NFκB(p65)/NFκB(p50)活性分析试剂盒原理及应用

NF-κB/Rel转录因子家族包含几种结构相关的蛋白(p65/p105,p52/p100,RelA(p65),c-Rel/ NF-κB)形成同源和/或异源二聚体。该转录因子家族成员调控超过150种目的基因,包括炎症细胞因子、趋化因子、免疫受体、细胞粘附分子等的表达。正因为如此,NF-κB被认为是“免疫应答的中心调节物”。作为二聚体,这些转录因子与DNA序列结合(这些结合位点被称为“κB位点”),从而调节目的基因的表达。在大多数细胞中,NF-κB/Rel转录复合物以未活化的形式存在于胞浆中,与抑制剂IκB结合。当细胞受到刺激后,一些列的磷酸化、泛素化反应导致IκB降解,NF-κB转录因子进入细胞核。由于NF-κB转录因子在人类炎症反应和其他疾病中的重要作用,吸引了越来越多研究者的目光,而细胞中NF-κB各亚基活性的检测是NF-κB研究中必不可少的一步!怎样安全、方便、有效的检测细胞中NF-κB各亚基活性呢?cayman C......阅读全文

NFκB(p65)/-NFκB(p50)活性分析试剂盒原理及应用

NF-κB/Rel转录因子家族包含几种结构相关的蛋白(p65/p105,p52/p100,RelA(p65),c-Rel/ NF-κB)形成同源和/或异源二聚体。该转录因子家族成员调控超过150种目的基因,包括炎症细胞因子、趋化因子、免疫受体、细胞粘附分子等的表达。正因为如此,NF-κB被认

大鼠核因子κB亚基p65亲和肽(NFκB-p65)酶联免疫分析

大鼠核因子-κB亚基p65亲和肽(NF-κB p65)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用       目的:本试剂盒用于测定大鼠血清,血浆及相关液体样本中核因子-κB亚基p65亲和肽(NF-κB p65)的含量。实验原理:   本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠核因子-κB亚基p65

人核因子κB亚基p65亲和肽(NFκB-p65)酶联分析检测ELISA...

人核因子-κB亚基p65亲和肽(NF-κB p65)酶联分析检测ELISA试剂盒使用说明使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本核因子-κB亚基p65亲和肽(NF-κB p65)含量。试验原理:NF-κB p65试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知NF-κB p65浓度

NFκB信号通路图

NF-kappaB是一个大家族,包括:RelA(p65)、c-Rel、RelB、NF-kappaB1 (p50/p105)、NF-kappaB2 (p52/p100)。其中以RelA(p65)研究最为深入。通常所说的是左边的经典途径,大致意思是这样:非激活状态下,RelA(p65)与一种名为Ikap

小鼠核因子қB(NFқB)酶联免疫分析

小鼠核因子қB(NF-қB)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用       目的:本试剂盒用于测定小鼠血清,血浆及相关液体样本中核因子қB(NF-қB)的含量。实验原理:   本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠核因子қB(NF-қB)水平。用纯化的小鼠核因子қB(NF-қB)抗体包被

简述NFκB抑制蛋白

  NF-κB二聚体的抑制蛋白家族(IκB)包含传统的IκB蛋白(IκBα,IκBβ,IκBε),NF-κB前体蛋白(p100,p105),以及核IκB(IκBζ , Bcl-3, and IκBNS)。  IκB通过其C末端特定的锚蛋白重复序列(ankyrin repeat–containing

NFκB信号通路介绍

NF-κB信号通路是由细胞外的刺激引起的。细胞外信号因子与细胞膜上的受体结合,开启了一连串下游的反应。受体蛋白接受刺激后先活化IκB激酶(IKK)。IKK将细胞内NF-κB·IκB复合物的IκB亚基调节位点的丝氨酸磷酸化,使得IκB亚基被泛素化修饰,进而被蛋白酶降解,从而释放NF-κB二聚体。自由的

人核因子κB(NFκB)ELISA试剂盒使用说明

实验原理:本试剂盒应用夹心法测定标本中人核因子κB(NF-κB)水平。用纯化的人核因子κB(NF-κB)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被受体的微孔中依次加入核因子κB(NF-κB),再与HRP标记的核因子κB(NF-κB)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

大鼠核转录因子κB(NFκB)ELISA试剂盒使用说明

本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定大鼠血清,血浆及相关液体样本中大鼠核转录因子-κB(NF-κB)的含量。实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠核转录因子-κB(NF-κB)水平。用纯化的大鼠核转录因子-κB(NF-κB)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中加入核转录因子

大鼠核转录因子κB(NFκB)ELISA试剂盒使用说明

本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定大鼠血清,血浆及相关液体样本中大鼠核转录因子-κB(NF-κB)的含量。实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠核转录因子-κB(NF-κB)水平。用纯化的大鼠核转录因子-κB(NF-κB)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中加入核转录因子

核因子κB家族基因介绍

NF-κB家族成员与逆转录病毒癌蛋白v-Rel有结构上的同源性,因此将他们归类为NF-κB/Rel蛋白。在哺乳动物中该家族有5种蛋白,分别为:RelA(p65),RelB,c-Rel,NF-κB1(p50)和NF-κB2(p52)。它们的N端有着高度保守Rel同源区(Rel homology reg

核因子κB家族的相关介绍

  NF-κB家族成员与逆转录病毒癌蛋白v-Rel有结构上的同源性,因此将他们归类为NF-κB/Rel蛋白。在哺乳动物中该家族有5种蛋白,分别为:RelA(p65),RelB,c-Rel,NF-κB1(p50)和NF-κB2(p52)。它们的N端有着高度保守Rel同源区(Rel homology r

NFκB信号通路调控基因介绍

NF-κB在调节细胞反应中是相当重要的,因为它属于"快速作用"的初级转录因子,不需要新的蛋白质合成就能被激活(有该特性的其他成员包括c-Jun,STAT和核激素受体)。NF-κB是对有害细胞刺激的第一反应者。已知的NF-κB通路激活因子有很多,包括:TNF-α、IL-1β、IL-2、IL-6、IL-

应用MD微孔板读板机和双报告系统检测NFκB活性(二)

方法细胞接种和转染HEK293细胞(80%融合度)用胰酶消化后分到96孔白板中,每孔15,000细胞。当细胞超过50% 融合度时,用NF- κB-RE 萤火虫荧光素酶和海肾对照组质粒对细胞进行共转染,其中使用三种不同比例FuGENE和DNA组合方式,转然后,细胞置于37°C培养箱中培养24h。

应用MD微孔板读板机和双报告系统检测NFκB活性(三)

荧光素酶检测设定试剂盒中的试剂使用前需在室温下孵育。向装有2 . 2 m g 冻干底物的小瓶中加入220μL水混匀后即为萤火虫酶底物。向装有440μg冻干底物的小瓶中加入220μL水混匀后即为水蛭素肠杆菌素。用萤火虫检测缓冲液按1:50比例稀释萤火虫酶底物后即为萤火虫工作液。用海肾荧光素酶缓冲液

应用MD微孔板读板机和双报告系统检测NFκB活性(一)

前言报告基因对于基因表达的研究来说是非常有用的工具,它可以代替要研究的目的基因,从而帮助我们了解目的基因的信号通路和相关的疾病。荧光素酶是最常用的报告基因,使用光度计和化学发光功能的微孔板读板机我们可以很容易的检测到荧光素酶,另一方面,由于在细胞实验中其背景较低,因此具有很高的灵敏度。我们通常用萤火

经典NFKB-p52信号通路简介

  最基本的NF-κB信号通路,包括受体和受体近端信号衔接蛋白, IκB激酶复合物, IκB蛋白和NF-κB二聚体。  当细胞受到各种胞内外刺激后,IκB激酶被激活,从而导致IκB蛋白磷酸化,泛素化,然后IκB蛋白被降解, NF-κB二聚体得到释放。然后NF-κB二聚体通过各种翻译后的修饰作用而被进

关于NFκB-DNA复合物的介绍

  NF-κB结合DNA的结构最早是在成熟B细胞免疫球蛋白κ-轻链基因的增强子上被发现,两个亚基形成的同源和/或异源二聚体与靶基因上10bp特定的序列(-κB 位点)结合调节基因转录,不同的NF-κB二聚体在选择结合序列时可能略有差异,这是NF-κB通过不同的二聚体的形式对不同基因的表达进行精细调节

NFκB信号通路相关基因介绍TNF基因

该基因编码一种多功能促炎细胞因子,属于肿瘤坏死因子(TNF)超家族。这种细胞因子主要由巨噬细胞分泌。它能与受体TNFRSF1A/TNFR1和TNFRSF1B/TNFBR结合并通过其发挥作用。这种细胞因子参与调节广泛的生物学过程,包括细胞增殖、分化、凋亡、脂质代谢和凝血。这种细胞因子与多种疾病有关,包

与--NFκB信号通路相关因子介绍ATM

ATM基因编码的蛋白属于PI3/PI4激酶家族,这种蛋白是一种重要的细胞周期检查点激酶,通过磷酸化调控下游一系列重要蛋白,包括抑癌蛋白p53和BRCA1、检查点激酶CHK2、检查点蛋白RAD17和RAD9以及DNA修复蛋白NBS1。ATM和与其密切相关的蛋白ATR被认为是在细胞周期调控以及DNA损伤

与--NFκB信号通路相关因子介绍REL

该基因编码一种属于rel同源域/免疫球蛋白样折叠、丛蛋白、转录因子(rhd/ipt)家族的蛋白质。这个家族的成员调节参与细胞凋亡、炎症、免疫反应和致癌过程的基因。这种原癌基因在B淋巴细胞的存活和增殖中起作用。这种基因的突变或扩增与B细胞淋巴瘤,包括霍奇金淋巴瘤有关。该基因的单核苷酸多态性与溃疡性结肠

与--NFκB信号通路相关因子介绍NFKBIA

该基因编码NF-Kappa-B抑制剂家族的一个成员,该家族包含多个Ankrin重复结构域。编码蛋白与rel二聚体相互作用,抑制参与炎症反应的nf-kappa-b/rel复合物。编码蛋白通过核定位信号和crm1介导的核输出在细胞质和细胞核之间移动。在外胚层发育不良伴T细胞免疫缺陷常染色体显性遗传病的无

NFκB信号通路相关基因介绍NFKBIA基因

该基因编码NF-Kappa-B抑制剂家族的一个成员,该家族包含多个Ankrin重复结构域。编码蛋白与rel二聚体相互作用,抑制参与炎症反应的nf-kappa-b/rel复合物。编码蛋白通过核定位信号和crm1介导的核输出在细胞质和细胞核之间移动。在外胚层发育不良伴T细胞免疫缺陷常染色体显性遗传病的无

NFκB信号通路相关基因介绍-FAS基因

这个基因编码的蛋白质是肿瘤坏死因子受体超家族的一员。这个受体包含一个死亡结构域。它在细胞程序性死亡的生理调节中起着重要作用,并与多种恶性肿瘤和免疫系统疾病的发病机制有关。这种受体与其配体的相互作用允许形成一种死亡诱导信号复合物,包括fas相关死亡结构域蛋白(fadd)、caspase 8和caspa

NFκB信号通路相关基因介绍ATM基因

ATM基因编码的蛋白属于PI3/PI4激酶家族,这种蛋白是一种重要的细胞周期检查点激酶,通过磷酸化调控下游一系列重要蛋白,包括抑癌蛋白p53和BRCA1、检查点激酶CHK2、检查点蛋白RAD17和RAD9以及DNA修复蛋白NBS1。ATM和与其密切相关的蛋白ATR被认为是在细胞周期调控以及DNA损伤

NFκB信号通路相关基因介绍-REL基因

该基因编码一种属于rel同源域/免疫球蛋白样折叠、丛蛋白、转录因子(rhd/ipt)家族的蛋白质。这个家族的成员调节参与细胞凋亡、炎症、免疫反应和致癌过程的基因。这种原癌基因在B淋巴细胞的存活和增殖中起作用。这种基因的突变或扩增与B细胞淋巴瘤,包括霍奇金淋巴瘤有关。该基因的单核苷酸多态性与溃疡性结肠

与--NFκB信号通路相关因子介绍FAS

这个基因编码的蛋白质是肿瘤坏死因子受体超家族的一员。这个受体包含一个死亡结构域。它在细胞程序性死亡的生理调节中起着重要作用,并与多种恶性肿瘤和免疫系统疾病的发病机制有关。这种受体与其配体的相互作用允许形成一种死亡诱导信号复合物,包括fas相关死亡结构域蛋白(fadd)、caspase 8和caspa

与--NFκB信号通路相关因子介绍TNF

该基因编码一种多功能促炎细胞因子,属于肿瘤坏死因子(TNF)超家族。这种细胞因子主要由巨噬细胞分泌。它能与受体TNFRSF1A/TNFR1和TNFRSF1B/TNFBR结合并通过其发挥作用。这种细胞因子参与调节广泛的生物学过程,包括细胞增殖、分化、凋亡、脂质代谢和凝血。这种细胞因子与多种疾病有关,包

怎样鉴定HEP3B细胞

目的探讨核转录因子(NF)-κB对肝细胞癌细胞Hep3B中COX-2表达的调控作用.方法以体外合成的NF-κB亚单位p50反义寡聚脱氧核苷酸(AS ODN)处理Hep3B细胞72 h,利用Western blot方法检测AS ODN处理的Hep3B细胞p50和COX-2蛋白表达水平.利用电泳凝胶迁移

NFκB二聚体的抑制蛋白家族

NF-κB二聚体的抑制蛋白家族(IκB)包含传统的IκB蛋白(IκBα,IκBβ,IκBε),NF-κB前体蛋白(p100,p105),以及核IκB(IκBζ , Bcl-3, and IκBNS)。IκB通过其C末端特定的锚蛋白重复序列(ankyrin repeat–containing doma