免疫细胞治疗DCCIK细胞的制备方法及SAFIRE功能性...(二)
IL-2 (白细胞介素-2)IL-2 最初发现时被称为T 细胞生长因子(T cell growth factor, TCGF),是引起T 细胞增殖最重要的细胞因子。IL-2 既是自分泌细胞因子,也是旁分泌细胞因子,其通过与T细胞表面的IL-2 受体(IL-2R)的特异性结合而促使T 细胞活化,并进入细胞分裂状态。此外,IL-2 还可刺激NK 细胞的生长并增强其杀伤能力。因此CIK 细胞培养中须添加IL-2,以促进T 细胞的增殖与活化。IFN-γ (干扰素-γ)IFN-γ 具有上调外周血淋巴细胞表面IL-2R表达的作用,因此会增强T细胞对IL-2促增殖反应的敏感度和强度。在诱导CIK细胞形成的过程中加入IFN- γ ,可降低IL-2的用量。研究发现,IFN-γ加入的顺序与CIK的细胞毒活性密切相关。先加入IFN- γ,培养24后再加入IL-2,可明显提高CIK的细胞毒活性。IL-1α(白细胞介素-1α)IL-1α也可以介导外周血淋......阅读全文
免疫细胞治疗DCCIK细胞的制备方法及SAFIRE功能性...(二)
IL-2 (白细胞介素-2)IL-2 最初发现时被称为T 细胞生长因子(T cell growth factor, TCGF),是引起T 细胞增殖最重要的细胞因子。IL-2 既是自分泌细胞因子,也是旁分泌细胞因子,其通过与T细胞表面的IL-2 受体(IL-2R)的特异性结合而促使T 细胞活化,并进入
免疫细胞治疗DCCIK细胞的制备方法及SAFIRE功能性...(一)
免疫细胞治疗DC-CIK细胞的制备方法及SAFIRE功能性人CD3单抗摘要SAFIRE是“不含叠氮钠,极低内毒素 Sodium Azide Free Immensely Reduced Endotoxin”的简称。生产中不添加任何载体,内毒素水平低至0.01EU/ug以下,更加适用于体内及体外的功能
DCCIK细胞制备方法(二)
1.外周血单个核细胞的采集 1.1 用血细胞分离机采集患者自身的外周血单个核细胞80 - 100ml; 1.2 淋巴细胞分离液密度梯度离心法进一步纯化单个核细胞(PBMC); 1.3 无血清培养液洗涤2次,获得纯度在90%以上的PBMC,细胞数量需达到1-3 x 108。2.(可选步骤)肿
DCCIK细胞制备方法(一)
CIK是“Cytokine-Induced Killer Cells”的缩写,中文全称为“细胞因子诱导的杀伤细胞”。 CIK是单个核细胞在CD3单抗和多种细胞因子(包括IFN-γ、IL-2等)的作用下培养获得的一群以CD3+CD56+细胞为主要效应细胞的异质细胞群, 其既具有T淋巴
DCCIK细胞制备方法(三)
5.0 DC-CIK细胞的制备和质检 5.1 收集步骤4和步骤3中所获得的DC 细胞和CIK 细胞,按1:10(数目比)的比例共培养,无血清培养液中添加重组人IL-2 (300 U/ml); 5.2 每3天半量换液一次,并补加重组人IL-2 (300U/ml)。 5.3 在第7d 收集细胞
DCCIK的制备方法(二)
2.CIK 培养用细胞因子和抗体:CD3 激发型单抗:T 细胞活化的第一信号来自于 T 细胞表面的受体,即 T 细胞抗原受体 (T cell antigen receptor, TCR) 与 APC 提呈的抗原的特异性结合,也就是 T 细胞对抗原的特异性识别。 TCR 是由 2 条不同肽链
DCCIK生物细胞治疗
DC-CIK生物细胞治疗这“第四大”晚期胰腺癌的正确治疗方法,已经在临床上得到了很好的应用,在各种肿瘤的治疗上取得了突破性进展。DC-CIK生物细胞技术可以有效的应用在胃癌患者的治疗当中,临床均取得了不错的治疗效果,DC-CIK生物细胞治疗可以直接杀伤肿瘤细胞,防复发和转移,提高自身免疫力,提高
CIK/DCCIK及其在细胞治疗上的应用(二)
【细胞制备】 1.外周血单个核细胞的采集 1.1 用血细胞分离机采集患者自身的外周血单个核细胞50-100mL; 1.2 淋巴细胞分离液密度梯度离心法进一步纯化单个核细胞(PBMC); 1.3 无血清培养液洗涤2次,获得纯度在90%以上的PBMC。 2.CIK细胞的培养及鉴定 2.1 将PBMC按1
DCCIK的制备方法(三)
2. (可选步骤) 肿瘤抗原的制备用于负载 DC 的肿瘤抗原可以是肿瘤特异性抗原肽 (Tumor-Specific Antigens, TSA)或肿瘤相关抗原 (Tumor-αssociated Antigens, TAA),也可以是肿瘤全细胞抗原。用 TSA 或 TAA 负载的 DC 具
DCCIK的制备方法(一)
【背景】CIK 是「Cytokine-Induced Killer Cells」的缩写,中文全称为「细胞因子诱导的杀伤细胞」。 CIK 是单个核细胞在 CD3 单抗和多种细胞因子 (包括 IFN-γ, IL-2 等) 的作用下培养获得的一群以 CD3+CD56+细胞为主要效应细胞的异质细胞群
DCCIK的制备方法(四)
4. DC 细胞的培养及鉴定4.1 步骤 3.2 中剩下的贴壁细胞 (主要是 CD14+的单核细胞),加入含重组人 GM-CSF500-1,000U/ml 和重组人 IL-4 500U/ml 的无血清培养液,37℃,5%CO2 培养箱中 培养,诱导单核细胞向 DC 细胞分化。4.2 每 3d 半量换
DCCIK的制备方法(五)
【步骤简图】【推荐试剂】生产商产品名称产品编号产品规格使用浓度PeproTech重组人 GM-CSF (Animal Free)AF-300-0320ug/50ug/100ug/250ug/500ug1mg50-100ng/mlPeproTech重组人 IFN-g (Animal Free)AF-3
DC(树突状细胞)的制备方法(二)
【注意事项】1.DC 的来源:DC有多种来源,包括外周血单核细胞(Monocyte)、脐带血 CD34+细胞、骨髓和胎 肝等,但因外周血单核细胞最容易获取、数量也最多,所以临床上被广泛用作 DC 的来源细胞。2.DC 的成熟度:我们知道,DC 有未成熟和成熟两种状态,即 iDC 和 mDC,而 DC
CIK/DCCIK及其在细胞治疗上的应用(六)
四、ACTL 全称“ AAV-DC-CTL靶向性抗肿瘤细胞免疫技术”,简称“ACTL™”或“ACTL技术”或“ACTL肿瘤细胞靶向治疗”。 "ACTL™ Anti-Cancer Cellular Immunotherapy"1. ACTL技术背景 2011年10月3日,加拿大科学家、美国医学会和美国
CIK/DCCIK及其在细胞治疗上的应用(五)
5. 高效CIK血样本采集注意事项 (一)采血前,患者可以饮温开水、低脂清淡饮食; (二)采血前,不可以进行任何输液治疗; (三)采血前1天,患者不可以进行可能损伤、破坏淋巴细胞的治疗和检查项目,如放疗、化疗、核医学检查等; (四)连续两个疗程治疗时,取血和回输细胞在时间上会有交叉,取血必须在细胞回
CIK/DCCIK及其在细胞治疗上的应用(四)
一、高效CIK 高效CIK(High-efficiency cytokine-induced killer),即高效细胞因子诱导的杀伤细胞,是治疗肿瘤和慢性传染性病毒感染的细胞免疫治疗方法之一。其技术是从患者自体外周血(20~100ml)中分离单个核细胞,经过体外刺激扩增培养,使在生理条
CIK/DCCIK及其在细胞治疗上的应用(一)
【背景知识】 CIK是“Cytokine-Induced Killer Cells”的缩写,中文全称为“细胞因子诱导的杀伤细胞”。 CIK是单个核细胞在CD3单抗和多种细胞因子(包括IFN-γ,IL-2等)的作用下培养获得的一群以CD3+CD56+细胞为主要效应细胞的异质细胞群,其既具有T淋巴细胞
CIK/DCCIK及其在细胞治疗上的应用(三)
【培养原理】 1.DC培养用细胞因子: 1.1 GM-CSF(粒细胞/巨噬细胞集落刺激因子) GM-CSF是一种造血生长因子,在体外可刺激中性粒细胞和巨噬细胞的集落形成,并具有促进早期红巨核细胞、嗜酸性祖细胞增殖和发育的功能。 GM-CSF是最早被鉴定出来对于DC有作用的细胞因子之一。GM-CSF在
细胞制备流程及转化方法
细胞制备流程及转化方法1. 转移0.2-1ml培养物至装有500ml LB(或其他营养丰富的培养基)的1-2升摇瓶2. 37°C下剧烈振荡培养2-6小时3. 定时监控OD600值(培养1小时后每半小时测定一次)4。 当OD600值达到0.5-1.0时,从摇床中取出摇瓶,置于冰上冷却至少15分钟(需要
免疫治疗癌细胞的方法介绍
患癌症的病人,体内免疫功能往往低下才造成了癌症发生、发展以至扩散。 免疫疗法的目的就是通过各种手段来提高机体免疫功能,从而达到遏制癌的生长或扩散的目的。提高免疫力的制剂称为免疫增强剂,其中有我们熟悉的卡介苗,还有转移因子、干扰素、免疫核糖核酸等。免疫疗法副作用小,但难以达到根治癌症的目的。
细胞免疫治疗及CIK生物治疗介绍
一、细胞免疫治疗的简介细胞免疫治细胞免疫治疗疗法是采集人体自身免疫细胞,经过体外培养,使其数量成千倍增多,靶向性杀伤功能增强,然后再回输到人体来杀灭血液及组织中的病原体、癌细胞、突变的细胞,打破免疫耐受,激活和增强机体的免疫能力,兼顾治疗和保健的双重功效。细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)疗法、树突状
细胞免疫治疗及CIK生物治疗介绍
一、细胞免疫治疗的简介 细胞免疫治细胞免疫治疗疗法是采集人体自身免疫细胞,经过体外培养,使其数量成千倍增多,靶向性杀伤功能增强,然后再回输到人体来杀灭血液及组织中的病原体、癌细胞、突变的细胞,打破免疫耐受,激活和增强机体的免疫能力,兼顾治疗和保健的双重功效。细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)
NKT细胞免疫疗法,NKT细胞治疗,NKT细胞免疫治疗,这是啥?
NKT细胞免疫疗法,NKT细胞治疗,NKT细胞免疫治疗 关于细胞免疫治疗,大家现在都有了相关的认知,特别是对癌症的控制,大家都对这种疗法抱有很大的希望,但是免疫治疗是一件非常复杂的事情,在免疫治疗实施过程中牵扯到各种各样的法规,2016年的魏则西事件之后,对这个行业冲击很大,国家也在出台新的政
免疫细胞凋亡(二)
(二)T细胞 1.胸腺细胞的发凋亡 淋巴干细胞通过血流进入胸腺,在胸腺中的发育成熟过程中要发生基因的重排和分化,同时,胸腺细胞要经历严格的选择过程,只有那些对自身MHC分子亲和力较高的细胞克隆才被允许发育为CD4+和CD8+双阳性细胞(阳性选择)。其中那些对自身抗原和力较高的胸腺细胞必须清除
免疫血清制备方法(二)
五、结果鉴定 以双相琼脂扩散试验测定所获免疫血清的抗体效价,并用琼指免疫电泳鉴定免疫血清中抗体的质量,应产生单一的沉淀弧线。鉴定方法的具体步骤参见有关部分。 六、材料 (一) 动物:健康成年家兔,雄性,体重2~3公斤。 (二) 器材:剪刀、镊子、注射器(2ml、50ml)附针头(9号、6号)、称量瓶
细胞化学基础二磷酸腺苷制备方法
由5′-腺苷酸为原料制取。
细胞性免疫原的制备
细胞性免疫原主要是指人、动物、微生物或寄生虫的细胞。 一、绵羊红细胞的制备 绵羊红细胞是制备溶血素的免疫原,制备时采健康绵羊的颈静脉血,立即注入无菌有玻璃珠的三角瓶内,经充分摇动15~20min,以去除纤维蛋白,获得抗凝绵羊全血。另外,也可将全血和Alsever液以1:2混合,Alsever液既能起
iPS细胞的制备方法
最初由山中伸弥团队发现的iPS细胞制备(诱导)方法是以通过慢病毒载体转入数个转录因子为核心,在导入四种转录因子后,小鼠的成纤维细胞经过一定时间就会转变为状态类似于胚胎干细胞的iPS细胞。使用这种方法制备iPS细胞,首先需要一个特殊的转基因小鼠品系。这种转基因小鼠的Fbx15基因下游转入了一个βgeo
NK细胞免疫疗法—肿瘤治疗新方向(二)
利用免疫检查点抑制剂来增强 NK 细胞的杀伤能力并应用于治疗也是目前研究的方向之一。某些激活的NK细胞表达PD-1,且 PD-1 信号介导抑制 NK 细胞发挥细胞毒作用。实验证实PD-1单抗(CT-011)增强 NK 细胞对多发性骨髓瘤患者自体骨髓瘤细胞的杀伤能力[6];NK细胞与MHC-I
细胞治疗临床招募-有望打破肝细胞癌免疫细胞治疗空白
日前,国内细胞治疗领域启动最大规模临床招募,这将有望打破肝细胞癌免疫细胞治疗空白,为肝细胞癌患者带来福音。 日前,针对国内细胞治疗领域最大规模临床招募的研究发布会——免疫细胞治疗用于防止肝癌根治术后复发的临床试验研究发布会在解放军总医院召开。“肿瘤免疫治疗是利用人体自身的免疫系统对抗肿瘤,清除