快速了解maxanGilbert化学修饰法
实验方法原理用化学试剂 处理具有末端放射性标记的DNA片段 ，造成碱基的特异性切割并产生一组具有不同长度的DNA链降解产物，经凝胶电泳分离和放射自显影后，可直接读出待测DNA片段的核苷酸序列。实验材料DNA试剂、试剂盒蒸馏水仪器、耗材电泳仪实验步骤一、取待测DNA片段，既可以是单链也可以是双链。 此法又叫化学切割法，或化学降解法，切割之前先对待测片段作末端标记。用放射性P32-磷酸集团标记链的末端之一。 二、将标记完的样品，分成四份。分别采用不同的化学试剂对所得样品，进行修饰进而切割（切割就是利用特异的化学试剂，修饰DNA分子中不同的碱基，使被修饰的碱基之间的连接变得不稳定，发生断裂，而产生各种长度的DNA片段。） 【四组切割的方法，在G、G+A、T+C、C处切割】 "+就是同时切割，有点讨厌的是这点，能修饰A，使其糖苷键不稳定的甲酸，同时也会使G的不稳定，所以无奈就有了G+A并......阅读全文
内标法与外标法
一、内标法 什么叫内标法?怎样选择内标物? 内标法是一种间接或相对的校准方法。在分析测定样品中某组分含量时，加入一种内标物质以校谁和消除出于操作条件的波动而对分析结果产生的影响，以提高分析结果的准确度。 内标法在气相色谱定量分析中是一种重要的技术。使用内标法时，在样品中加入一定量的标准物质，它可被
Folin—酚试剂法（Lowry法）
实验概要本文介绍了Folin—酚试剂法（Lowry法）测定蛋白质的实验原理、操作步骤及注意事项等。实验原理这种蛋白质测定法是最灵敏的方法之一。过去此法是应用最广泛的一种方法，由于其试剂乙的配制较为困难，近年来逐渐被考马斯亮兰法所取代。此法的显色原理与双缩脲方法是相同的，只是加入了第二种试剂，即Fol
细胞水平的代谢调节（二）
(二)酶分子化学修饰调节 1.酶分子化学修饰的概念 酶分子肽链上的某些基团可在另一种酶的催化下发生可逆的共价修饰，从而引起酶活性的改变，这个过程称为酶的酶促化学修饰(chemical modification)。如磷酸化和脱磷酸，乙酰化和去乙酰化，腺苷化和去腺苷化，甲基化和去甲基化以及-
评估荧光定量PCR反应性能的标准
罗氏FastStart qPCR预混液通过化学修饰法进行Taq DNA聚合酶的活性封闭及高温启动，为实时荧光定量PCR带来高质量的荧光信号和扩增效率。让您获得可信赖的基因表达研究结果。FastStart Essential DNA Green Master和FastStart Essential
可见异物检查法第一法(灯检法)
取规定量供试品,除去容器标签,擦净容器外壁,必要时将药液转移至洁净透明的适宜容器内,将供试品置遮光板边缘处,在明视距离(指供试品至人眼的清晰观测距离,通常为25cm),手持容器颈部,轻轻旋转和翻转容器(但应避免产生气泡),使药液中可能存在的可见异物悬浮,分别在黑色和白色背景下目视检查,重复观察,总检
峰面积归一法、内标法、外标法区别
色谱定量分析方法可以分为外标法、内标法、归一化法三大类。当能够精确进样量的时候，通常采用外标法进行定量。这种方法标准物质单独进样分析，从而确定待测组分的校正因子；实际样品进样分析后依据此校正因子对待测组分色谱峰进行计算得出含量。其特点是标准物质和未知样品分开进样，虽然看上去是二次进样，但实际上未知样
气相法液相法固相法优缺点
气相法液相法固相法优点：分离效率高，分析速度快，样品用量少和检测灵敏度高。选择性好，可分离、分析恒沸混合物，沸点相近的物质，某些同位素，顺式与反式异构体邻、间、对位异构体，旋光异构体等。气相法液相法固相法缺点：分析成本高，液相色谱仪价格及日常维护费用贵，分析时间一般比气相长。检测器气相色谱法中可以使
色谱定量方法：标准加入法内标法外标法
色谱分析的重要作用之一是对样品定量。而色谱法定量的依据是：组分的重量或在载气中的浓度与检测器的响应信号成正比。常见定量分析方法分为面积归一化法、内标法、外标法等。大家常常容易傻傻分不清楚的莫过于内标法、外标法了。 以内标法为例，选一与欲测组分相近但能完全分离的组分做内标物（当然是样品中没有的组
各显神通！浅谈归一化法、内标法、外标法及标准加入法
面积归一法、内标法、外标法、标准加入法。这么多定量法，用哪一种呢？每一种的适用范围是什么呢？其优缺点又是什么？其标准物又有什么要求呢？看完你就都知道了。 1、归一化法 把所有出峰的组分含量之和按100%计的定量方法，称为归一化法，各成分校正因子一致时可用该法。 归一化法的优点： 该法简便
化学性调节具有哪些特点
凡通过化学基因的引入或除去，而使蛋白质或核酸共价结构发生改变的现象。化学修饰（chemical modification）调节方式有别于别构调节。它以引起酶分子共价键的变化、化学结构的改变而影响酶活性。酶的化学修饰是在另一种酶的催化下完成的，是体内快速调节的另一种重要方式。化学修饰的方式包括磷酸化与
浅谈归一化法、内标法、外标法及标准加入法区别很重要！
1.归一化法 把所有出峰的组分含量之和按100%计的定量方法，称为归一化法。 各成分校正因子一致时可用该法，该法简便、准确，特别是进样量不容易准确控制时，进样浓度及进样量的变化的影响很小。 其他操作条件，如流速、柱温等变化对定量结果的影响也很小。GC应用广于HPLC。
CHI电化学工作站的（玻碳）电极抛光的方法有哪些？
用来作化学修饰电极的玻碳电极要求表面十分清洁，无玷污，具有较好的活性。但是，当玻碳电极长久不用时，表面就会形成一层氧化膜。在使用前必须先进行抛光，清洗，活化处理。 能用来抛光玻碳电极的材料有：金相砂纸，Al2O3等。玻碳电极抛光完毕后，用大量水清洗电极，然后用纯水，1:1HNO3、丙酮、无水酒精、
消化道接种法、鼻腔接种法及角膜接种法
实验材料实验动物试剂、试剂盒病毒试剂仪器、耗材注射器实验步骤消化道接种。在分离腹泻病毒或经由消化道病毒感染的研究中，可采用灌胃接种法将所接种的临床标本或病毒用灌胃器灌到动物胃内。抓取固定小鼠，用灌胃器吸取接种物，将灌胃针从鼠的口腔插入，使口腔与食道成一条直线，再将灌胃针沿咽后壁慢慢插入食道，可感到轻
基因组直接测序法检测DNA的甲基化
基因组直接测序法是过去一直沿用的DNA甲基化的研究方法，用Maxam—Gilbert化学裂解法对基因组DNA进行处理，并以连接介导的PCR来放大信号强度，然后进行序列分析。此法是基于5mC在标准的Maxam—Gilbert胞嘧啶化学裂解反应中不被裂解，故5mC可通过在测序胶上缺少对应于胞嘧啶降解反应
基因组直接测序法检测甲基化的介绍
基因组直接测序法是过去一直沿用的DNA甲基化的研究方法，用Maxam—Gilbert化学裂解法对基因组DNA进行处理，并以连接介导的PCR来放大信号强度，然后进行序列分析。此法是基于5mC在标准的Maxam—Gilbert胞嘧啶化学裂解反应中不被裂解，故5mC可通过在测序胶上缺少对应于胞嘧啶降解
生物大分子动态修饰与化学干预
20世纪中叶，以生命科学“中心法则”的建立为标志，研究者揭示了控制生命活动的基本分子机制。然而，进入21世纪以来，随着人类基因组计划的完成，人们很快发现，生命的复杂性和多样性无法仅由“中心法则”解释。研究者发现，作为生命活动基本“元件”的核酸、蛋白质和糖脂等生物大分子处于机体内广泛的动态化学修饰之中
药物鉴别法薄层色谱鉴别法
薄层色谱鉴别法薄层色谱法鉴别原理为同一种药物在同样条件下的薄层色行为相同。一般采用对照品(或标准品)比较法,将供试品和对照品(或标准品)按药典规定,用同种溶剂配成同样浓度的溶液。在同一层板上点样、展开、显色,要求供试品斑点应与对照品(或标准品)斑点的位置(Rf)和颜色一致。薄层色谱法简单易行,适用于
药物鉴别法呈色反应鉴别法
呈色反应鉴别法是指供试品溶液中加入适当的试剂溶液,在一定条件下进行反应,生成易于观测的有色产物。在鉴别试验中最为常用的呈色反应类型有以下几个。(1)三氯化铁呈色反应:应用于含有酚羟基或水解后产生酚羟基的药物,如水杨酸及其盐。(2)异羟肟酸铁反应:应用于含有芳酸、芳酸酯或酰胺的药物,如β-内酰胺类。(
气相色谱法—内标法
1）什么叫内标法?内标法是一种间接或相对的校准方法。在分析测定样品中某组分含量时，加入一种内标物质以校谁和消除出于操作条件的波动而对分析结果产生的影响，以提高分析结果的准确度。2）怎样选择内标物?内标法在气相色谱定量分析中是一种重要的技术。使用内标法时，在样品中加入一定量的标准物质，它可被色谱拄所分
动态色谱法和静态法
动态色谱法是将待测粉体样品装在U型的样品管内，使含有一定比例吸附质的混合气体流过样品，根据吸附前后气体浓度变化来确定被测样品对吸附质分子准确度差、对设备要求很高等缺陷已很少使用。另一种可行的方法是采用CO2作吸附质在室温进行吸附，可以无需分子涡轮泵级的真空度。可以很方便的得到比表面积、微孔孔径、微孔
气相色谱法—内标法
什么叫内标法?怎样选择内标物?内标法是一种间接或相对的校准方法。在分析测定样品中某组分含量时，加入一种内标物质以校谁和消除出于操作条件的波动而对分析结果产生的影响，以提高分析结果的准确度。内标法在气相色谱定量分析中是一种重要的技术。使用内标法时，在样品中加入一定量的标准物质，它可被色谱拄所分离，又不
酶固定化技术固定化方法交联法
交联法是用多功能试剂进行酶蛋白之间的交联，使酶分子和多功能试剂之间形成共价键，得到三向的交联网架结构，除了酶分子之间发生交联外，还存在着一定的分子内交联。多功能试剂制备固定化酶方法可分为：( 1) 单独与酶作用；( 2) 酶吸附在载体表面上再经受交联；( 3) 多功能团试剂与载体反应得到有功能团的载
全球各实验室如何进行RNAi实验？
（3）病毒入侵者（Viral Invaders） 使用者：南阿拉巴马州立大学微生物学和免疫学教授Sailen Barik 项目：敲除编码呼吸融合病毒 (Respiratory Syncytial Virus，RSV) 功能亚基的基因，抑制病毒在小鼠体内繁殖 问题：在确保草案全面试实施的同时，用
酶的磷酸化与脱磷酸化的比较
磷酸化是一种常见的修饰形式。酶蛋白中带羟基的氨基酸残基Thr、Ser与Tyr可作为磷酸化修饰位点。磷酸化是由ATP提供磷酸基，并在蛋白激酶的催化下完成的。脱磷酸反应则是由磷酸酶的催化下完成的。有的酶在磷酸化修饰后活性增高，而另一些酶则在磷酸化修饰后活性反受抑制。由上可见，酶的化学修饰调节具有以下特点
圆环法
测量方法：圆环法 （GB/T6541-86）; 测量范围：5～200mN/m 运动速度：快速：1mm/S 慢速：0.3――0.4mm/S 灵敏阀：0.1mN/m 适用温度：10--30℃ 适应温度：≤80% 电源：交流220
ELISA法
ELISA法是建立在抗原与抗体免疫学反应的基础上，因而，具有特异性。由于测定中需要酶标记抗原或抗体，酶分子与抗原或抗体分子的结合物可以催化底物分子发生反应，产生放大作用，正因为此种放大作用而使本法具有很高的敏感性。常用的ELISA分析1) 测定抗原A 将抗体吸附于固相表面，这个过程叫包被。B
足迹法
High Resolution Genetic Footprinting (Stanford)Genetic footprinting is a technique for high-resolution mapping of the functional organization of a clo
重量法
一、定义 根据单质或化合物的重量，计算出在供试品中的含量的定量方法称为重量法 二、原理 采用不同方法分离出供试品中的被测成分，称取重量，以计算其含量。按分离方法不同，重量分析分为沉淀重量法、挥发重量法和提取重量法。 三、沉淀重量法 （一）原理 被测成分与试剂作用，生成组成固定
电容法
涂层测厚仪的无损检测方法与原理：涂层测厚仪在现实测量中是一门理论上综合性较强，又非常重视实践环节的很有发展前途的学科。它涉及到材料的物理性质，产品设计，制造工艺，断裂力学以及有限元计算等诸多方面。 在化工，电子，电力，金属等行业中，为了实现对各类材料的保护或装饰作用，通常采用喷涂有色金属覆盖以及磷
色谱定量分析归一化法、内标法、外标法及标准加入法比较
归一化法 把所有出峰的组分含量之和按100%计的定量方法，称为归一化法。 各成分校正因子一致时可用该法，该法简便、准确，特别是进样量不容易准确控制时，进样浓度及进样量的变化的影响很小。 其他操作条件，如流速、柱温等变化对定量结果的影响也很小。GC应用广于HPLC。 外标法（标准曲线法、直