核酸鉴定方法之浓度/纯度及完整性鉴定
核酸纯化在分子生物学实验室已经广泛应用。怎样获得高质量、高纯度的DNA或RNA样品对下游实验的顺利进行至关重要,因此,对纯化后的核酸进行鉴定也是必不可少的步骤。本文简单的回顾学习一下核酸鉴定的方法。核酸鉴定包括:浓度/纯度鉴定+完整性鉴定 1.浓度/纯度鉴定 (1)紫外分光光度计:原理:由于核酸中的碱基都具有共轭双键,所以具有紫外光吸收性质。核酸在紫外光谱区有一条典型的吸收曲线,其吸收高峰在260nm处,吸收低谷在230nm处。蛋白质在紫外区的吸收高峰在280nm处,所以核酸的紫外吸收光谱数据是鉴定核酸的重要依据之一。由于核苷酸最大吸收波长为260nm,根据朗伯-比尔定律可计算出在波长260nm的紫外线下,1个OD值的光密度大约相当于50µg/ml的双链DNA, 40µg/ml的单链RNA。紫外分光光度法只适用于测定浓度大于0.25µg/ml的核酸溶液。 计算公式:dsDNA(µg/µl)=OD260x50x稀释倍数/1000R......阅读全文
操纵基因的鉴定方法
原来操纵基因是靠阻遏物的专一结合以免除核酸酶(nuclease)的攻击的,通过DNA片段的分离与序列测定,即可确定其结构。但是这是一件极吃力的工作。利用限制性内切酶可以确切分离出蛋白质所接触的部位的片段,就可以鉴定操纵基因的结构,与测定DNA序列的化学法相似,测定操纵基因的基本原则是:如果一条DNA
真菌鉴定的操作方法
1.常见标本主要有各种分泌物,皮肤的角质性物质,如毛发、指(趾)甲、鳞屑,及脓汁液、穿刺液等,粪便和尿液,组织块,环境中的各种标本材料等。 2.采集标本应新鲜,最多不超过2h,如不立即送检则必须放入冰箱保存,尽速送检;应在用药前采集标本;标本采集量应充足,血液和脑脊液不少于5ml,胸腔积液不少
定性分析的鉴定方法
在湿法分析中,一个理想的试验应该具有较好的分辨力、较高的选择性和灵敏度。分辨力指反应时出现的现象和生成的产物是否容易辨认。只有少数几种物质能起同样响应的试验称为选择性高的试验,所用的试剂被称为选择性高的试剂。如果只有一种物质能与某种试剂起作用,则该试剂称为特效试剂,该鉴定反应称为特效反应。但只有在一
志贺菌属鉴定的方法
志贺菌属的鉴定方法:初步鉴定:挑选可疑菌落3~4个先用志贺菌属多价诊断血清作试探性玻片凝集试验。将试探性凝集试验阳性的菌落至少接种2~3支KIA和MIU,经35℃培养18~24h,凡符合KIA:K/A.产气-/+、H2S-,MIU:动力-、吲哚+/-、尿酶-,并结合试探性玻片凝集试验阳性结果可鉴定为
几种常用的蛋白鉴定方法
传统的蛋白鉴定方法,如免疫印迹法、内肽的化学测序、已知或未知蛋白的comigration分析,或者在一个有机体中有意义的基因的过表达通常耗时、耗力,不适合高流通量的筛选。 目前,所选用的技术包括对于蛋白鉴定的图象分析、微量测序、进一步对肽片段进行鉴定的氨基酸组分分析和与质谱相关的技术。
蛋白的常用蛋白鉴定方法
传统的蛋白鉴定方法,如免疫印迹法、内肽的化学测序、已知或未知蛋白comigration分析,或者在一个有机体中有意义的基因的过表达通常耗时、耗力,不适合高流通量的筛选。目前,所选用的技术包括对于蛋白鉴定的图象分析、微量测序、进一步对肽片段进行鉴定的氨基酸组分分析和与质谱相关的技术。 “满天星”式的2
Rh血型鉴定的方法操作
蛋白水解酶法 (包括菠萝酶、木瓜酶、无花果酶、胰蛋白酶等) 以菠萝酶介质法为例: ⑴取菠萝酶1g,加pH5.5磷酸盐缓冲液100ml,充分振摇混匀,置37℃水浴箱30min,离心沉淀后取上清液即1%菠萝酶液。放置4℃冰箱贮存。 ⑵待检者红细胞及对照红细胞用生理盐水洗涤1次(有溶血的红细胞除
操纵基因的鉴定方法
DNA上蛋白质的结合部位,如一种操纵基因,如何能够鉴定出来呢? 原来操纵基因是靠阻遏物的专一结合以免除核酸酶(nuclease)的攻击的,通过DNA片段的分离与序列测定,即可确定其结构。但是这是一件极吃力的工作。利用限制性内切酶可以确切分离出蛋白质所接触的部位的片段,就可以鉴定操纵基因的结构,与测定
鉴定晶体最可靠的方法
从外形和某些物理性质可以初步鉴别晶体,但并不一定可靠;鉴别晶体最可靠的科学方法是对固体进行X射线衍射实验。
几种常用的蛋白鉴定方法
传统的蛋白鉴定方法,如免疫印迹法、内肽的化学测序、已知或未知蛋白的comigration分析,或者在一个有机体中有意义的基因的过表达通常耗时、耗力,不适合高流通量的筛选。 目前,所选用的技术包括对于蛋白鉴定的图象分析、微量测序、进一步对肽片段进行鉴定的氨基酸组分分析和与质谱相关的技术。
几种常用的蛋白鉴定方法
传统的蛋白鉴定方法,如免疫印迹法、内肽的化学测序、已知或未知蛋白的comigration分析,或者在一个有机体中有意义的基因的过表达通常耗时、耗力,不适合高流通量的筛选。 目前,所选用的技术包括对于蛋白鉴定的图象分析、微量测序、进一步对肽片段进行鉴定的氨基酸组分分析和与质谱相关的技术。1 图象
结核分枝杆菌鉴定方法
1.1 萋尼氏抗酸染色痰涂片显微镜检查 目前萋尼氏抗酸染色痰涂片显微镜检查是我国结核病实验室使用最为 普遍的方法,其操作简单快捷,特异性高,设备要求低,但是灵敏度较低,不能及时发现病人。1.2 发光二极管荧光显微镜(LED荧光显微镜)发光二极管荧光显微镜管利用二极管光源,延长了显微镜使用寿命,不需要
硝酸根离子的鉴定方法
硝酸根离子的鉴定方法有棕色环实验法、铜离子检验法等。1、棕色环实验法实验原理硝酸根离子有氧化性,在硫酸亚铁溶液中能使亚铁离子氧化成铁离子,而自己则还原为一氧化氮。一氧化氮能跟许多金属盐结合生成不稳定的亚硝基化合物。它跟硫酸亚铁反应即生成深棕色的硫酸亚硝基铁。反应方程式3Fe²﹢+NO₃﹣+4H﹢=3
几种常用的蛋白鉴定方法
几种常用的蛋白鉴定方法 传统的蛋白鉴定方法,如免疫印迹法、内肽的化学测序、已知或未知蛋白的 comigration分析,或者在一个有机体中有意义的基因的过表达通常耗时、耗力,不适合高流通量的筛选。 目前,所选用的技术包括对于蛋白鉴定的图象分析、微量测序、进一步对肽片段进行鉴定的氨基
玉米质量鉴定的化学方法
脂肪酸度是鉴定玉米质量优劣的有效方法,而水浸酸度对鉴定玉米质量毫无意义,实验方法及结果报告如下: 实验部分; 一、玉米脂肪酸度的测定 (一)试剂 1、氢氧化钾标准溶液:1毫升含1毫克氢氧化钾 2、乙醇酚酞溶液:取0.4克酚酞溶于1000毫升乙醇中。 (二)样品处理 将玉米用粉碎机打碎
阳离子的鉴定方法(一)
阳离子鉴定方法条件与干扰灵敏度捡出限量最低浓度Na+1.取2滴Na+试液,加8滴醋酸铀酰试剂 :UO2(Ac)2+Zn(Ac)2+HAc,放置数分钟,用玻璃棒摩擦器壁,淡黄色的晶状沉淀出现,示有Na+ :3UO22++Zn2++Na++9Ac-+9H2O=3UO2(Ac)2·Zn(Ac)2·
成体干细胞的鉴定方法
1)利用分子标记在活体组织中对细胞进行标记,然后确定它们所产生的特定细胞类型。2)将细胞从活体动物上分离出来,在对其进行细胞培养的过程中进行标记,之后将细胞移植入另一个动物体内,观察该细胞是否可以再生其来源组织。3)分离细胞,进行细胞培养,并对其分化进行控制,通常采用加入生长因子或向细胞内引入新基因
酶标仪性能评价与鉴定方法
近年来,酶标仪在临床实验室中的应用越来越普及,使得酶免疫分析法(EIA)的自动化程度及精确性愈来愈高,尤其是近几年,进口的、国产的单、多通道全自动酶标仪的种类及型号发展非常迅猛,是临床实验室自动化程度继生化分析仪、血细胞计数仪、血凝仪等之后的又一次更新和提高。然而,国内外有关酶标仪性能系统评价的
阳离子的鉴定方法(三)
Cu2+1.取l滴Cu2+试液,加1滴6mol·L-1HAc酸化,加l滴K4[Fe(CN)6]溶液,红棕色沉淀出现,示有Cu2+2Cu2+ + [Fe(CN)6]4- = Cu2[Fe(CN)6]↓1.在中性或弱酸性溶液中进行。如试液为强酸性,则用3mol·L-1NaAc调至弱酸性后进行。沉淀不
几种常用的蛋白鉴定方法
传统的蛋白鉴定方法,如免疫印迹法、内肽的化学测序、已知或未知蛋白的comigration分析,或者在一个有机体中有意义的基因的过表达通常耗时、耗力,不适合高流通量的筛选。 目前,所选用的技术包括对于蛋白鉴定的图象分析、微量测序、进一步对肽片段进行鉴定的氨基酸组分分析和与质谱相关的技术。 1
硝酸根离子的鉴定方法
硝酸根离子的鉴定方法有棕色环实验法、铜离子检验法等。1、棕色环实验法实验原理硝酸根离子有氧化性,在硫酸亚铁溶液中能使亚铁离子氧化成铁离子,而自己则还原为一氧化氮。一氧化氮能跟许多金属盐结合生成不稳定的亚硝基化合物。它跟硫酸亚铁反应即生成深棕色的硫酸亚硝基铁。反应方程式3Fe²﹢+NO₃﹣+4H﹢=3
酸枣核的鉴定方法介绍
性状鉴别种子扁圆形或扁椭圆形,长5-9mm,宽5-7mm,厚约3mm。表面紫红色或紫褐色,平滑有光泽,有的具纵裂纹。一面较平坦,中间有1条隆起的纵线纹;另一面稍凸起。一端凹陷,可见线形种脐;另端有细小凸起的合点。种皮较脆,胚乳白色,子叶2,浅黄色,富油性。气微、味淡。以粒大、饱满、有光泽、外皮红棕色
硝酸根离子的鉴定方法
硝酸根离子的鉴定方法有棕色环实验法、铜离子检验法等。1、棕色环实验法实验原理硝酸根离子有氧化性,在硫酸亚铁溶液中能使亚铁离子氧化成铁离子,而自己则还原为一氧化氮。一氧化氮能跟许多金属盐结合生成不稳定的亚硝基化合物。它跟硫酸亚铁反应即生成深棕色的硫酸亚硝基铁。反应方程式3Fe²﹢+NO₃﹣+4H﹢=3
志贺菌属的鉴定方法
初步鉴定:挑选可疑菌落3~4个先用志贺菌属多价诊断血清作试探性玻片凝集试验。将试探性凝集试验阳性的菌落至少接种2~3支KIA和MIU,经35 ℃培养18~24h,凡符合KIA:K/A、产气-/+、H2S-,MIU:动力-、吲哚+/-、尿酶-,并结合试探性玻片凝集试验阳性结果可鉴定为志贺菌属医学|教育
阳离子的鉴定方法(二)
1. 在HAc-NH4Ac的缓冲溶液中进行2. Cr3+、Fe3+、Bi3+、Cu2+、Ca2+等离子在HAc缓冲溶液中也能与铝试剂生成红色化合物而干扰,但加入氨水碱化后,Cr3+、Cu2+的化合物即分解,加入(NH4)2CO3,可使Ca2+的化合物生成CaCO3而分解,Fe3+、Bi3+(包括Cu
抗血清有哪些鉴定方法?
1.抗体特异性的鉴定常用双向免疫扩散法。(1)粗抗原及纯抗原之间皆有一条沉淀线,且两者互相融合,则已产生单价特异性抗体;(2)若纯化抗原出现一条,而粗抗原出现多条线,且一条沉淀线与纯抗原沉淀线相连接,需去除杂抗;(3)若不出现沉淀线,表示免疫失败。2.抗体效价的测定 颗粒性抗原采用凝集试验,可溶性抗
结核分枝杆菌鉴定方法
1.1 萋尼氏抗酸染色痰涂片显微镜检查 目前萋尼氏抗酸染色痰涂片显微镜检查是我国结核病实验室使用最为 普遍的方法,其操作简单快捷,特异性高,设备要求低,但是灵敏度较低,不能及时发现病人。1.2 发光二极管荧光显微镜(LED荧光显微镜)发光二极管荧光显微镜管利用二极管光源,延长了显微镜使用寿命,不需要
硫化物的鉴定方法
点滴法是鉴定硫离子和硫氢根离子的灵敏方法,其步骤为:在点滴板上混合可溶硫化物的碱性溶液和1%的硝普酸钠Na2[Fe(CN)5NO](亚硝基铁氰化钠)溶液,若试样中存在S离子则会出现不同深度的红紫色,灵敏度1:50000。其机理是[Fe(CN)5(NOS)]4-离子的生成。除此之外,向点滴板中加入试液
抗体的效价鉴定-方法
抗体的效价鉴定 不管是用于诊断还是用于治疗,制备抗体的目的都是要求较高效价。不同的抗原制备的抗体,要求的效价不一。鉴定效价的方法很多,包括有试管凝集反应、琼脂扩散试验、酶联免疫吸附试验(ELISA)等。常用的抗原所制备的抗体一般都有约成的鉴定效价的方法,以资比较。如制备抗抗体的效价,一般就采用琼脂扩
成体干细胞的鉴定方法
科学家尚未就成体干细胞的鉴定标准达成一致,然而,经常被采用的鉴定方法包括:1)利用分子标记在活体组织中对细胞进行标记,然后确定它们所产生的特定细胞类型。2)将细胞从活体动物上分离出来,在对其进行细胞培养的过程中进行标记,之后将细胞移植入另一个动物体内,观察该细胞是否可以再生其来源组织。3)分离细胞,