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聚焦离子束法制备冷冻含水超薄切片

低温电子断层成像三维重构(cryo-ET)技术是发展结构生物学和细胞生物学重要的研究手段。该技术可以得到更真实的接近天然状态的细胞内部高分辨率的三维结构以及蛋白质大分子定位及相互作用的信息,是蛋白质组学研究的重要辅助手段被成为“可视化蛋白质组学”(Visual Approach to Proteomic)。常用的样品制备方法–含水冷冻超薄切片技术,存在严重的压缩、振颤、皱缩、断裂以及载网附着能力差等,以及技术难度大,成功率低等问题。人们期望寻找到更理想的样品制备方法。2006年M.Marko等人发现聚焦离子束方法加工的冷冻至玻璃态的生物样品并未出现重结晶现象,由此开启了利用聚焦离子束技术制备生物样品含水冷冻超薄切片方法的探索。 该技术首先需要将细胞样品滴到载网上,经过快速投掷液氮冷却的乙烷中制得玻璃态的冷冻含水样品,然后将样品转移到液氮温度的自制的样品座上,并一起转移进双束扫描电镜样品室低温样品台中,进行FIB减薄操作。制......阅读全文

中科院海洋研究所594万采购Cryo-SEM冷冻型场发射扫描电镜

  分析测试百科网讯 近日,中国科学院海洋研究所深海资源保藏与开发平台之冷冻型场发射扫描电镜采购项目(项目编号:OITC-G190311595)进行公开招标,用于各种样本表面的微观形貌的高分辨观察,在真空及低温条件下实现生物、材料等含水样品的冷冻制备(冷冻断裂、升华刻蚀、溅射镀膜)、样品传输和电镜低

样品制备丨扫描电镜主要用于观察的方法

  1样品处理的要求  扫描电子显微镜的优势为可以直接观察非常粗糙的样品表面,参差起伏的材料原始断口。但其劣势为样品必须在真空环境下观察,因此对样品有一些特殊要求,笼统的讲:干燥,无油,导电。  1形貌形态,必须耐高真空。  例如有些含水量很大的细胞,在真空中很快被抽干水分,细胞的形态也发生了改变,

扫描电子显微镜(SEM)之样品制备篇

  一、样品处理的要求  扫描电子显微镜的优势为可以直接观察非常粗糙的样品表面,参差起伏的材料原始断口。但其劣势为样品必须在真空环境下观察,因此对样品有一些特殊要求,笼统的讲:干燥,无油,导电。  1 形貌形态,必须耐高真空。  例如有些含水量很大的细胞,在真空中很快被抽干水分,细胞的形态也发生了改

新技术,真应用——第10次华北五省电镜研讨会的饕餮盛宴

  分析测试百科网讯 2018年7月22日,第十次华北五省市电子显微学研讨会及2018年全国实验室协作服务交流会在山东省烟台市举行。本次会议由华北五省电子显微镜学会主办,北京理化分析测试技术学会协办。此次会议旨在推动华北五省市电子显微分析技术的发展,促进电子显微分析工作者的学术交流,加强实验室资源共

2010年北京电镜年会隆重召开

       2011年1月17日,由北京理化分析测试技术学会和北京电镜学会主办的2010年北京电镜年会在北京天文馆4D科普剧场隆重召开。本次年会以推动北京及周边省市广大电子显微学

冷冻电镜技术介绍

2017诺贝尔化学奖2017年诺贝尔化学奖授予了理查德·亨德森(Richard Henderson)、约阿希姆·弗兰克(Joachim Frank)和雅克·杜博歇(Jacques Dubochet),表彰他们在冷冻电镜技术的发展上做出的卓越贡献。 分辨率对比  他们将冷

电子断层成像技术

电子断层成像技术可用来研究细胞器或细胞结构,以及一些巨大的超分子复合物。对于电子断层成像技术,有两方面很重要,第一,是使用透射电镜进行断层成像,获得三维物体的二维投影像;第二是低温保存生物样品的天然状态。通过对同一样品每间隔一定角度拍摄一幅照片,通常是在-70°到+70°的角度之间,得到几十幅代表同

扫描电镜的样品制备方法

   概述  扫描电子显微镜样品制备比透射电镜样品制备简单,不需要包埋和切片。扫描电子显微镜样品的制备,必须满足以下要求:①保持完好的组织和细胞形态;③充分暴露要观察的部位;③良好的导电性和较高的二次电子产额;④保持充分干燥的状态。  某些含水量低且不易变形的生物材料,可以不经固定和干燥而在较低加速

扫描电镜的样品制备方法

扫描电子显微镜  样品制备比透射电镜样品制备简单,不需要包埋和切片。扫描电子显微镜样品的制备,必须满足以下要求:①保持完好的组织和细胞形态;②充分暴露要观察的部位;③良好的导电性和较高的二次电子产额;④保持充分干燥的状态。 某些含水量低且不易变形的生物材料,可以不经固定和干燥而

扫描电镜的样品制备方法

  扫描电子显微镜(SEM)是1965年发明的较现代的细胞生物学研究工具,主要是利用二次电子信号成像来观察样品的表面形态,即用极狭窄的电子束去扫描样品,通过电子束与样品的相互作用产生各种效应,其中主要是样品的二次电子发射。    二次电子能够产生样品表面放大的形貌像,这个像是在样品被扫描时按时序建立

扫描电镜的样品制备方法

概述扫描电子显微镜 样品制备比透射电镜样品制备简单,不需要包埋和切片。扫描电子显微镜样品的制备,必须满足以下要求:①保持完好的组织和细胞形态;②充分暴露要观察的部位;③良好的导电性和较高的二次电子产额;④保持充分干燥的状态。某些含水量低且不易变形的生物材料,可以不经固定和干燥而在较低加速电

扫描电镜的样品制备方法

  扫描电子显微镜样品制备比透射电镜样品制备简单,不需要包埋和切片。扫描电子显微镜样品的制备,必须满足以下要求:①保持完好的组织和细胞形态;③充分暴露要观察的部位;③良好的导电性和较高的二次电子产额;④保持充分干燥的状态。  某些含水量低且不易变形的生物材料,可以不经固定和干燥而在较低加速电压下直接

扫描电镜的综述及发展

1 扫描电镜的原理 扫描电镜(Scanning Electron Microscope,简写为SEM)是一个复杂的系统,浓缩了电子光学技术、真空技术、精细机械结构以及现代计算机控制技术。成像是采用二次电子或背散射电子等工作方式,随着扫描电镜的发展和应用的拓展,

在扫描电镜下的生物样品常用制备

扫描电镜在观察生物样品时,具有以下特点:多角度观察样品的表面结构;不需要将样品切成薄片;景深大、图像立体感强;放大倍数从几十倍到几十万倍连续可调;在观察形貌的同时可以对微区的成分进行定量和定性分析。而能否获得真实、清晰、理想的扫描电镜观察结果,样品的制备过程是关键。 生物样品含水直接观察,会对扫描电

扫描电镜的样本处理

实验概要本文介绍了扫描电镜的样本处理,主要包括:样品的初步处理,样品的干燥,样品的导电处理,细胞内部结构冷冻割断法和铸型技术。实验步骤1. 样品的初步处理   1) 取材 取材的基本要求和透射电镜样品制备相同。但是,对扫描电镜来说,样品可以稍大些,面积可达8mm×8mm,厚度可达

扫描电镜的样本处理

1. 样品的初步处理  1) 取材  取材的基本要求和透射电镜样品制备相同。但是,对扫描电镜来说,样品可以稍大些,面积可达8mm×8mm,厚度可达5mm。对于易卷曲的样品如血管、胃肠道粘膜等,可固定在滤纸或卡片纸上,以充分暴露待观察的组织表面。  2) 样品的清洗  用扫描电镜观察的部位常常是样品的

扫描电子显微镜样品的制备技术

   化学方法制备样品  编辑  化学方法制备样品的程序通常是:清洗→化学固定→干燥→喷镀金属。  清洗  某些生物材料表面常附血液、细胞碎片、消化道内的食物残渣、细菌、淋巴液及粘液等异物,掩盖着要观察的部位,因而,需要在固定之前用生理盐水或等渗缓冲液等把附着物清洗干净。亦可用5%碳酸钠冲洗或酶消化

抗性淀粉(RS)检测试剂盒使用说明

抗性淀粉(RS)是指在人小肠内不能被酶解的淀粉,在大肠部分或完全发酵。RS是总膳食纤维的组分之一。原理(AOAC法 2002.02 ;AACC法32-40)抗性淀粉的测定方法: 样品使用α-胰淀粉酶和淀粉葡糖苷酶(AMG)37℃振荡水浴孵育16小时,在这期间,通过两种酶的联合作用

样品前处理方法-样品浓缩(氮吹仪、氮气吹扫仪)

引言色谱分析样品制备是一个非常重要和复杂的过程,因为色谱分析技术涉及的样品种类繁多、样品组成及其浓度复杂多变。样品物理形态范围广泛,对采用分析方法进行直接分析测定构成的干扰因素特别多,所以需要选择并实施科学有效的处理方法及其技术,达到分析测定或评价和调查的目的。现代色谱仪器对一个样品的分析测定所需要

样品前处理方法-样品浓缩(氮吹仪、氮气吹扫仪)

色谱分析样品制备是一个非常重要和复杂的过程,因为色谱分析技术涉及的样品种类繁多、样品组成及其浓度复杂多变。样品物理形态范围广泛,对采用分析方法进行直接分析测定构成的干扰因素特别多,所以需要选择并实施科学有效的处理方法及其技术,达到分析测定或评价和调查的目的。现代色谱仪器对一个样品的分析测定所需要的时

低温扫描电子显微术

制备样品低温扫描电子显微术是20世纪80年代迅速发展和广泛应用的方法。它包括生物样品的冷冻固定、冷冻干燥、冷冻割断和冷冻含水样品的扫描电子显微术等。冷冻固定将生物材料投入低温的致冷剂中,如液氦、液氮、液体氟利昂及丙烷等。快速冷冻可使生物组织细胞的结构和化学组成接近于生活状态。被冷冻固定的生物样品,可

冷冻电镜单粒子法

 三维冷冻电子显微术已经在确定结构组成和大分子复合物的结构层次方面取得了重要进展。单粒子冷冻电镜技术是获得三位重构图像的重要的方法。单粒子法就是对分离纯化的颗粒状分子进行结构分析。既可以对有二十面对称结构的病毒或螺旋对称结构进行分析,也可以对象核糖体等大的可溶性复合物进行结构分析,还可以对

高效液相色谱仪分析中待测样品的制备流程

高效液相色谱仪分析中待测样品的制备流程高效液相色谱仪分析样品的种类繁多、物理形态广泛、组成及其浓度复杂多变,对分析结果的干扰因素很多,为达到分析目的,样品要进行有效的制备。高效液相色谱仪分析样品的制备包括预处理、提取、净化和浓缩等过程。  一、预处理:     

抗原的制备方法

抗原的制备  除完整的细胞可作为抗原外,各种不同的细胞内存在的各种分子量不同的物质,也都具有全抗原或半抗原的性质,某种抗原物质可能是某一类细胞所特有的,可作为这种细胞的一个标志。由于细胞存在着许多性质不同的抗原物质,有时要从这众多的物质中提取、纯化某种抗原物质,以供科学研究之用。  一、抗原的提取 

抗原的制备-1

抗原的制备  除完整的细胞可作为抗原外,各种不同的细胞内存在的各种分子量不同的物质,也都具有全抗原或半抗原的性质,某种抗原物质可能是某一类细胞所特有的,可作为这种细胞的一个标志。由于细胞存在着许多性质不同的抗原物质,有时要从这众多的物质中提取、纯化某种抗原物质,以供科学研究之用。  一、抗原的提取 

高效液相色谱仪分析样品的制备

高效液相色谱仪分析样品的种类繁多、物理形态广泛、组成及其浓度复杂多变,对分析结果的干扰因素很多,为达到分析目的,样品要进行有效的制备。高效液相色谱仪分析样品的制备包括预处理、提取、净化和浓缩等过程。一、预处理:1、固体样品:含水较低,粉碎过筛。含水量较高,取使用部分烘干后,粉碎过筛。2、液体样品:搅

液相色谱仪分析样品的制备

液相色谱仪分析样品的种类繁多、物理形态广泛、组成及其浓度复杂多变,对分析结果的干扰因素很多,为达到分析目的,样品要进行有效的制备。液相色谱仪分析样品的制备包括预处理、提取、净化和浓缩等过程。一、预处理:  1、固体样品:含水较低,粉碎过筛。含水量较高,取使用部分烘干后,粉碎过筛。 

冷冻干燥过程共晶点、共熔点的意义

  冷冻干燥技术是将含水物料预先冻结后在真空状态下进行升华而获得干燥物料的方法,干燥后物料原有的化学、生物特性基本不变,易于长期保存,是一种优良的干燥方法,被广泛应用于食品、生物制品、医药、化工、材料制备等各个领域。   在冷冻干燥过程中,物料的共晶点和共熔点是冻干工艺中zui为重要的两个参数。物

冷冻干燥机冷阱温度的设定

  冷冻干燥技术是将含水物料预先冻结后在真空状态下进行升华而获得干燥物料的方法,干燥后物料原有的化学、生物特性基本不变,易于长期保存,是一种优良的干燥方法,被广泛应用于食品、生物制品、医药、化工、材料制备等各个领域。   在冷冻干燥过程中,物料的共晶点和共熔点是冻干工艺中zui为重要的两个参数。物

小型臭氧发生器有的优势

  冷冻干燥技术是将含水物料预先冻结后在真空状态下进行升华而获得干燥物料的方法,干燥后物料原有的化学、生物特性基本不变,易于长期保存,是一种优良的干燥方法,被广泛应用于食品、生物制品、医药、化工、材料制备等各个领域。   在冷冻干燥过程中,物料的共晶点和共熔点是冻干工艺中zui为重要的两个参数。物