玉米花培愈伤组织原生质体分离纯化及活力检测
摘 要 以三种玉米基因型材料产生的染色体不同的愈伤组织, 经继代培养一年零四个月的愈伤组织分离原生质体, 分离效果以“单复98×53”最好; 同类材料不同倍性愈伤组织进行原生质体分离, 其获得量间的差异不大; 继代培养后16 天的愈伤组织分离原生质体的效果好, 原生质体活力高、质量好。原生质体纯化时的离心速度以1000 转ö分, 分离效果较好; 纤维素酶种类及浓度与原生质体的获得量有关。点击这里进入下载页面:进入下载页面......阅读全文
愈伤组织的分化
一、目的要求了解愈伤组织再分化原理,学习诱导愈伤组织分化的方法。二、基本原理愈伤组织在离体培养过程中,组织和细胞的潜在发育能力可以在某种程度上得到表达,伴随着反复的细胞分裂,又开始新的分化。将脱分化的细胞团或组织经重新分化而产生出新的具有特定结构和功能的组织或器官的一种现象,称为再分化。在一定的培养
愈伤组织的概念
愈伤组织(callus)是指原植物体的局部受到创伤刺激后,在伤口表面新生的组织。它由活的薄壁细胞组成,可起源于植物体任何器官内各种组织的活细胞。
原生质体分离的分离方法
(1)机械法分离:缺点:产量极低;应用的材料受限制;操作极费力(2)酶法分离:Cocking最早开展这方面研究,克服了机械法分离的缺陷,可分为直接法和顺序法两种。酶法可在短时间内获得大量原生质体,缺点是:不纯的酶制剂所含杂质对原生质体可能有不同程度的毒害作用。
愈伤组织的形成过程
从一块外植体形成典型的愈伤组织,大致要经历三个时期:起动期、分裂期和形成期。起动期是指细胞准备进行分裂的时期。用于接种的外植体的细胞,通常都是成熟细胞,处在静止状态。起动期是通过一些刺激因素(如机械损伤、改变光照强度、增加氧等)和激素的诱导作用,使外植体细胞的合成代谢活动加强,迅速进行蛋白质和核酸的
植物愈伤组织培养
无菌播种(一)实践目的学习利用植物种子的胚轴进行愈伤组织培养的方法,主要是种子的无菌接种技术。(二)实践地点和时间植物组培室、建议4学时(三)实践用具与材料超净工作台、手术剪、枪状镊、酒精灯、酒精瓶、纱布、高压灭菌锅、电子天平、盛物篮、植物种子、70%酒精、0.1%升汞、ZT、2,4—D、大量元素、
愈伤组织的种类划分
愈伤组织的培养分为继代培养和分化培养。继承培养在外植体上形成以后,愈伤组织的继代培养在已充分发育,但没有出现老化现象之前,应及时从外植体上分离下来,转入继代培养基上进行继代培养。分离是必要的措施,继代培养时若连同外植体就会影响愈伤组织的产量和质量,可能是由于残存的外植体在死亡过程中会产生某些有毒物质
植物愈伤组织的培养
愈伤组织是指切取植物体的一部分,置于含有生长素和细胞分裂素的培养液中培养,诱导产生的无定形的组织团块。愈伤组织培养不仅是一种植物快繁的新手段,同时也是植物改良,种质保存和有用化合物生产的理想途径。 愈伤组织 一、无菌播种 (一)实践目的 学习利用植物种子的胚轴进行愈伤组
关于玉米原生质体的提取方法
一、酶解液的组成:1 纤维素酶0.7% 果胶酶0.5% 山梨醇14% 氯化钙5mmol•L-1, pH5.8二、漂洗液的组成:山梨醇14%,硝酸钾 1mmol•L-1, 磷酸二氢钾0.2 mmol•L-1, 氯化钙0.5 mmol•L-1,硫酸铜0.01 µmol•L-1三、材料预处理: 取黄化叶片
愈伤组织与试管苗培养
愈伤组织的培养 一般来说,从接种外植体到出现愈伤组织,需要经过2周时间。2周之内就可以看到外植体上逐渐长出乳白色或黄白色的瘤状愈伤组织。首次培养愈伤组织时,恒温箱的门应该关闭,不必见光,因为在无光条件下愈伤组织长得更快。2周以后,由于培养基中的营养成分已接近耗尽,必须更换培养基,进行继代
愈伤组织的培养形成过程
从一块外植体形成典型的愈伤组织,大致要经历三个时期:起动期、分裂期和形成期。 起动期是指细胞准备进行分裂的时期。用于接种的外植体的细胞,通常都是成熟细胞,处在静止状态。起动期是通过一些刺激因素(如机械损伤、改变光照强度、增加氧等)和激素的诱导作用,使外植体细胞的合成代谢活动加强,迅速进行蛋白质和核酸
胡萝卜愈伤组织的建立
一、 材料和设备 超净工作台或者无菌接种室 培养基 N 6 +2 mg/L 2,4-D 带有吸水纸的成套的培养皿,无菌水 解剖刀、枪型镊子、刀片 无病虫的胡萝卜直根数十个 消毒剂 0.2%的升汞溶液 70%酒精、95%酒精及70%的酒精棉球
植物的愈伤组织是什么
愈伤组织是一团没有分化的可持续旺盛分裂的细胞团,是组织培养中的一种组织形态。接种外植体在愈伤组织诱导培养基上,经过一段时间的培养即可形成无序结构的愈伤组织块。所有植物都有被诱导产生愈伤组织的潜能,但是不同植物种类诱导形成愈伤组织的难易程度差别很大,且所需激素浓度等诱导条件也存在差异。
愈伤组织的功能用途
在离体培养中,接受各种因素的作用,细胞都会分裂进入脱分化,经持续分裂增生成细胞团,进一步发展成为不受亲本植株影响的愈伤组织。愈伤组织培养作为一种最常培养形式,除茎尖分生组织培养和一部分器官培养以外,其他几种培养形式最终都要愈伤组织才能产生再生植株,而且,愈伤组织还常常是悬浮培养的细胞和原生质体的。因
一文了解愈伤组织
愈伤组织(callus)是指原植物体的局部受到创伤刺激后,在伤口表面新生的组织。它由活的薄壁细胞组成,可起源于植物体任何器官内各种组织的活细胞。在植物体的创伤部分,愈伤组织可帮助伤口愈合;在嫁接中,可促使砧木与接穗愈合,并由新生的维管组织使砧木和接穗沟通;在扦插中,从伤口愈伤组织可分化出不定根或
愈伤组织的主要类型介绍
紧密型(compact):愈伤组织内无大的细胞间隙,细胞间被果胶质紧密结合,不易形成良好的悬浮系统。松脆型(friable):愈伤组织内有大量大的细胞间隙,细胞排列无次序,容易分散成单细胞或少数几个细胞组成的小细胞团,是进行悬浮培养的最合适的材料。两类愈伤组织通过激素调节可互相转变。其方法是:加入高
什么是植物的愈伤组织
愈伤组织(callus)原指植物体的局部受到创伤刺激后,在伤口表面新生的组织.它由活的薄壁细胞组成,可起源于植物体任何器官内各种组织的活细胞.在植物体的创伤部分,愈伤组织可帮助伤口愈合;在嫁接中,可促使砧木与接穗愈合,并由新生的维管组织使砧木和接穗沟通;在扦插中,从伤口愈伤组织可分化出不定根或不定芽
原生质体的分离方法介绍
机械分离法 :常用于分离藻类原生质体,采用渗透方法使细胞发生质壁分离,用刀把细胞壁切破,使原生质体流出。(手工操作难度大,得率低,费时费力)酶解分离法:用酶(琼脂酶,果胶酶,纤维素酶等)将细胞壁分解。(条件温和,原生质体完整性好,活力高,得率高) 因此原生质体制备多采用酶解法,此法操作过程分为:取材
细胞组织植物方面的应用
微繁殖技术 通过茎尖培养或微嫁接技术,可以脱去植物体内的病毒,获得无病毒苗木,如苹果、草莓等。另外,在组织培养过程中,如愈伤组织培养、细胞悬浮培养、原生质体培养等,通过pH值、温度、离子浓度等条件的变化,可增加其变异,从中可筛选出优良的突变体,从而为新品种的选育开辟一条崭新的途径。 愈伤组织
愈伤组织和试管苗的培养
一、愈伤组织的培养 一般来说,从接种外植体到出现愈伤组织,需要经过2周时间。2周之内就可以看到外植体上逐渐长出乳白色或黄白色的瘤状愈伤组织。首次培养愈伤组织时,恒温箱的门应该关闭,不必见光,因为在无光条件下愈伤组织长得更快。2周以后,由于培养基中的营养成分已接近耗尽,必须更换培养基,进行继代培养。二
胚性愈伤组织的主要类型
根据组织学观察、外观特征及其再生性、再生方式等,愈伤组织分成两大类:胚性愈伤组织(embryonic callus,EC)和非胚性愈伤组织(non-embryonic callus,NEC)。一般胚性愈伤组织质地较坚实,颜色有乳白色或黄色,表面具球形颗粒,其生长缓慢;从细胞学来看,胚性愈伤组织由等直
原生质体分离常用的酶制剂
常用的酶制剂有:纤维素酶有Cellulase Onozuka R-10,Cellulase Onozuka RS,Cellulase。果胶酶有Pectolyase Y23,Macerozyme,Pectinase等。半纤维素酶有Rhozyme Hp-150,大多数植物分离原生质体时,纤维素酶浓度在1
植物原生质体的分离和融合
实验概要本实验介绍了原生质体分离的方法及利用PEG原生质体融合的原理和方法。实验原理植物原生质体是除去细胞壁后为原生质所包围的“裸露细胞”,是开展基础研究的理想材料。其中酶解法分离原生质体是一个常用的技术,其原理是植物细胞壁主要由纤维素、半纤维素和果胶质组成,因而使用纤维素酶、半纤维素酶和果胶酶能降
胚性愈伤组织培养的概念
中文名称胚性愈伤组织培养英文名称embryogenic callus culture定 义将母体植株上的一部分切下,形成外植体,接种到无菌的培养液上进行胚性愈伤组织的诱导、生长和发育的技术。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞培养与细胞工程(二级学科)
愈伤组织的诱导形成和形态发生
从一块外植体形成典型的愈伤组织,大致要经历三个时期:起动期、分裂期和形成期。1、起动期是指细胞准备进行分裂的时期。用于接种的外植体的细胞,通常都是成熟细胞,处在静止状态。起动期是通过一些刺激因素(如机械损伤、改变光照强度、增加氧等)和激素的诱导作用,使外植体细胞的合成代谢活动加强,迅速进行蛋白质和核
植物愈伤组织培养以及再分化
实验概要了解培养基母液的配制方法和注意事项;掌握培养基的配制和灭菌方法,掌握植物组织培养的一般方法实验原理(一)植物细胞的全能性 植物细胞的全能性即是每个植物的本细胞或性细胞都具有该植物的全套遗传基因,因此在一定培养条件下每个细胞都可发育成一个与母体一样的植株。这个概念虽然在本世纪初已经提出,但在
为什么愈伤组织再分化需要光照
组织培养中,除某些培养材料要求在黑暗中生长外,一般均需要光照。与自养的整体植株不同的是,用于组织培养的培养基含有足够的碳水化合物,因之对培养的材料来说,通过光照来进行光合作用不是—·个必需的活动,但光照对于苗的形成,根的发生,叶状枝的分化和胚状体的形成都是重要的条件。对于组织培养是否需要光照,不能一
影响原生质体分离的因素(酶法)
从理论上讲,只要用适当的酶处理,就能从任何活组织中分离得到原生质体。但是对于原生质体培养来说,要得到活性高、能进行分裂、形成愈伤组织、最后再生完整植株的原生质体则受许多因素的影响。
原生质体分离的基本原则
原生质体分离的最基本原则是保证原生质体不受伤害及不损害它的再生能力。
原生质体分离时主要应考虑因素
原生质体分离时主要应考虑取材、酶的种类、纯度、酶液的渗透压、酶解时间、温度等。(1)外植体来源:生长旺盛、生命力强的组织和细胞是获得高活力原生质体的关键,并影响着原生质体的复壁、分裂、愈伤组织形成乃至植株再生。用于原生质体分离的植物外植体有叶片、叶柄、茎尖、根、子叶、茎段、胚、愈伤组织、悬浮培养物(
愈伤组织培养的概念和作用原理
指将母体植物上各个部分切下、形成外植体、接种到无菌培养基上、进行愈伤组织诱导、生长同发育的一门技术。一般情况下,植物组织均能诱发形成愈伤组织,由外植体形成愈伤组织,标志着植物组织培养地开始。是细胞全能性的体现。