DNA&RNA寡聚核苷酸的准确分子质量测定(一)
1. 前言随着人们对核酸结构和功能的深入了解,特异性结合或者裂解致病基因的核酸药物也逐渐成为了药物研究的新热点, 核酸药物的作用效率高、应用范围广,可以对传统药物进行补充,并且在前期的临床诊断中也可以起到重要的指示作用。核酸药物主要是指各种具有不同功能的寡聚核糖核苷酸(RNA)或者寡聚脱氧核糖核甘酸(DNA),主要作用于基因水平,在信息流传递的上游阶段起作用,效率比较高,且通过结合或者裂解特异性的致病基因,而对其它基因没有任何影响。在信息流的传递过程中,信号逐级放大,一个基因可以转录出多个 mRNA,一个 mRNA 又可以翻译出多个蛋白质,所以与作用于信息流最终产物-蛋白质相比,核酸药物具有广泛的应用前景。目前的核酸药物可以与一些转录因子、凝血酶、人类免疫缺陷病毒、双链 DNA 的特殊部位等结合,从而抑制 DNA 的复制或者蛋白、受体等的结合,从而干扰和阻止病毒或者错误基因和蛋白的表达和放大,因此在基因药物的......阅读全文
动物肝DNA提取实验中除去RNA的试剂
对于动物DNA/RNA提取实验有一些经验,希望我的回答可以帮到你。在动物肝DNA提取实验中,通常采用的试剂是三氯醋酸(Trizol)试剂。这个试剂是一种广泛应用于RNA和DNA提取的试剂,可以有效地提取RNA和DNA,且不会相互干扰。在使用Trizol试剂进行DNA提取时,可以通过调整实验步骤和加入
sanger和他的DNA测序方法
sanger是英国生物化学家,1918年8月13日生于英格兰格洛斯特夏郡,在剑桥大学圣· 约翰学院获哲学博士学位,毕业后到著名的剑桥医学研究会分子生物学实验室工作。Sanger的工作主要研究蛋白质的结构,特别是研究测定胰鸟素分子的结构,成功地测定了胰鸟素的精细结构,因而获得了1958年的诺贝尔化
用-PCR-对一个随机多肽-DNA-文库的质量进行控制实验
试剂、试剂盒 ddH20 Vent 缓冲液 Vent DNA 聚合酶 dNTP 引物 质粒 DNA
用-PCR-对一个随机多肽-DNA-文库的质量进行控制实验
试剂、试剂盒 ddH20Vent 缓冲液Vent DNA 聚合酶dNTP引物质粒 DNA仪器、耗材 琼脂糖凝胶电泳所需的试剂和设备热循环仪实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂ddH202. 酶和酶缓冲液10X Vent 缓冲液Vent DNA 聚合酶3. 核酸和寡核苷酸dNTP,各 20 mm
用-PCR-对一个随机多肽-DNA-文库的质量进行控制实验
该方案中,用 PCR 分析由质粒载体编码的随机多肽文库。该文库是由连接反应的产物转化细菌后得到的,方案 2 已经介绍过,然后再用标准的程序对质粒进行扩增和纯化。本实验来源于 PCR 实验指南(第二版),作者:种康,瞿礼嘉。试剂、试剂盒ddH20Vent 缓冲液Vent DNA 聚合酶dNTP引物质粒
植物组织提取高质量的DNA五大方法详解(一)
蛋白质纯化是旨在从细胞,组织或整个生物体中分离出一种或几种蛋白质。蛋白质纯化对于表征目的蛋白质的功能,结构和相互作用至关重要。蛋白质分离与提取是生命科学研究基础中的基础。植物细胞由于存在细胞壁的结构,因此比动物细胞蛋白的提取相对复杂。 提取植物中的DNA对植物基因工程,植
实验室分析方法质谱分析相对分子质量的测定
分子离子峰的m/z相当于该化合物的相对分子质量。一般除同位素离子峰外,分子离子峰是质谱图中最大质荷比的峰,位于质谱图的最右端。
互补碱基的DNA和RNA的主要碱基的差别
胸腺嘧啶是DNA的主要嘧啶碱,在RNA中极少见;相反,尿嘧啶是RNA的主要嘧啶碱,在DNA中则是稀有的。在DNA分子结构中,由于碱基之间的氢键具有固定的数目和DNA两条链之间的距离保持不变,使得碱基配对必须遵循一定的规律,这就是Adenine(A,腺嘌呤)一定与Thymine(T,胸腺嘧啶)配对,G
核酸定量哪家强?荧光探针VS分光光度法
DNA编码所有的遗传信息,是创造所有生物生命的蓝图。它充当允许遗传物质在世代之间传递的存储设备。而RNA充当读取DNA中存储信息的读卡器。DNA中存储的遗传信息由RNA携带,同时RNA充当核糖体的信使,并在核糖体中合成蛋白质。分子生物学这整个过程称为“中心法则”。 基于核酸的检测的范围继续扩大,关
Science:开发出一种小到足以移动单链DNA的“分子料斗”
在一项新的研究中,来自英国牛津大学的研究人员构建出一种能够通过蛋白纳米管移动单链DNA的“分子料斗(molecular hopper)”。相关研究结果发表在2018年8月31日的Science期刊上,论文标题为“Directional control of a processive molecu
DNA提取方法-影响提取质量的因素-提高提取质量的方法
一、石蜡包埋组织DNA提取的基本方法从石蜡包埋组织中提取DNA的基本步骤,是在常规DNA提取方法的基础上改良和演变而业。Goelz等(1985)最先提出的石蜡包埋组织DNA提取技术,是用机械的方法破碎组织,切除多余的石蜡,进入含SDS和高浓度蛋白酶K(1mg/ml)的提取缓冲液加温孵育,然后进行苯酚
详细介绍一下温度对硝酸银摩尔质量实验准确性的影响
温度在硝酸银摩尔质量实验中对准确性有着显著的影响,主要体现在以下几个方面:凝固点测量:温度的准确测定直接关系到凝固点的确定。如果温度测量存在偏差,会导致凝固点的测量值不准确,从而影响根据凝固点降低计算出的硝酸银的摩尔质量。例如,温度测量值偏高,会使计算出的凝固点降低值偏小,进而导致计算得出的硝酸银的
分子遗传学词汇反义寡核苷酸
中文名称:反义寡核苷酸外文名称:antisense oligonucleotide定义:反义寡核苷酸(AON)是一类通过序列特异地与靶基因DNA或mRNA结合而抑制该基因表达,在基因水平调控的分子药物。而硫代反义寡聚核苷酸(phosphorothioate oligonucleotides,简称PS
分子遗传学词汇反义寡核苷酸
中文名称:反义寡核苷酸外文名称:antisense oligonucleotide定义:反义寡核苷酸(AON)是一类通过序列特异地与靶基因DNA或mRNA结合而抑制该基因表达,在基因水平调控的分子药物。而硫代反义寡聚核苷酸(phosphorothioate oligonucleotides,简称PS
分子遗传学词汇转移RNA基因
中文名称:转移RNA基因英文名称:transfer RNA gene;tRNA gene定 义:转录后可产生tRNA的基因。应用学科:遗传学(一级学科),分子遗传学(二级学科)
PNAS:小分子RNA引发肥胖代谢问题
科学家发现了机体生物事件链中的一种关键分子,这些事件会导致脂肪肝疾病,2型糖尿病和其他与肥胖有关的代谢异常疾病。通过阻挡这种分子,研究人员就能够扭转肥胖小鼠中其引发一些病理发展。这项研究结果刊登在《美国国家科学院院刊》(PNAS)杂志上。MIR-34A是一种小分子RNA,在肥胖小鼠和患有脂肪肝的患者
凝胶过滤法和SDS法哪个更加准确测定蛋白质分子量
蛋白质的形状影响凝胶过滤时候的行为,分子形状长的蛋白质在凝胶过滤的时候有类似于分子较大的蛋白的行为,用SDS-PAGE测定的蛋白质分子量应该比较准确,因为变形后的蛋白质迁移速度只取决于蛋白质分子大小。
服了!一种新药打尽所有癌症相关DNA、RNA和蛋白质
今年癌症研究成果格外引人注目,各领域英雄大显神通,早前几个月我们刚报道过:Benjamin F. Cravatt蛋白质组学研究组与辉瑞公司历时多年研制而成的肺癌小分子抑制剂;Marcus Peter课题组发现的人体天然存在的广谱癌症杀手siRNAs;欧竞雄肝癌研究课题组报道的能绕开肿瘤耐药的自噬
分子克隆化载体DNA的选择介绍
①质粒:质粒是细菌染色体外遗传因子,DNA呈环状,大小为1-200千碱基对(kb)。在细胞中以游离超螺旋状存在,很容易制备。质粒DNA可通过转化引入寄主菌。在细胞中有两种状态,一是“紧密型”;二是“松弛型”。此外还应具有分子量小,易转化,有一至多个选择标记的特点。质粒型载体一般只能携带10kb以
Nature-Nanotechnology:DNA环状分子的自主复制
生物系统中存在很多的自主复制的例子。然而,人工制造这样的生物系统的自主复制系统却是相当困难,这是因为生物系统很复杂。在其他领域,人类可以创造某些自我复制系统,比如磁场系统以及模块化机器人等等。我们很少将这些人造的自我复制系统和生物系统中的自我复制系统进行比较。因而,如果能从理论上将人工的自主复制
DNA分子的自发性损伤介绍
DNA复制中的错误以DNA为模板按硷基配对进行DNA复制是一个严格而精确的事件,但也不是完全不发生错误的。硷基配对的错误频率约为10-1-10-2,在DNA复制酶的作用下碱基错误配对频率降到约10-5-10-6,复制过程中如有错误的核苷酸参入,DNA聚合酶还会暂停催化作用,以其3’-5’外切核酸酶的
分子克隆化DNA片段的制备介绍
常用以下方法获得DNA片段: ①用限制性核酸内切酶将高分子量DNA切成一定大小的DNA片段; ②用物理方法(如超声波)取得DNA随机片段; ③在已知蛋白质的氨基酸顺序情况下,用人工方法合成对应的基因片段; ④从mRNA反转录产生cDNA。
高分子量DNA的回收
SageHLS系统是美国Sage公司2017年新发布的平台,它可以直接从细胞样品中快速纯化高分子量DNA。Sage公司的首席科学官Chris Boles,一直在帮助研发团队开发SageHLS平台(HLS是高分子量DNA文库制备系统的缩写)。那么,高分子量DNA对于生命科学和生物医学研究有哪些
癌细胞线粒体DNA漂移的分子机理
通过对57例结肠癌患者的基因组进行基因分析,研究人员发现患者体细胞核内的平均线粒体DNA数量比健康人高4.42倍。“这表明,迁移到核基因组中的线粒体DNA可能对癌症的发展起重要作用,”本文的共同作者,来自UAB公共卫生学院的生物统计学教授Hemant K. Tiwari博士和UAB医学院遗传学教
细胞因子分子生物学方法
这是一类利用细胞因子的基因探针检测特定细胞因子基因表达的技术。目前所有公认的细胞因子的基因均已克隆化,故能较容易地得到某一细胞因子的cDNA探针或根据已知的核苷酸序列人工合成寡聚核苷酸探针。利用基因探针检测细胞因子mRNA表达的方法多种多样,常使用斑点杂交、Northernblot、逆转录PCR
核酸提取和纯化控制程序
核酸提取和纯化控制程序 1. 目的:规定DNA和RNA核酸样本提取和纯化实验应遵守的操作。 2. 适用范围:生物样本提取DNA和RNA核酸,并包括对核酸样品的长期保存。 3. 基本定义和术语: DNA,脱氧核糖核:基因组DNA构成了生物体的完整遗传信息。几乎所有生物体的基
国产vs进口,荧光定量PCR预混液真实测评
核酸提取和纯化控制程序 1. 目的:规定DNA和RNA核酸样本提取和纯化实验应遵守的操作。 2. 适用范围:生物样本提取DNA和RNA核酸,并包括对核酸样品的长期保存。 3. 基本定义和术语: DNA,脱氧核糖核:基因组DNA构成了生物体的完整遗传信息。几乎所有生物体的基
兔肝RNA的制备及测定
实验原理: 细胞内大部份RNA均与蛋白质结合在一起,并且多以核蛋白的形式存在。因此,分离制备RNA 时,首先遇到的是必须使RNA与蛋白解离,并除去蛋白质。由于RNA的种类来源和存在形式不同,所用的制备方法各异,一般常用的方法有,盐酸胍法,去污剂法和苯酚法。其中,以苯酚法使用较为广泛。产品纯度高,适
专家指南:如何开展基因表达研究(二)
Q2:您采取哪些质量控制步骤? Gary Hardiman(加州大学圣地亚哥分校) 对于涉及RNA的应用,利用安捷伦的生物分析仪或类似产品对RNA样品进行质量控制是必需的,可确保RNA是完整的,没有降解。对于芯片,cRNA 的生物分析仪分析也很有用,可确保杂交之前均一的转录本扩增
现在有哪几种PCR的方法
Qβ复制酶反应Kacian等于1972年首次报报Qβ复制酶催化RNA模板的自我复制功能,它能在常温30min,将其天然MDV扩增至109.1986年Chu等报道用生物标记的靶序列特异性探针,可与亲和素联接的MDV杂交,经洗脱未被结合的MDV后,再加入Qβ复制酶,扩增复制MDV拷贝,然后用溴乙锭染色检