怎么选择适合的GAPDH内参抗体?

在Western Bloting实验中,在遇到总蛋白浓度测定不准确时候,或者蛋白质样品在电泳前上样时产生的样品间的操作存在误差;这些误差可以通过测定每个样品中实际转到膜上的内参,比如内参GAPDH的含量来进行校正。 GAPDH(甘油醛-3-磷酸脱氢酶)是参与糖酵解的一种关键酶,由4个30-40kDa的亚基组成,分子量146kDa,检测条带大约在36kDa。 GAPDH基因几乎在所有组织中都高水表达,广泛用作Western blot蛋白质标准化的内参。如何选择合适的GAPDH抗体?内参抗体虽然选择较多,但是也需要遵循一定的原则,并契合实际的应用要求。首先,我们需要考虑目的蛋白的大小,我们推荐内参要与检测的目的蛋白的分 子量最好相差5KD以上,因此你需要根据你目的检测蛋白的分子量来选择合适的内参,由于GAPDH的检测分子量大约在36kD,因此该内参抗体不是很适合用于检测30kD-40kD大小目标蛋白的W......阅读全文

Western-Blot内参的选择不容忽视

要检测一个基因的表达产物是否正确,或者比较表达产物量的相对变化,首选方法是Western Blot。因为Western Blot操作相对简单方便,既可以定性分析表达产物,同时还可以指示目的蛋白量的相对变化。虽然,顺利的时候Western Blot做起来很简单,可不顺的时候也很令人心烦――

简述甘油醛3磷酸脱氢酶的参数

  GAPDH(甘油醛-3-磷酸脱氢酶)是参与糖酵解的一种关键酶,由4个30-40kDa的亚基组成,分子量146kDa,检测条带大约在36kDa。GAPDH基因几乎在所有组织中都高水平表达,广泛用作Western blot蛋白质标准化的内参。因为GAPDH 作为管家基因在同种细胞或者组织中的蛋白质表

βActin抗体推荐—Abbkine高效价的BetaActin内参抗体

Actin即肌动蛋白,是细胞的一种重要骨架蛋白。Actin大致可分为六种,其中四种是不同肌肉组织特异性的,其余两种广泛分布于各种组织中,包括 β-actin和γ-non-muscle actin。β-actin作为内参是得到了公认的,这是针对大多数组织和细胞来说的,它广泛分布于细胞浆内,表达

选择适合自己的均质机很重要

  均质机是用于对粘度低于0.2Pa.s,温度低于100℃的液体物料(液-液相或液-固相)的均质\乳化的一种设备.主要应用于食品或化工行业,如:乳品、饮料、化妆品、药品等产品的生产过程中的均质、乳化工序。那如何选择适合自己生产的均质机呢?  1.最小试用量:越小越好,可以节约物料。目前某些药品的原料

怎么样选择适合自己的电热鼓风干燥箱留意几点

在选电热鼓风干燥箱时,需要留意以下几点,仅供参照:电热恒温鼓风干燥箱分台式建构和立式建构两种:1、 电热鼓风干燥箱普通在高温时升温快,低温时升温慢,夏季升温快,冬季升温慢,可通过增大加热功率来添加升温效率。但干燥箱的加热功率增大,恒温时温过冲也会随之增大。2、 电热鼓风干燥箱如果需要休止多段升温、保

怎么样选择适合自己的电热鼓风干燥箱留意几点

  怎么样选择适合自己的电热鼓风干燥箱   在选电热鼓风干燥箱时,需要留意以下几点,仅供参照:    我企业电热恒温鼓风干燥箱分台式建构和立式建构两种:   1、 电热鼓风干燥箱普通在高温时升温快,低温时升温慢,夏季升温快,冬季升温慢,可通过增大加热功率来添加升温效率。但干燥箱的加热功率增大,

Western-Blot常见问题总结

  Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳,经过PAGE分离的蛋白质样品,转移到固相载体上,固相载体以非共价键形式吸附蛋白质,且能保持电泳分离的类型及其生物学活性不变。以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原,与对应的抗体起免疫反应,再与或标记的第二抗体起反应,经过底物显色或放射自显影以检测电

常用的内参基因及其使用范围

内参即是内部参照,它们在各组织和细胞中的表达相对恒定,在检测基因的表达水平变化时常用它来做参照物 你可以去生物帮那里了解这方面的信息,那儿技术文档、视频资源丰富,我很喜欢到那里找想要的东西,而且还有很多软件可以下载,并且有软件的教材。有时间可以去看看。 包括GAPDH 、β- actin(BETA-

做RTPCR内参的作用是什么

你说的应该是real time PCR吧,注意RT其实是逆转录reverse transcription的缩写,和real time一定要分开来。常说的qPCR,qRT-PCR,都是通过实时(real time)的方法,测定样品中某个模版的起始量ct值但是呢,由于之前RNA提取、反转等步骤,各个步骤

做RTPCR内参的作用

你说的应该是real time PCR吧,注意RT其实是逆转录reverse transcription的缩写,和real time一定要分开来。常说的qPCR,qRT-PCR,都是通过实时(real time)的方法,测定样品中某个模版的起始量ct值但是呢,由于之前RNA提取、反转等步骤,各个步骤

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做RTPCR内参的作用是什么

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如何选择适合自己的激光粒度仪?

激光粒度仪是全球范围内公认的先进,快捷的颗粒测试仪器,国内国外有不少研制激光粒度仪的厂家,产品种类也比较繁多,如何才能选择一款适合自己的激光粒度仪呢?成都精新粉体测试设备有限公司,生产的激光粒度仪质量和重复性都受到广大客户的好评。一、了解自己的需求需要搞清楚的项目如下:  (一) 根据能够支配的款项

如何选择适合自己的激光粒度仪

  一, 了解自己的需求:     (1) 根据能够支配的款项有多少,确定选择对象是进口设备还是国产设备:一般进口设备的价格都在40万人民币以上。国内产品价格在几万元到十几万不等。    (2) 根据被测样品的性质如何,确定购买干法还是湿法粒度仪:激光粒度仪分散方式分为干法和湿法,如果能够找到适合的

如何选择适合自己的显微镜?

显微镜是人类20世纪最伟大的发明物之一。在它发明出来之前,人类关于周围世界的观念局限在用肉眼,或者靠手持透镜帮助肉眼所看到的东西。显微镜把一个全新的世界展现在人类的视野里,人们第一次看到了数以百计的“新的”微小动物和植物,以及从人体到植物纤维等各种东西的内部构造。显微镜还有助于科学家发现新物种,有助

如何选择适合的细胞增殖检测方法

细胞增殖检测的应用相当广泛,不论是测试药物试剂还是生长因子的效果,不论是评估细胞毒性还是分析细胞活性状态,您都可能会用到它。细胞增殖检测一般是检测分裂中的细胞数量或者细胞群体发生的变化。细胞增殖检测主要分为四类:DNA合成检测、代谢活性检测、细胞增殖相关抗原 检测和ATP浓度检测。在这些方法中作何选

如何选择适合自己的激光粒度仪?

前言,激光粒度仪是全球范围内公认的最先进,最快捷的颗粒测试仪器,国内国外有不少研制激光粒度仪的厂家,产品种类也比较繁多,如何才能选择一款适合自己的激光粒度仪呢? 一, 了解自己的需求:需要搞清楚的项目如下: (1) 根据能够支配的款项有多少,确定选择对象是进口设备还是国产设备:一般进口设备的价格都在

如何选择适合自己的激光粒度仪?

 激光粒度仪是、zui快捷的颗粒测试仪器。国内国外有不少研制激光粒度仪的厂家,且产品种类也比较繁多,如何才能选择一款适合自己的激光粒度仪呢?  了解需求,注意几方面  1.根据能够支配的款项有多少,确定选择对象是进口设备还是国产设备:一般进口设备的价格都在40万人民币以上。国内产品价格在几万元到十几

如何选择适合自己的离心机?

用户按使用场合、物料性质等因素选择合适的离心机,以达到预期的目的。选型时有以下三个须重视的问题:  1 、防腐性能  离心机所分离的物料一般都具有的腐蚀性,与物料接触部分的材质,须能够达到耐腐蚀的要求,以保证使用。  结构件材料种类(304、321、316L、钛板)、密封圈、密封垫材质,表面处理措施

如何选择适合自己的显微镜

 (1)显微镜按使用目镜的数目可分为单目、双目和三目显微镜,一般用户如果要求比较简单,而且只是想要个便宜一点的显微镜,那就选用单目显微镜,一般单目显微镜比较适用于小学生,中学生,还有一些小诊所使用,还有家长给孩子购买,用的比较多,价格比较实惠,一般成交价格在5百~8百左右。而双目显微镜的价格肯定比单

βTubulin抗体—做出漂亮WB和IHC图片的内参

Tubulin即微管蛋白,是细胞的一种骨架蛋白。Tubulin分为α、β、γ、δ、ε等多种tubulin,其中α-Tubulin和β-Tubulin可以形成异源二聚体,是形成微管的最主要的两种Tubulin。α-tubulin和β-tubulin分子量分别为55kDa和50kDa,其实际检测条带均在

在WB实验中为什么需要使用内参抗体?

在WB实验中为什么需要使用内参抗体?进口内参抗体——在WB实验中为什么需要使用内参抗体?     要检测一个基因的表达产物是否正确,或者比较表达产物量的相对变化,首选方法是Western Blot。虽然,顺利的时候Western Blot做起来很简单,可不顺的时候也很令人心烦――做不出结果啦、假阳性

通过2-△△CT-方法,利用实时定量PCR技术分析相对基...(二)

要使△△ C T 计算方法有效,目标序列和内参序列的扩增效率必须相等。看两个反应是否具有相同的扩增效率的方法是看他们模板浓度梯度稀释後扩增产物△ C T 如何变化。图 1 显示的是 cDNA 样品在 100 倍稀释范围内的实验结果。对于每一个稀释样本,都用 GAPDH 和 c-myc 特异的荧光

如何选择适合的人工气候箱?

如何选择自己需要的人工气候箱如果选择自己要的人工气候室 人工气候室从字面里可以看出人工模拟气候小环境,可模拟温度、湿度、光照、二氧化碳、氧气、降雨、降雪、打雷等自然现象,但真正模拟到跟自然界一起的状态是不是可能的。如光照,自然界中光是非常复杂,如太阳光谱能完全的模拟出太阳的光谱,我们只能做到可见光这

选择适合的超微粉碎机的窍门

  随着粉碎机行行业的发展,各类粉碎机层出不穷,大型的小型的,普通的超微的,国产的进口的,机械式的气流式的,可是无论粉碎机的种类怎样变化,做好自己的定位和明确自己选择机器的目的就能很好的帮您选择一款适合你自己的粉碎机,下面就是我们总结的选粉碎机尤其是超微粉碎机时候应该怎样选择:  (一) 您首先要考

选择适合的超微粉碎机的技巧

选择适合的超微粉碎机的技巧:  1、如您选择粉碎中药,风选中药粉碎机或中草药粉碎机组,其优点是对各种性质的中药均可粉碎,细度是同类中药粉碎机中的,强风自动冷却,机体长时间工作不易发热,粉碎从0.5公斤到上千公斤均可,小量粉碎选择WKX-160,中量粉碎选择WKX-230或200、300型中草药粉碎机

关于抗体的选择

对于国内的大多数实验室来讲,做western blot实验选择抗体是个头疼的问题。原因很简单,买进口抗体捉襟见肘,买国产抗体得需要大无畏的勇气。在我们实验室western blot实验历程里,我们用过进口抗体,进口抗体国内分装包装,国产抗体,质量良莠不齐。 进口抗体一般不会出现闪失:Abca

在WB实验中为什么需要使用内参抗体?

要检测一个基因的表达产物是否正确,或者比较表达产物量的相对变化,首选方法是Western Blot。虽然,顺利的时候Western Blot做起来很简单,可不顺的时候也很令人心烦――做不出结果啦、假阳性啦、结果出现多条带啦、到底是一抗有问题还是二抗有问题啦……毕竟,作为一种有活性的生物大分子

如何选择适合自己试验的离心机?

实验室离心机是利用旋转转头产生离心力,使悬浮液或乳浊液中不同密度、不同颗粒大小的物质分离开来的仪器,在多个行业中都有一定的应用。用户应该如何选用实验室离心机产品呢?下面我们就来具体介绍一下实验室离心机的选用方法。转速离心机根据最大转速的不同分为低速离心机(30000 rpm/min),每个离心机

如何选择适合自己的水质采样器?

  判断自己需要哪种采样器第一方面考虑的就是使用场景,比如说:户外水质自动监测站,户外小型站,监察执法使用,实验室使用,企业排污口使用,进水口使用等。  第二方面需要考虑的就是功能需求,比如常见的如:恒温冷藏,混合供样,人工取样口,硬质管路,混合双桶,自动排空混匀桶,润洗管路等等。  第三方面需要考