DNA&RNA寡聚核苷酸的准确分子质量测定(一)
1. 前言随着人们对核酸结构和功能的深入了解,特异性结合或者裂解致病基因的核酸药物也逐渐成为了药物研究的新热点, 核酸药物的作用效率高、应用范围广,可以对传统药物进行补充,并且在前期的临床诊断中也可以起到重要的指示作用。核酸药物主要是指各种具有不同功能的寡聚核糖核苷酸(RNA)或者寡聚脱氧核糖核甘酸(DNA),主要作用于基因水平,在信息流传递的上游阶段起作用,效率比较高,且通过结合或者裂解特异性的致病基因,而对其它基因没有任何影响。在信息流的传递过程中,信号逐级放大,一个基因可以转录出多个 mRNA,一个 mRNA 又可以翻译出多个蛋白质,所以与作用于信息流最终产物-蛋白质相比,核酸药物具有广泛的应用前景。目前的核酸药物可以与一些转录因子、凝血酶、人类免疫缺陷病毒、双链 DNA 的特殊部位等结合,从而抑制 DNA 的复制或者蛋白、受体等的结合,从而干扰和阻止病毒或者错误基因和蛋白的表达和放大,因此在基因药物的......阅读全文
动物所发现一类高度富集于成熟精子的新型小分子RNA
成熟精子中RNA的发现让科学家意识到精子不仅仅是运输父源DNA的载体。过去的研究已证实,成熟精子所携带的一些miRNA能够影响早期胚胎发育及后代的性状。然而,目前尚不清楚成熟精子中是否还携带除miRNA之外其他种类的小RNA;对各种小RNA的生成及在成熟精子中的富集过程也知之甚少。
计算小RNA分子的单细胞测序新法
最近,卡罗林斯卡学院的研究人员开发出了一种单细胞程序,测量了单个胚胎干细胞中短的非编码RNA序列的绝对数量。这种新方法可以加深我们对于“基因是如何被调节、不同的细胞类型如何发展”的理解。相关研究结果发表在10月31日的《Nature Biotechnology》。当我们基因中的信息被使用时――例如构
植物DNA提取中怎样检测提取到DNA质量
第一种方法是测量260/280的比例,判断是否有蛋白质的污染。在260nm和280nm处测定DNA溶液的光吸收,A260与A280之比应在1.75-1.80之间。低于此值表明制备物中残留蛋白质成分较高或含有酚,高于此值表明有RNA的残留。第二种方法是凝胶电泳分析,看有无断裂降解。影响DNA提取质量的
凝胶层析法(gel-chromatography)测定蛋白质相对分子质量
实验目的掌握凝胶层析的基本原理。学习利用凝胶层析法测定蛋白质相对分子质量的实验技能。实验原理凝胶层析法也称分子筛层析法,是利用具有一定孔径大小的多孔凝胶作固定相的层析技术。当混合物随流动相经过凝胶层析柱时,其中各组分按其分子大小不同而被分离的技术。该法设备简单、操作方便、重复性好、样品回收率高。凝胶
凝胶色谱测定聚合物相对分子质量及其分布
在凝胶色谱技术应用之前,许多经典方法都可以测定高聚物的相对分子质量,如端基测定法、渗透压法、粘度法等,但在测定时都有局限。在相对分子质量分布(多分散性指数)成为人们关注的热点后,经典方法却不能同时测定聚合物的相对分子质量分布。凝胶(渗透)色谱(GPC)的应用改善了测试条件,并提供了可以同时测定聚合物
凝胶色谱测定聚合物相对分子质量及其分布
在凝胶色谱技术应用之前,许多经典方法都可以测定高聚物的相对分子质量,如端基测定法、渗透压法、粘度法等,但在测定时都有局限。在相对分子质量分布(多分散性指数)成为人们关注的热点后,经典方法却不能同时测定聚合物的相对分子质量分布。凝胶(渗透)色谱(GPC)的应用改善了测试条件,并提供了可以同时测定聚合物
关于探针标记方法的介绍
①缺口平移标记法。利用的是DNA聚合酶I能修复DNA链的功能。该法先由DNaseI在DNA双链上随机切出切口,然后DNA聚合酶I沿缺口水解5´;端核苷酸,同时在3´;端修复加入被标记核苷酸,切口平行推移。缺口平移法快速、简便、成本相对较低、比活性相对较高、标记均匀,多用于大分
教科书改写!人类细胞可将RNA写入DNA!
现代生命科学的基本定律“中心法则”,指明了遗传信息的流动方向,除了极少数的逆转录病毒外,遗传信息从 DNA 到 RNA ,RNA 再到蛋白质。负责这种遗传信息单向流动的 DNA 聚合酶无法将 RNA 逆向写回 DNA ,然而,一项最新研究首次发现了人类 DNA 聚合酶将 RNA 逆向写回 DNA
分离DNA和RNA主要方法有哪些
盐析法 DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同 利用这一特点 选择适当的盐浓度就能使DNA充分溶解 而使杂质沉淀 或者相反 以达到分离目的 DNA在NaCl溶液中的溶解度先增大后减小 在DNA溶解度最低时 DNA从溶液中析出 而其他杂质还留在溶液中 达到粗提取的目的酶水解法 采
常规组织样本核酸(DNA/RNA)提取纯化
20 分钟内快速纯化高品质,高产量,即用型 DNA(见图 20)多种规格可选择:Mini Kit 可处理 25 mg 组织,Micro Kit 可处理小于 10 mg 组织完全去除污染物和抑制剂可在 QIAcube 上进行自动化纯化表1 QIAamp DNA Mini Kit纯化各类样本的核酸产量样
提取RNA中老混有DNA怎样去除
先用酚:氯仿:异戊醇(25:24:1)抽提,这时候经常在样品中会有酚残留,所以之后再用氯仿:异戊醇(24:1)抽提,将酚抽干净,以免影响后续的实验.在抽提前还要在DNA样品中加入1/10体积的PH5.2的3M醋酸钠,增加盐浓度,以免DNA沉淀出来的量太少,都被抽走了.还有最好在抽提之前要把DNA样品
DNA合成由RNA引物引发过程
DNA聚合酶不能发动新链的合成,只能催化已有链的延长;RNA聚合酶则不同,只要有模板存在,不需引物,就可以合成新RNA链。因此在体内先由RNA聚合酶合成RNA引物,DNA聚合酶再从RNA引物的3‘-OH端开始合成新的DNA链。催化RNA引物合成的酶称为引物合成酶。引物长度通常只有几个~10多个核苷酸
Nat-Chem:一种分子能直接剪断DNA摧毁癌细胞
日前,美国耶鲁大学的研究人员发现一种由海洋细菌产生的物质能够通过破坏DNA的方式杀灭癌细胞,新发现为低剂量化疗药物的研发铺平了道路。相关论文发表在5月11日出版的《自然·化学》杂志上。 物理学家组织网5月13日(北京时间)报道称,这种物质名为lomaiviticin A,先前已经被
全自动核酸蛋白分析仪概述
全自动核酸蛋白分析仪是一种用于基础医学、临床医学、预防医学与公共卫生学领域的分析仪器,于2014年10月21日启用。 快速分析多达96个样本,无需人工介入 采用安全、操作简单的即用型预制胶 可检测到浓度低至0.1 ng/µl的核酸,结果可靠 标准化、准确的分析,分辨率可达3–5 bp 界面友好
于军:DNA分子之神奇
如果我告诉你,DNA也许并不是生命起源初始时必需的大分子(基本上包括核苷酸、蛋白质和多糖)“建筑材料”,你相信吗?如果我告诉你,DNA是被它的“兄弟”——大分子RNA(组成RNA和DNA的基本单元在分子结构上只差一个氧原子)“挟持”到生命的“最小独立复制单元”——细胞里来的,你相信吗?如果我告诉
用-PCR-对一个随机多肽-DNA-文库的质量进行控制实验
试剂、试剂盒 ddH20Vent 缓冲液Vent DNA 聚合酶dNTP引物质粒 DNA仪器、耗材 琼脂糖凝胶电泳所需的试剂和设备热循环仪实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂ddH202. 酶和酶缓冲液10X Vent 缓冲液Vent DNA 聚合酶3. 核酸和寡核苷酸dNTP,各 20 mm
用-PCR-对一个随机多肽-DNA-文库的质量进行控制实验
该方案中,用 PCR 分析由质粒载体编码的随机多肽文库。该文库是由连接反应的产物转化细菌后得到的,方案 2 已经介绍过,然后再用标准的程序对质粒进行扩增和纯化。本实验来源于 PCR 实验指南(第二版),作者:种康,瞿礼嘉。试剂、试剂盒ddH20Vent 缓冲液Vent DNA 聚合酶dNTP引物质粒
用-PCR-对一个随机多肽-DNA-文库的质量进行控制实验
试剂、试剂盒 ddH20 Vent 缓冲液 Vent DNA 聚合酶 dNTP 引物 质粒 DNA
植物组织提取高质量的DNA五大方法详解(一)
蛋白质纯化是旨在从细胞,组织或整个生物体中分离出一种或几种蛋白质。蛋白质纯化对于表征目的蛋白质的功能,结构和相互作用至关重要。蛋白质分离与提取是生命科学研究基础中的基础。植物细胞由于存在细胞壁的结构,因此比动物细胞蛋白的提取相对复杂。 提取植物中的DNA对植物基因工程,植
氯离子含量准确测定方法
不同物质有不同测定方法,太多了。主要的应该是被测物在HNO3条件下加AgNo3, 中国药典(1990年版)检查氯化物系用俯视比浊法(简称垂视法)。此法有观察面积小、比浊的清晰度低、当检品的Cl-浓度与对照品接近时检出率下降、受环境光线影响等缺点。而用澄明度检测仪比浊法(简称平视法),对克服上述
DNA提取方法-影响提取质量的因素-提高提取质量的方法
一、石蜡包埋组织DNA提取的基本方法从石蜡包埋组织中提取DNA的基本步骤,是在常规DNA提取方法的基础上改良和演变而业。Goelz等(1985)最先提出的石蜡包埋组织DNA提取技术,是用机械的方法破碎组织,切除多余的石蜡,进入含SDS和高浓度蛋白酶K(1mg/ml)的提取缓冲液加温孵育,然后进行苯酚
实验室分析方法质谱分析相对分子质量的测定
分子离子峰的m/z相当于该化合物的相对分子质量。一般除同位素离子峰外,分子离子峰是质谱图中最大质荷比的峰,位于质谱图的最右端。
sanger和他的DNA测序方法
sanger是英国生物化学家,1918年8月13日生于英格兰格洛斯特夏郡,在剑桥大学圣· 约翰学院获哲学博士学位,毕业后到著名的剑桥医学研究会分子生物学实验室工作。Sanger的工作主要研究蛋白质的结构,特别是研究测定胰鸟素分子的结构,成功地测定了胰鸟素的精细结构,因而获得了1958年的诺贝尔化
详细介绍一下温度对硝酸银摩尔质量实验准确性的影响
温度在硝酸银摩尔质量实验中对准确性有着显著的影响,主要体现在以下几个方面:凝固点测量:温度的准确测定直接关系到凝固点的确定。如果温度测量存在偏差,会导致凝固点的测量值不准确,从而影响根据凝固点降低计算出的硝酸银的摩尔质量。例如,温度测量值偏高,会使计算出的凝固点降低值偏小,进而导致计算得出的硝酸银的
寡核苷酸的主要应用
反义寡核苷酸(AON)是一类通过序列特异地与靶基因DNA或mRNA结合而抑制该基因表达,在基因水平调控的分子药物。而硫代反义寡聚核苷酸(phosphorothioate oligonucleotides,简称PS2ODNs),是用硫原子将磷酸骨架上的非成键氧原子取代后形成的一类新的寡核苷酸类似物(图
反义寡核苷酸的基本内容
反义寡核苷酸(AON)是一类通过序列特异地与靶基因DNA或mRNA结合而抑制该基因表达,在基因水平调控的分子药物。而硫代反义寡聚核苷酸(phosphorothioate oligonucleotides,简称PS2ODNs),是用硫原子将磷酸骨架上的非成键氧原子取代后形成的一类新的寡核苷酸类似物
反义寡核苷酸简介
反义寡核苷酸(AON)是一类通过序列特异地与靶基因DNA或mRNA结合而抑制该基因表达,在基因水平调控的分子药物。而硫代反义寡聚核苷酸(phosphorothioate oligonucleotides,简称PS2ODNs),是用硫原子将磷酸骨架上的非成键氧原子取代后形成的一类新的寡核苷酸类似物
借助于噬菌体ELISA的DNA/RNA...
实验概要本实验从含有源自文库筛选的噬菌体克隆制备了噬菌体上清液,通过噬菌体ELISA,评估筛选出DNA/RNA结合区域的特异性序列的结合活性。实验步骤1. 噬菌体的制备 1) 挑取含有源自文库筛选的噬菌体克隆的单菌落。用灭菌牙签挑取单菌落接种于灭菌圆底培养板的微孔内,其中加有150ul含15
DNA和RNA靶序列的原位PCR扩增实验
原位PCR是Hasse等于1990年建立的技术,就是在组织细胞里进行PCR反应,它结合了具有细胞定位能力的原位杂交和高度特异敏感的PCR技术的优点,是细胞学科研与临床诊断领域里的一项有较大潜力的新技术。实验材料样品试剂、试剂盒双氧水PBS蛋白酶KRNA酶DTTdNTPKClMgCl2Tris·Cl仪
动物肝DNA提取实验中除去RNA的试剂
对于动物DNA/RNA提取实验有一些经验,希望我的回答可以帮到你。在动物肝DNA提取实验中,通常采用的试剂是三氯醋酸(Trizol)试剂。这个试剂是一种广泛应用于RNA和DNA提取的试剂,可以有效地提取RNA和DNA,且不会相互干扰。在使用Trizol试剂进行DNA提取时,可以通过调整实验步骤和加入