免疫细胞治疗DCCIK细胞的制备方法及SAFIRE功能性...(二)

IL-2 (白细胞介素-2)IL-2 最初发现时被称为T 细胞生长因子(T cell growth factor, TCGF),是引起T 细胞增殖最重要的细胞因子。IL-2 既是自分泌细胞因子,也是旁分泌细胞因子,其通过与T细胞表面的IL-2 受体(IL-2R)的特异性结合而促使T 细胞活化,并进入细胞分裂状态。此外,IL-2 还可刺激NK 细胞的生长并增强其杀伤能力。因此CIK 细胞培养中须添加IL-2,以促进T 细胞的增殖与活化。IFN-γ (干扰素-γ)IFN-γ 具有上调外周血淋巴细胞表面IL-2R表达的作用,因此会增强T细胞对IL-2促增殖反应的敏感度和强度。在诱导CIK细胞形成的过程中加入IFN- γ ,可降低IL-2的用量。研究发现,IFN-γ加入的顺序与CIK的细胞毒活性密切相关。先加入IFN- γ,培养24后再加入IL-2,可明显提高CIK的细胞毒活性。IL-1α(白细胞介素-1α)IL-1α也可以介导外周血淋......阅读全文

细胞膜的制备方法实验——从悬浮细胞中制备细胞膜

实验材料胶原酶试剂、试剂盒EDTAHBSS胶原酶溶液阳离子硅胶贮存液仪器、耗材离心机实验步骤一、用胶原酶/EDTA 释放细胞1. 用预保温溶液洗涤单层细胞并用胶原酶处理(1) 预保温溶液洗涤细胞。预保温溶液:5 mmol/L EDTA 钠盐溶于 HBSS,不含二价阳离子。(2) 在单层细胞上加 1%

流式细胞术的样品制备(七种样品的制备方法)(二)

四、外周血单个核细胞的制备1.取外周血2ml,肝素抗凝,用生理盐水将血稀释成4ml,混匀;2.将稀释后的血液沿试管壁徐徐加入4ml淋巴细胞分离液ficoll到液面之上,勿用力过大,以免造成血液与分离液混合,保持清晰地分层状态;3.离心2000r/min,30min,室温18~20℃,离心后可见试管内

细胞因子与实体瘤的免疫基因治疗(二)

许多细胞因子基因由于其抗肿瘤效应被评估用于临床前和临床的试验,一些比较常见的包括IL-2, IFN-α, β, γ, IL-12, IL-15, GM-CSF and TNF-α。基因导入方式主要有两种方式:1)直接注射基因治疗载体到肿瘤组织和其边缘(106);2)把在体外细胞因子基因修改过的自体的

影响组织炎症癌症转变及免疫治疗响应的免疫细胞

  2月12日,国际学术期刊Cell Reports(《细胞通讯》)在线发表了中国科学院上海营养与健康研究所隶属的计算生物学研究所(中国科学院-马普学会计算生物学伙伴研究所)韩敬东研究组的论文“Immune cell types and secreted factors contributing t

杂交瘤细胞免疫小鼠和脾细胞的制备介绍

  免疫小鼠:取 6~8 周龄 Balb/C 雌鼠,基础免疫 2 周,静脉再加强免疫一次,3~5 天后用于融合。  脾细胞制备:  1.引颈处死小鼠,用酒精消毒表体。  2.无菌条件下取出脾脏,剃除结缔组织和脂肪,用 5ml 无血清培养液冲洗一次。  3.把脾脏置于已消毒的 90~100 目不锈钢网

感受态细胞制备原理及方法

摘要: 目前,感受态细胞的制备常用冰预冷的CaCl2处理细菌的方法制备,即用低渗CaCl2溶液在低温(0℃)时处理快速生长的细菌,从而获得感受态细菌.本方法的关键是选用的细菌必须处于对数生长期,实验操作必须在低温下进行. 原理:

感受态细胞制备原理及方法

理: 目前,感受态细胞的制备常用冰预冷的CaCl2处理细菌的方法制备,即用低渗CaCl2溶液在低温(0℃)时处理快速生长的细菌,从而获得感受态细菌。此时细菌膨胀成球形,外源DNA分子在此条件下易形成抗DNA酶的羟基-钙磷酸复合物粘附在细菌表面,通过热激作用促进细胞对DNA的吸收。转化效率可达106-

功能性死细胞

  人们总会认为在植物生命体中,活细胞是植物生命体中的主角,而死细胞却始终扮演终结者的角色不被人们所重视。孰不知,在植物体中有着许许多多不同类型的死细胞,它们各自执行着特有的生理功能,以维持植物的生命活动。  管胞和导管分子  在成熟的维管组织中,木质部中具有长管状死细胞—— 管胞和导管分子,它们都

清华大学专家:魏则西之死背后的免疫疗法

  最近两天,西安电子科技大学大学生魏则西之死引发滔滔舆论。这位21岁的滑膜肉瘤患者经历了漫长痛苦的放疗和化疗后,于2016年4月12日安静辞世。  滑膜肉瘤是一种恶性肿瘤,转移性强,目前难以治疗。魏则西生前在传统的治疗手段无望的时候,通过百度搜索找到武警北京总队第二医院,接受一种号称为“最先进技术

将B细胞重编程为功能性T淋巴细胞研究(二)

Hoxb5诱导的T细胞在功能上等同于野生型T细胞好了,我们已经确定了Hoxb5确实在B细胞向T细胞转化的过程中起关键的作用,那么我们得到再生的T细胞是否是有功能的呢?带着这一问题,我们看看科研人员又做了哪些工作?为了评估成熟再生的T细胞(iT)的功能,研究者将retro-Hoxb5 pro-pr

免疫细胞的检测方法

用体外或体内试验对机体的各种参与免疫应答的细胞进行鉴定、计数和功能测定,藉以了解机体的免疫状态,并对某些临床疾病的诊断,预后及疗效观察等也具有一定意义。 一、免疫细胞的分离 体外测定免疫细胞首先要从外周血或淋巴组织中分离所需的细胞。其主要方法是根据细胞的表面标记、理化

免疫细胞的检测方法

用体外或体内试验对机体的各种参与免疫应答的细胞进行鉴定、计数和功能测定,藉以了解机体的免疫状态,并对某些临床疾病的诊断,预后及疗效观察等也具有一定意义。一、免疫细胞的分离体外测定免疫细胞首先要从外周血或淋巴组织中分离所需的细胞。其主要方法是根据细胞的表面标记、理化性状及功能等方面的差别进行设计。

新一代癌症细胞免疫治疗技术:nkt细胞免疫治疗

  NKT细胞免疫疗法  基于NKT的新一代癌症细胞免疫治疗技术  研究人员发现免疫细胞可用于癌症治疗的历史已有40多年,但基于癌症的复杂性,目前还没有发现可以治疗它的普遍规律。国内目前广泛使用的“免疫疗法”(主要是 CIK -DC 细胞疗法)具有靶向不明和免疫系统抑制等缺点。  2005年,清华细

肺癌放疗的并发症

  肺癌放疗和生物治疗、据统计在非小细胞肺癌的临床诊断中、仅20%的病例能进行根治性手术切除、且在实行手术切除的病例中其5年生存率仅为30%—40%。因此为提高肺癌患者的局部局部控制率和生存率、术后的放疗被得到了广泛的应用。但是随着医学的发展、人们对术后放疗的作用有了新的认识。  肺癌放疗和生物治疗

肺癌放疗的概述

  肺癌放疗和生物治疗、据统计在非小细胞肺癌的临床诊断中、仅20%的病例能进行根治性手术切除、且在实行手术切除的病例中其5年生存率仅为30%—40%。因此为提高肺癌患者的局部局部控制率和生存率、术后的放疗被得到了广泛的应用。但是随着医学的发展、人们对术后放疗的作用有了新的认识。  肺癌放疗和生物治疗

免疫细胞杀伤经典案例(二)

除了传统T细胞杀伤外,DELFIA细胞毒法还可以被用于检测靶向T细胞的新型免疫治疗分子,如双特异抗体(BiTE)等的细胞杀伤功能[6]。四,NK细胞杀伤 鉴于NK细胞在天然免疫系统的重要性,其活力检测也是免疫检查点抑制剂研发过程中的核心项目。此外,NK细胞活力检测还可以用于衡量用于免疫疗法开发的新型

细胞免疫细胞免疫

  几乎所有的细胞表面都有MHC-I,CD8+T细胞能识别细胞表面的MHCI+抗原复合物,识别后进行攻击。  根据功能不同T细胞可分为三类,其表面均有相应的受体,具有抗原特异性:细胞毒性T细胞(Cytotoxic T cells,Tc)、辅助性T细胞(helper T cells,TH)、抑制性T细

免疫细胞的免疫细胞种类

T淋巴细胞即胸腺依赖淋巴细胞(thymus dependent lymphocyte)。亦可简称T细胞。来源于骨髓的多能干细胞(胚胎期则来源于卵黄囊和肝)。目前认为,在人体胚胎期和初生期,骨髓中的一部分多能干细胞或前T细胞迁移到胸腺内,在胸腺激素的诱导下分化成熟,成为具有免疫活性的T细胞。成熟的T细

间接凝集实验及致敏红细胞制备方法

将可溶性抗原吸附于一种与免疫无关的颗粒载体上,然后与相应的抗体结合,也可出现颗粒载体的凝集现象,称为间接凝集反应。间接凝集反应比直接凝集反应敏感性为高,可用于微量抗体或抗原的检查。一、 间接血球凝集实验间接血球凝集实验是根据红血球表面的吸附作用而建立起来的。将细菌可溶性抗原提出使之吸附于红血球表面,

免疫细胞治疗实体瘤取得进展!免疫细胞存储有必要吗?

近年来,最火的癌症治疗的方法,CAR-T免疫细胞疗法绝对是关注焦点。免疫细胞治疗的临床研究在全球如火如荼的开展,随着免疫疗法被大众所认识,免疫细胞的作用受到重视,那么免疫细胞存储有必要吗?近日,美国食品药品监督管理局(FDA)批准了一款针对广泛期小细胞肺癌的CAR-T免疫细胞治疗的新药临床试验申请。

红细胞保养液的制备方法

阿氏液(Alsever):即红细胞保养液枸橼酸钠(5H2O) 0.80g枸橼酸(H2O) 0.055g葡萄糖 2.05g氯化钠 0.42g双蒸水 加至 100 ml将以上试剂加热溶解于双蒸水中,调整pH至6.8,115℃灭菌10min,4℃保存备用。2. 0.5% 鸡红细胞制备方法先用灭菌注射器吸取

细胞膜的制备方法实验

从悬浮细胞中制备细胞膜从组织培养皿中的汇合或部分汇合细胞中分离顶层膜、基底膜或中间膜从生长于微载体上的细胞中分离细胞膜实验材料胶原酶                                                          试剂、试剂盒EDTA                

细胞膜的制备方法实验

从悬浮细胞中制备细胞膜 从组织培养皿中的汇合或部分汇合细胞中分离顶层膜、基底膜或中间膜 从生长于微载体上的细胞中分离细胞膜             实验材料

生物功能性外泌体制备方案(二)

近年来随着分离纯化技术的提高,关于外泌小体的研究成果颇丰;这进一步吸引了越来越多领域的课题将外泌体纳入研究对象。研究的前提是方便、高效、标准化地分离纯化外泌小体。经过近20年的探索,已经建立了超速离心法、沉淀法、色谱法、亲和纯化法等。 1经典超速离心法制备外泌体  超速离心法是制备外泌体的金标方法,

曹雪涛:细胞免疫治疗和干细胞治疗亟待规范

   “干细胞与再生医学、细胞免疫治疗与体细胞治疗、基因编辑与基因治疗等,为人类疾病救治与健康促进带来了革命性进步。对于这些生物医学前沿热点与高新技术,除了加大科技投入进行战略布局之外,相关监管科学体系建设也要及时跟上,以保障新型治疗手段及药物应用与评价,推动我国相关产业有序发展和新业态形成。”3月

免疫细胞的组成及种类

  组成  免疫器官  类型:扁桃体、淋巴结、胸腺、脾、骨髓等。  功能:免疫细胞生成、成熟、或集中分布的场所。  免疫细胞  吞噬细胞:①与体液中的杀菌物质构成人体的第二道防线,参与非特异性免疫。  ②摄取和处理抗原,参与细胞免疫和体液免疫。  淋巴细胞:①T细胞  ②B细胞  免疫活性物质  抗

细胞免疫的机制及过程

  几乎所有的细胞表面都有MHC-I,CD8+T细胞能识别细胞表面的MHCI+抗原复合物,识别后进行攻击。  根据功能不同T细胞可分为三类,其表面均有相应的受体,具有抗原特异性:细胞毒性T细胞(Cytotoxic T cells,Tc)、辅助性T细胞(helper T cells,TH)、抑制性T细

细胞治疗中的细胞计数国际标准(二)

实验设计(DOE)在优化细胞计数流程中的应用一旦细胞计数的目的和大致方法已经确定,建议使用“实验设计(Design of Experiments ,DOE)来进行方法优化和稳健性测试。专家指出很多因素影响了细胞计数实验。这些因素包括准备细胞样品时使用的稀释液。稀释液可能影响样品的稳定性,引入或者减少

关于杂交瘤细胞饲细胞的制备方法介绍

  小鼠腹腔细胞制备方法:  1.引颈处死小鼠,用酒精消毒表体。  2.切开腹部皮肤剥向两侧,暴露出腹壁。  3.用无菌 7 号针头注射器,吸取 3ml 无血清培养液。  4.用小镊夹起腹壁,注入 3ml 无血清培养液,用手反复轻轻揉腹壁,再反复抽吸 3~5 次。  5.收集末次吸得的细胞,注入 5

活细胞免疫荧光技术-流式细胞仪标本的制备

实验方法原理活细胞表面保留有较完整的抗原或受体,先用特异性鼠源性单克隆抗体与细胞表面相应抗原结合,再用荧光标记的第二抗体结合,根据所测定的荧光强度和阳性百分率即可知相应抗原的密度和分布。实验材料抗体血清试剂、试剂盒RPMI1640DPBS洗涤液固定液仪器、耗材玻璃管塑料管离心机显微镜实验步骤1.