怎么选择适合的GAPDH内参抗体?
在Western Bloting实验中,在遇到总蛋白浓度测定不准确时候,或者蛋白质样品在电泳前上样时产生的样品间的操作存在误差;这些误差可以通过测定每个样品中实际转到膜上的内参,比如内参GAPDH的含量来进行校正。 GAPDH(甘油醛-3-磷酸脱氢酶)是参与糖酵解的一种关键酶,由4个30-40kDa的亚基组成,分子量146kDa,检测条带大约在36kDa。 GAPDH基因几乎在所有组织中都高水表达,广泛用作Western blot蛋白质标准化的内参。如何选择合适的GAPDH抗体?内参抗体虽然选择较多,但是也需要遵循一定的原则,并契合实际的应用要求。首先,我们需要考虑目的蛋白的大小,我们推荐内参要与检测的目的蛋白的分 子量最好相差5KD以上,因此你需要根据你目的检测蛋白的分子量来选择合适的内参,由于GAPDH的检测分子量大约在36kD,因此该内参抗体不是很适合用于检测30kD-40kD大小目标蛋白的W......阅读全文
怎么选择适合的GAPDH内参抗体?
在Western Bloting实验中,在遇到总蛋白浓度测定不准确时候,或者蛋白质样品在电泳前上样时产生的样品间的操作存在误差;这些误差可以通过测定每个样品中实际转到膜上的内参,比如内参GAPDH的含量来进行校正。 GAPDH(甘油醛-3-磷酸脱氢酶)是参与糖酵解的一种关键酶,由4个30-40kD
GAPDH抗体推荐—Abbkine高性价比GAPDH内参抗体的选择
在Western Bloting实验中,可能存在总蛋白浓度测定不准确,或者蛋白质样品在电泳前上样时产生的样品间的操作误差;这些误差可以通过测定每个样品中实际转到膜上的内参,比如内参GAPDH的含量来进行校正。GAPDH(甘油醛-3-磷酸脱氢酶)是参与糖酵解的一种关键酶,由4个30-40kDa的亚基组
GAPDH抗体|GAPDH抗体大全指导您购买合适的GAPDH抗体
GAPDH抗体大全——总有一款合适的GAPDH抗体在Western Bloting实验中,可能存在总蛋白浓度测定不准确,或者蛋白质样品在电泳前上样时产生的样品间的操作误差;这些误差可以通过测定每个样品中实际转到膜上的内参,比如内参GAPDH的含量来进行校正。当然除了GAPDH抗体,β-Actin抗体
植物内参抗体该怎么选?
先来说说为什么要用内参抗体?内参抗体的真的是必要的吗? 我举个例子,印度人和韩国人谁更富有?那还用说,当然是韩国人富有。 可是分明印度的GDP更高,为什么说韩国人更富有呢? 那怎样实现呢,如果我们能数一数细胞,不同的泳道上同样数量的细胞是最好的,可是这实现不了。这时候我们就需要一个大致能代
做定量pcr时内参GAPDH变化了,是不是要换个内参
可以换一个。其实很多药物影响糖代谢,会改变GAPDH。建议试试PPIA(肽基脯氨酸异构酶),它与蛋白质表达有关,含量比较稳定,除静息细胞外基本不变。
怎么选择流式抗体?
我们开始流式实验时,首先要选择抗体,必然要涉及到荧光的选择,尽量使这些荧光的补偿值降到zui低。 1,我们需要了解我们用的流式细胞仪的硬件设施(激光,滤光片) 2,选择合适的荧光染料,尽量利用到你的仪器上的所有激光,这样可以使这些荧光交叉可能性达到zui小。一般四种颜色或以下的比较好选,常用:FI
怎么选择流式抗体
我们开始流式实验时,首先要选择抗体,必然要涉及到荧光的选择,尽量使这些荧光的补偿值降到zui低。 1,我们需要了解我们用的流式细胞仪的硬件设施(激光,滤光片) 2,选择合适的荧光染料,尽量利用到你的仪器上的所有激光,这样可以使这些荧光交叉可能性达到zui小。一般四种颜色或以下的比较好选,常用:FI
怎么选择流式抗体?
我们开始流式实验时,首先要选择抗体,必然要涉及到荧光的选择,尽量使这些荧光的补偿值降到zui低。 1,我们需要了解我们用的流式细胞仪的硬件设施(激光,滤光片) 2,选择合适的荧光染料,尽量利用到你的仪器上的所有激光,这样可以使这些荧光交叉可能性达到zui小。一般四种颜色或以下的比较好选,常用:FI
常用内参抗体和标签抗体
Anti-β-Tubulin,Anti-β-Actin,Anti-GAPDH,Anti-GFP Tag,Anti-RFP Tag 等Epitope Biotech Inc. 公司定制生产高品质的对特定表位有特异性的小鼠单克隆抗体,与其他公司生产的同类产品相比,具有最高的灵敏度和最高的特异性,并且性价
WB检测中二抗的选择方法
WB检测之二抗二抗选择二抗是用一抗免疫动物制备的抗一抗的抗体,选择范围较窄,基本是商品化的,在不考虑二抗修饰类型的前提下,二抗的选择需要遵循以下原则:二抗来源种属、一抗来源种属和抗原来源种属互不相同。例如如果研究对象是人的蛋白X,选择了鼠抗X一抗,则可选择兔抗鼠二抗或者羊抗鼠二抗。二抗选择要考虑的问
WB检测中二抗的选择方法
WB检测之二抗 二抗选择 二抗是用一抗免疫动物制备的抗一抗的抗体,选择范围较窄,基本是商品化的,在不考虑二抗修饰类型的前提下,二抗的选择需要遵循以下原则:二抗来源种属、一抗来源种属和抗原来源种属互不相同。例如如果研究对象是人的蛋白X,选择了鼠抗X一抗,则可选择兔抗鼠二抗或者羊抗鼠二
氧含量分析仪怎么选择适合的
①顺磁:利用氧的顺磁性,适用于常量氧的在线监测,量程可以做到0~1%VOL,精度较氧化锆高,但是仪器比较娇贵,需要良好的预处理,怕酸,怕水,高温等;②氧化锆:适用于高温环境,如锅炉房,一般要大于600℃,低温不能工作,量程可以做到0~99%VOL;③电化学:一般用于微量氧,精度很高,但是怕高氧冲击,
怎么选择适合样品的水分测定仪呢
很多饲料工厂、食品供应商、塑料供应链等的人员,对于如何选择水分仪感到很迷茫。在日常生活中,如果我们想要测量水分,首先想到的就是湿度计,但湿度计和露点仪差不多,都是来测量车间、厂房、仓库、图书馆、办公室、微机房、实验室等环境温湿度的,所以就没法测量样品中的水分。那要怎样选择合适的水分测定仪?水分测定仪
Western-Blot中抗体的选择
Western Blot又称为蛋白质印迹,是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的基于抗体抗原之间特异免疫反应的一种定量或定性检测蛋白的实验方法。基本原理:聚丙烯酰胺凝胶电泳将不同分子量的蛋白质样品分离,分离后的蛋白被转移到固相支撑物(杂交膜)上,抗体特异性识别目标蛋白,通过酶促反应或者化学发光等
Western-Blot实验关键
Western Blot操作步骤多,每一步的失误都会造成全盘失败,综合而言,抗体仍然是决定成败的关键,如果抗体不好,就是神仙也没招。其中内参抗体很重要,因为内参抗体的选择关系到全盘实验的考评。Actin,Tubulin,GAPDH我们都用过,Actin,Tubulin的缺点是有时候会出现复带,比较稳
怎么选择一支适合自己的进口品牌移液器?
古语说得好:“工欲善其事,必先利其器。”移液器作为最常规的实验室仪器设备之一,对于实验室搞科研的工作者来说,就好比是作家手中的笔、雕刻家手中的刻刀,如果你用起来感觉不方便、不顺手,那么对于实验的效率性、准确性或多或少肯定会有不小的影响。因此,对于大部分的实验室工作者来说,选购一支移液器除了移液器本身
核内参PCNA抗体用于细胞核内参的PCNA单抗
增殖细胞核抗原(Proliferating Cell Nuclear Antigen简称PCNA)由Miyachi等于1978年在 SLE(系统性红斑狼疮)患者的血清中首次发现并命名,因其只存在于正常增殖细胞及肿瘤细胞内而得名。PCNA是一种分子量为36KD的蛋白质,在细胞核内合成,并存在于
进口内参抗体——在WB实验中为什么需要使用内参抗体?
要检测一个基因的表达产物是否正确,或者比较表达产物量的相对变化,首选方法是Western Blot。虽然,顺利的时候Western Blot做起来很简单,可不顺的时候也很令人心烦――做不出结果啦、假阳性啦、结果出现多条带啦、到底是一抗有问题还是二抗有问题啦……毕竟,作为一种有活性的生物大分子
进口内参抗体:在WB实验中为什么需要使用内参抗体?
要检测一个基因的表达产物是否正确,或者比较表达产物量的相对变化,首选方法是Western Blot。虽然,顺利的时候Western Blot做起来很简单,可不顺的时候也很令人心烦――做不出结果啦、假阳性啦、结果出现多条带啦、到底是一抗有问题还是二抗有问题啦……毕竟,作为一种有活性的生物大分子,抗
如何挑选合适的βActin内参抗体?
如何选择合适的β-Actin抗体? 现在市场上对于内参抗体选择是比较多,但是也需要遵循一定的原则,那怎么去找到适合自己实验的β-Actin抗体呢?首先,我们需要考虑目的蛋白的大小,我们推荐内参要与检测的目的蛋白的分子量最好相差5KD以上,因此你需要根据你目的检测蛋白的分子量来选择合适的内参,由于β-
线粒体内参抗体—克隆号为14Y2的COX-IV单克隆抗体
细胞色素c氧化酶(Cytochrome c oxidase,简称COX)是一种异源寡聚酶,通常含有13个亚基,定位于线粒体内膜,是线粒体呼吸链的酶复合物。细胞色素c氧化酶中形成催化中心的3个最大的亚基由线粒体DNA编码,其余10个亚基包括COX IV由细胞核内的基因组DNA编码。细胞色素
血清western-blot怎样选择内参
由于血浆或血清中很难找到一个稳定表达的蛋白,常见的在组织中比较常用的内参蛋白如肌动蛋白,GAPDH等,严格讲并不适合血浆或血清;可以考虑用立春红染色 或考染做loading control(这种方法在不少文献中都有报道,是大家认可的)Blood上有些文章 用的是立春红染色做control
关于PCR内参基因选择策略
关于内参基因的选择很多初级的实验人员很少会去思考这个问题,因为摆在面前的只有两种选择,β-actin和GAPDH,甚至在很多人长期的观念中对于内参的认知也仅仅停留在是一个表达量相对较高较稳定的看家基因,对于分子层面相对表达量的一个重要参照而已,至于为什么要选这两种,还有没有其他
关于PCR内参基因选择策略
关于内参基因的选择很多初级的实验人员很少会去思考这个问题,因为摆在面前的只有两种选择,β-actin和GAPDH,甚至在很多人长期的观念中对于内参的认知也仅仅停留在是一个表达量相对较高较稳定的看家基因,对于分子层面相对表达量的一个重要参照而已,至于为什么要选这两种,还有没有其他的内参,人们的回答往往
如何根据研究的样本类型和实验条件选择合适的内参基因?
根据研究的样本类型和实验条件选择合适的内参基因可以考虑以下几个方面:样本类型:肿瘤组织:某些肿瘤可能会改变一些常见内参基因的表达,例如在某些癌症中 GAPDH 的表达可能不稳定。此时可以考虑选择 β-actin 或 18S rRNA 等。血液样本:由于血液中细胞成分的复杂性,可能需要选择在不同血细胞
免疫印迹western实验中内参蛋白的选择和注意事项
免疫印迹western实验中内参基因的选择和注意事项 Western Blot实验常用于检测蛋白表达量、蛋白表达产物的正确性等。相对于其他检测蛋白的方法而言Western Blot实验在蛋白的定性定量分析、与目的蛋白量的比较方面更简单一些。 虽然,顺利的时候Western blot做
免疫印迹western实验中内参蛋白的选择和注意事项
Western Blot实验常用于检测蛋白表达量、蛋白表达产物的正确性等。相对于其他检测蛋白的方法而言Western Blot实验在蛋白的定性定量分析、与目的蛋白量的比较方面更简单一些。虽然,顺利的时候Western blot做起来很简单,可不顺的时候也很令人心烦――做不出结果啦、假阳性啦、
Western实验中内参基因的选择及使用方法
Western Blot实验常用于检测蛋白表达量、蛋白表达产物的正确性等。相对于其他检测蛋白的方法而言Western Blot实验在蛋白的定性定量分析、与目的蛋白量的比较方面更简单一些。虽然,顺利的时候Western blot做起来很简单,可不顺的时候也很令人心烦――做不出结果啦、假阳性啦、结果出现
怎么样选择适合自己的电热鼓风干燥箱?
怎么样选择适合自己的电热鼓风干燥箱在选电热鼓风干燥箱时,需要留意以下几点,仅供参照: 我企业电热恒温鼓风干燥箱分台式建构和立式建构两种:1、 电热鼓风干燥箱普通在高温时升温快,低温时升温慢,夏季升温快,冬季升温慢,可通过增大加热功率来添加升温效率。但干燥箱的加热功率增大,恒温时温过冲也会随之增大。2
Western实验中内参基因的选择及使用方法
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