肿瘤组织源性的原代细胞培养
一、肿瘤细胞培养的概述 肿瘤细胞的原代培养与正常细胞的原代培养的条件基本相似。一般常用肿瘤原代细胞培养基础培养基、5~10%血清浓度、细胞培养添加剂、抗生素等等即可。或在原代培养时需加入原代细胞培养的特制添加物,或原患者血清(1~2%)以利细胞生长。用细胞生长因子如胰岛素、氢化可的松、雌激素等等。也可以考虑动物媒介培养。二、肿瘤细胞的十大生物学特征自给自足生长信号(Self-Sufficiency in Growth Signals);抗生长信号的不敏感(Insensitivity to Antigrowth Signals);抵抗细胞死亡 (Resisting Cell Death);潜力无限的复制能力 (Limitless Replicative Potential);持续的血管生成 (Sustained Angiogenesis)......阅读全文
肿瘤组织源性的原代细胞培养
一、肿瘤细胞培养的概述 肿瘤细胞的原代培养与正常细胞的原代培养的条件基本相似。一般常用肿瘤原代细胞培养基础培养基、5~10%血清浓度、细胞培养添加剂、抗生素等等即可。或在原代培养时需加入原代细胞培养的特制添加物,或原患者血清(1~2%)以利细胞生长。用细胞生长因子如胰岛素、氢化可的松、
肿瘤组织源性原代细胞分离和培养
肿瘤组织源性原代细胞分离和培养 肿瘤组织源性原代细胞分离的常用方法: 组织块法、酶消化法、钽网法、脱落细胞法。 肿瘤组织源性原代细胞对药物筛选体系的益处: (1)肿瘤组织源性原代细胞培养需要的肿瘤组织较少; (2)不影响其他病理检查对肿瘤标本的需求; (3)肿瘤组织源性
组织源性原代细胞培养实验室组建的基本要求
一、实验室设计1、细胞培养是一种无菌操作技术,要求工作环境和条件必须保证无微生物污染和不受其它有害因素的影响。2、细胞培养室和设计原则是防止微生物污染和有害因素影响,要求工作环境清洁、空气清新,干燥和无烟尘。3、细胞培养室的设计原则一般是无菌操作区设在室内较少走动的内侧,常规操作和封闭培养于一室,为
组织源性正常大鼠原代心肌细胞培养实验方法
一、实验试剂1、培养基: PriCells Medium + 10% FBS + 1% P/S + PriCells Supplement2、冻存液: PriCells Medium + 20% FBS + 10% DMSO3、洗涤液: 1×PBS(pH 7.4)+ 1% P/S4、染色液: 0.4
组织源性正常小鼠原代真皮纤维原细胞培养实验方法
一、实验试剂1、培养基: Primary Cell Medium + 10% FBS + 1% P/S + Primary Cell Supplement2、冻存液: Primary Cell Medium + 20% FBS + 10% DMSO3、洗涤液: 1 × PBS (pH 7.4 )+
肿瘤细胞原代培养实验——组织块法
肿瘤细胞原代培养可以:(1)研究癌变机理;(2)研究抗癌药检测;(3)研究癌分子生物学;(4)用于阐明和解决癌症。实验方法原理肿瘤细胞的原代培养与正常细胞的原代培养的条件基本相似。一般常用原代细胞的基础培养基,10%血清浓度即可,在原代培养时需加入原代细胞培养的特制添加物,或原患者血清(1%-2%)
关于纵隔纤维组织源性肿瘤的基本信息介绍
纤维组织肿瘤由纤维细胞、成纤维细胞及胶原纤维所组成。根据分化和成熟程度分为良性及恶性,纵隔纤维原性肿瘤非常罕见,目前习惯将这类肿瘤分类为纤维瘤病、纤维肉瘤及恶性纤维性组织细胞瘤。 (1)纵隔纤维瘤 是一种纤维组织增生性疾病,由胶原纤维和成熟纤维细胞组成。病因不明,可能与一些炎症或肿瘤产生的活性
原代细胞培养的应用
1、为研究生物体细胞的生长、代谢、繁殖提供有力的手段; 2、为传代培养创造条件; 3、服务于临床实践,用于药物筛选等。
原代细胞培养简介
原代细胞(primary culture cell)是指从机体取出后立即培养的细胞。有人把培养的第1代细胞与传10代以内的细胞统称为原代细胞培养。原代细胞不仅广泛应用于分子、细胞生物学和生物医学基础研究,如蛋白质组学、基因组学、细胞株(系)研究、DNA,RNA和遗传学研究等,还可应用于当今热门的
原代细胞培养技术分类
一、组织块直接培养法1、取材,用Hank's液洗涤三次,并剔除脂肪,结缔组织,血液等杂物。2、用手术剪将组织剪切成1mm3左右的小块,再用Hank's液洗三次。3、将组织块转移至培养瓶,并贴附于瓶底面。4、轻轻将培养瓶翻转,瓶底朝上,向瓶内注入适量的培养液,将培养瓶放置在37℃恒温箱
原代细胞培养之取材
取材作为原代细胞培养过程中的第一部至关重要,以下几种取材技术,你都用过哪些方法呢? 各类组织取材,操作及注意事项: 1.皮肤和粘膜 主要取皮片,面积一般2~4平方厘米。 2.内脏和实体瘤 1)无菌环境; 2)熟悉所需组织的类型和部位; 3)要避开破溃、坏死液化部分,以防污染,尽量去
原代肿瘤细胞的选择性培养:汇合饲养层肿瘤细胞筛选...
原代肿瘤细胞的选择性培养:汇合饲养层肿瘤细胞筛选实验饲养层技术取决于通过其他接触抑制细胞形成的单层预防成纤维细胞的过度生长。 饲养层技术并不能选择性抑制正常上皮细胞, W为正常表皮细胞和正常乳腺上皮都能在 汇合的伺养层上形成克隆。然而,神经胶质瘤研究的结果表明,在同种饲养层上选择培养等同的正常细胞是
原代肿瘤细胞的选择性培养:汇合饲养层肿瘤细胞筛选
实验方法原理 在指数生长中期,用丝裂霉素C处理饲养层细胞,将细胞培养形成汇合的单层。通过胶原蛋白酶消化从活检标本分离肿瘤细胞,或者用胰蛋白酶消化从原代培养物获得肿瘤细胞,然后将肿瘤细胞接种到汇合的单层上(图24.1)。上皮性肿瘤细胞可以在3
纵隔间叶源性肿瘤及其他肿瘤的简介
几乎所有间叶源性肿瘤均可在纵隔内见到。间叶组织包括纤维、脂肪、平滑肌、骨骼肌、间皮、滑膜、血管、组织细胞以及原始间叶细胞等(骨、软骨和淋巴造血系统),它们是一大类在胚胎学上有共同起源的组织的总称。在胚胎时期均由中胚层演化而来,起到支持、营养、保护等作用。凡起源于上述组织的肿瘤习惯上称为软组织肿瘤
简述神经源性肿瘤的症状体征
肿瘤位于颈部外侧上段,胸锁乳突肌深处。随圆形或圆形,表面光滑。生长缓慢,病变范围较小时,常无明显症状。肿瘤较大时,可突向咽部,使咽侧壁内移、饱满,严重时可影响呼吸。偶可恶变,表现为短期内肿瘤迅速增大,或伴迷走、舌下神经麻痹等征。
关于纵隔脂肪源性肿瘤的简介
分良性及恶性两大类,良性肿瘤占大多数。可发生于纵隔任何部位,大部分位于前纵隔、心缘旁或心膈角。 (1)纵隔脂肪瘤 是纵隔内较常见的间叶源性肿瘤之一。可发生于任何年龄,成人男性稍多。临床上一般无明显症状,如肿瘤体积大可压迫周围组织,可产生相应症状。CT对脂肪性肿瘤诊断有重要价值,在纵隔内有良
人源肿瘤细胞系异种移植CDX与人源肿瘤组织来源移植瘤PDX
问:什么是肿瘤移植模型? 答:人的肿瘤移植到小鼠体内构建的人源化肿瘤模型 问:这种模型意义在哪? 答:筛药,为人民服务。(请为伟大的小鼠致敬!) 问:为啥要构建肿瘤模型,不能跳过直接上临床?不也可以筛药吗? 答:嗯,好主意,要不你先来好不好? .......
人源肿瘤细胞系异种移植CDX与人源肿瘤组织来源移植瘤PDX
问:什么是肿瘤移植模型?答:人的肿瘤移植到小鼠体内构建的人源化肿瘤模型问:这种模型意义在哪?答:筛药,为人民服务。(请为伟大的小鼠致敬!)问:为啥要构建肿瘤模型,不能跳过直接上临床?不也可以筛药吗?答:嗯,好主意,要不你先来好不好?.......问:什么是CDX , PDX?答:急什么,认真听小编讲
新鲜组织分离原代细胞
新鲜手术取得或冻存的组织于37 ℃ 快速复温,原代细胞培养工作液清洗3次,尽量修剪去除纤维组织,将组织块剪成约1 mm3大小的小块,弯头吸管吸取组织块均匀种植于75 cm2 培养瓶瓶底,瓶内加入少量原代细胞培养工作液,小心翻转培养瓶使组织块黏附于瓶底,置于37 ℃、5% CO2培养箱中培养6-8
原代细胞培养中常遇到的误区
原代细胞(primary culture cell)是指从机体取出后立即培养的细胞。有人把培养的第1代细胞与传10代以内的细胞统称为原代细胞培养。原代细胞不仅广泛应用于分子、细胞生物学和生物医学基础研究,如蛋白质组学、基因组学、细胞株(系)研究、DNA,RNA和遗传学研究等,还可应用于当今热门的
细胞培养原代培养的原理
将动物机体的各种组织从机体中取出,经各种酶(常用胰蛋白酶)、螯合剂(常用EDTA)或机械方法处理,分散成单细胞,置合适的培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖,这一过程称原代培养。细胞培养是生物学和医学研究最常用的手段之一,可分为原代培养和传代培养两种。原代培养是直接从生物体获取细胞进行培养。由于
原代细胞培养的几种常见技术
原代细胞传代技术一、贴壁细胞的消化法传代1、吸除或倒掉瓶内旧培养液。2、加入1ml左右消化液(胰蛋白酶或与EDTA混合液)轻轻摇动培养瓶,使瓶底细胞都浸入溶液中。3、消化2-5分钟后把培养瓶放置在显微镜下进行观察,发现原贴壁的细胞逐渐趋于圆形,在还未漂起时,弃去消化液,加入培养液终止消化。4、用吸管
原代细胞培养中的常见错误
当培养原代细胞时,重要的是要记住,他们不是细胞系,不能同等对待。我们非常熟悉研究人员在培养原代细胞时遇到的常见问题。这里有六个在原代细胞培养中的常见错误,以及如何纠正这些错误。 错误1:一小管原代细胞在水浴中解冻一段时间纠正1:原代细胞对解冻过程非常敏感,因此将小瓶置于37℃水浴中,保持并轻轻旋转直
原代细胞培养方法有哪些
你主要要原代培养那种细胞,不同的细胞方法肯定不同。如一般悬浮细胞,如血液细胞,就分离后,直接培养。培养组织中的细胞,就需要消化过后,进行培养。也有用组织块培养的
原代细胞培养之——培养技术
原代细胞的培养也叫初代培养 是从供体取得组织细胞在体外进行的首次培养,是建立细胞系的第一步,是一项基本技术。原代细胞因刚从组织中分离开,生物学特性未发生很大变化,仍保留原来的遗传特性,也最接近和反映体内生长特性,适宜用于药物敏感性试验、细胞分化等实验研究。 原代细胞往往有多种细胞组成,比较混杂,即使
原代细胞培养之——取材技术
细胞的来源多样,培养方法也各不相同,凡是来源于胚胎、组织器官及外周血,经特殊分离方法制备而来的原初培养的细胞称之为原代细胞。原代细胞经分散接种之手段称为传代。凡能经传代方式进行再次培养的细胞称为传代细胞。若能稳定生长传至10~20代以上的细胞可确立为细胞系。若有条件能开展单细胞克隆、纯化,经大量扩增
原代细胞培养优点与用途?
一、优点 (1) 细胞刚离开机体,生物学性状与原体内细胞比较接近,相比之下,细胞系的一个缺点是它们往往与原始的组织有不一样的遗传和表型,而原代细胞保持了细胞在体内的许多重要标志和功能。 (2) 细胞的初代培养也是建立各种细胞株(系)的必经阶段。 二、原代细胞培养的临床应用: (1) 细胞
纵隔间叶源性肿瘤及其他肿瘤的病理介绍
纵隔软组织良性肿瘤组织形态大致与起源组织相似,仅是数量或结构排列上略有差别。纵隔恶性软组织肿瘤形态与正常起源组织相差较大,并且细胞分化程度不同。分化程度高者,常能在肿瘤内找见某些与起源组织相似的形态特点,两者有时难于鉴别,须借助免疫组化、电镜等手段并结合临床才能鉴别。
诊断纵隔间叶源性肿瘤及其他肿瘤的简介
因发生于纵隔的间叶源性肿瘤来源各异,症状少,无特异性,术前诊断有赖于病理支持,结合临床病史与体格检查,选择合适的辅助检查手段,有利于提高术前诊断准确率。软组织肉瘤的分期分级对其诊断、治疗、预后的评价和研究是非常重要的。
原代肿瘤细胞选择性培养:汇合饲养层肿瘤细胞筛选实验
实验方法原理在指数生长中期,用丝裂霉素C处理饲养层细胞,将细胞培养形成汇合的单层。通过胶原蛋白酶消化从活检标本分离肿瘤细胞,或者用胰蛋白酶消化从原代培养物获得肿瘤细胞,然后将肿瘤细胞接种到汇合的单层上(图24.1)。上皮性肿瘤细胞可以在3周至3个月内形成克隆。纤维肉瘤和神经胶质瘤并不总是形成克隆,而