胞培养技术进行病毒培养,一定滴度的病毒培养收获液通过 1-2um玻璃纤维GF澄清过

中空纤维的作用分类

按其作用分两类:1.絮片用,中空度要求不高,约30%~100%,主要追求轻而保暖,为了提高其回弹率,还可制成偏芯中空纤维,经热处理而形成三维卷曲;2.分离膜用,中空度和截面圆整度要求高,膜壁微孔及其分布有一定要求,还可涂一层或两层不同超薄分离层,以提高分离效果和选择性 。