细胞膜的制备方法实验——从悬浮细胞中制备细胞膜
实验材料胶原酶试剂、试剂盒EDTAHBSS胶原酶溶液阳离子硅胶贮存液仪器、耗材离心机实验步骤一、用胶原酶/EDTA 释放细胞1. 用预保温溶液洗涤单层细胞并用胶原酶处理(1) 预保温溶液洗涤细胞。预保温溶液:5 mmol/L EDTA 钠盐溶于 HBSS,不含二价阳离子。(2) 在单层细胞上加 1% 的胶原酶溶液,在 37℃ 保温 30 分钟,偶尔摇动。1% 胶原酶:IV 型胶原酶(Sigma ) 溶解在含 1 mmol/L CaCl2 的 1% 的 BSA/HBSS 溶液中,含 Mg2+,配成 1% 的胶原酶溶液。溶液经过滤除菌并保存在 -20℃ 直到使用,避免反复冻融。(3) 加 1 mol/L EDTA 钠盐(pH 8)。使终浓度为 5~10 mmol/L。保温到细胞变圆,通常需要 30 分钟。(4) 用临床台式离心机 250 g 温和离心 2~3 分钟以收集细胞。室温也可以接受,但最好在 4℃ 进行。开始分离细......阅读全文
细胞膜的制备方法实验——从悬浮细胞中制备细胞膜
实验材料胶原酶试剂、试剂盒EDTAHBSS胶原酶溶液阳离子硅胶贮存液仪器、耗材离心机实验步骤一、用胶原酶/EDTA 释放细胞1. 用预保温溶液洗涤单层细胞并用胶原酶处理(1) 预保温溶液洗涤细胞。预保温溶液:5 mmol/L EDTA 钠盐溶于 HBSS,不含二价阳离子。(2) 在单层细胞上加 1%
细胞膜的制备方法实验
从悬浮细胞中制备细胞膜从组织培养皿中的汇合或部分汇合细胞中分离顶层膜、基底膜或中间膜从生长于微载体上的细胞中分离细胞膜实验材料胶原酶 试剂、试剂盒EDTA
细胞膜的制备方法实验
从悬浮细胞中制备细胞膜 从组织培养皿中的汇合或部分汇合细胞中分离顶层膜、基底膜或中间膜 从生长于微载体上的细胞中分离细胞膜 实验材料
细胞膜的制备方法_从生长于微载体上细胞中分离细胞膜
实验材料细胞试剂、试剂盒CB仪器、耗材微型离心机临床台式离心机超离心机吊桶式转头离心管振荡器尼龙单丝网探头超声仪实验步骤1. 准备下列仪器:微型离心机临床台式离心机超离心机吊桶式转头和合适的离心管振荡器尼龙单丝网,孔径约 50 μm探头超声仪2. 将微载体培养物转移到 50 ml 的锥形离心管中。3
杆状病毒储液制备实验——从悬浮培养中制备
实验材料悬浮培养的 Sf 9 细胞待接种的杆状病毒(野生型的或重组)试剂、试剂盒含10%胎牛血清的昆虫细胞培养液 TNM-FH仪器、耗材150 mm 培养瓶27℃ 培养箱倒置显微镜带有 GH-3.7 水平转子的4℃GPR离心机带螺口盖的冻存管液氮罐500 ml 旋转细胞培养瓶多转瓶的揽拌台实验步骤1
细胞膜的制备方法实验——分离顶层膜、基底膜或中间膜
从组织培养皿中的汇合或部分汇合细胞中分离顶层膜、基底膜或中间膜试剂、试剂盒包被缓冲液PAA裂解缓冲液Nyoodenz仪器、耗材阳离子硅胶微型离心机临床台式离心机超离心机吊桶式转头离心管实验步骤1. 制备下列溶液:(1) 包被缓冲液(CB)20 mmol/L MES135 mmol/L NaCI0.5
从肝脏组织中制备细胞核实验
实验材料大鼠试剂、试剂盒裂解缓冲液浓蔗糖溶液仪器、耗材超速离心机组织研磨器实验步骤1. 配制裂解缓冲液和浓蔗糖溶液(PMSF 在使用前添加),冰上放置。裂解缓冲液:0.25 mol/L 蔗糖网织红细胞标准缓冲液(RSB)0.25 mol/L 蔗糖(超级纯)10 mmol/ Tris-HCl (pH7
从肝脏组织中制备细胞核实验
实验材料 大鼠 试剂、试剂盒 裂解缓冲液 浓蔗糖溶液
细胞膜的细胞膜结构的研究进程
19世纪中叶K.W.Mageli发现细胞表面有阻碍染料进入的现象,提示膜结构的存在;1899年E.Overton发现脂溶性大的物质易入胞,推想应为脂类屏障。1925年荷兰人E.Gorter和F.Grendel用丙酮抽提红细胞膜结构,计算出红细胞膜平铺面积约为其表面积的两倍,提出脂质双分子层模型.
细胞膜糖类电镜显示实验
实验方法原理 细胞膜糖类包括糖蛋白和糖脂,其显示技术较常用的是凝集素细胞化学技术,此外,还有钌红染色法等。钌红染色法的原理是钌红可以与羧基(酸性基)通过静电结合,电镜下呈电子密度高染色。实验材料 组织样品试剂、试剂盒 钌红原液戊二醛 二甲胂酸钠缓冲液锇酸实验步骤 1. 钌红原液配制钌红溶于双蒸水,浓
从组织培养细胞中制备粗微体实验
实验材料细胞试剂、试剂盒环己酰亚胺匀浆缓冲液仪器、耗材培养皿实验步骤1. 培养基中加入环己酰亚胺(溶于蒸馏水,贮存液浓度 0.1 mol/L,-20℃ 保存。如果不溶,试着加热到 40℃ 以帮助溶解)(终浓度 10 μmol/L),37℃ 保温 5~10 分钟。2. 培养皿从 37℃ 转移到冷室,立
从组织培养细胞中制备粗微体实验
实验材料细胞 试剂、试剂盒环己酰亚胺 匀浆缓冲液
从组织培养细胞中制备粗微体实验
实验材料 细胞 试剂、试剂盒 环己酰亚胺 匀浆缓冲液
杆状病毒储液制备实验——从单层培养中制备
实验材料单层培养的 Sf 9 细胞待接种的杆状病毒(野生型的或重组)试剂、试剂盒含10%胎牛血清的昆虫细胞培养液 TNM-FH仪器、耗材150 mm 培养瓶27℃ 培养箱倒置显微镜带有 GH-3.7 水平转子的4℃GPR离心机带螺口盖的冻存管液氮罐500 ml 旋转细胞培养瓶多转瓶的揽拌台实验步骤1
细胞膜功能
为细胞的生命活动提供相对稳定的内环境; 选择性的物质运输,包括代谢底物的输入与代谢 产物的排除,其中伴随着能量的传递; 提供细胞识别位点,并完成细胞内外信息跨膜传递;? 为多种酶提供结合位点,使酶促反应高效而有序地进行;? 介导细胞与细胞,细胞与基质之间的连接;? 质膜参与形成具有不
细胞膜介绍
细胞膜(cell membrane)又称质膜(plasma membrane),是指围绕在细胞最外层,由脂质、糖类和蛋白质组成的生物膜.细胞膜只是真核细胞生物膜的一部分,真核细胞的生物膜(biomembrane)包括细胞的内膜系统(细胞器膜和核膜)和细胞膜(cell membrane).
细胞膜功能
(1)分隔、形成细胞和细胞器,为细胞的生命活动提供相对稳定的内部环境,膜的面积大大增加,提高了发生在膜上的生物功能; (2)屏障作用,膜两侧的水溶性物质不能自由通过; (3)选择性物质运输,伴随着能量的传递; (4)生物功能:激素作用、酶促反应、细胞识别、电子传递等。 (5)识别和传递信
细胞核连缀分析实验_从组织中制备细胞核
实验材料动物组织试剂、试剂盒PBS蔗糖仪器、耗材电动匀浆器特氟隆研杵实验步骤一、用超速离心法从组织中分离细胞核1. 切下动物组织,放入置于冰上的平皿中,用冰冷的 PBS 冲洗。2. 加少量蔗糖Ⅰ溶液,用剪刀或剃须刀片将组织切碎,转入一个干净试管中,加蔗糖Ⅰ溶液至终体积为每克组织 10 ml。3. 用
细胞膜的成分
细胞膜是细胞表面的一层薄膜。细胞膜的化学组成主要由脂类、蛋白质和糖类组成。此外,细胞膜中还含有少量水分、无机盐与金属离子等。 细胞膜是防止细胞外物质自由进入细胞的屏障,它保证了细胞内环境的相对稳定,使各种生化反应能够有序运行
细胞膜的构造
1.按组成元素分构成细胞膜的成分有磷脂,糖蛋白,糖脂和蛋白质。2.按组成结构分磷脂双分子层是构成细胞膜的基本支架。细胞膜的主要成分是蛋白质和脂质,含有少量糖类。其中部分脂质和糖类结合形成糖脂,部分蛋白质和糖类结合形成糖蛋白。3.化学组成细胞膜 [2]细胞膜主要由脂质(主要为磷脂)、蛋白质和糖类等物质
细胞膜的简介
细胞膜是防止细胞外物质自由进入细胞的屏障,它保证了细胞内环境的相对稳定,使各种生化反应能够有序运行。但是细胞必须与周围环境发生信息、物质与能量的交换,才能完成特定的生理功能,因此细胞必须具备一套物质转运体系,用来获得所需物质和排出代谢废物。据估计细胞膜上与物质转运有关的蛋白占核基因编码蛋白的15
细胞膜的简介
细胞膜是防止细胞外物质自由进入细胞的屏障,它保证了细胞内环境的相对稳定,使各种生化反应能够有序运行。但是细胞必须与周围环境发生信息、物质与能量的交换,才能完成特定的生理功能,因此细胞必须具备一套物质转运体系,用来获得所需物质和排出代谢废物。据估计细胞膜上与物质转运有关的蛋白占核基因编码蛋白的15
细胞膜的构造
1.按组成元素分 构成细胞膜的成分有磷脂,糖蛋白,糖脂和蛋白质。 2.按组成结构分 磷脂双分子层是构成细胞膜的的基本支架。细胞膜的主要成分是蛋白质和脂质,含有少量糖类。其中部分脂质和糖类结合形成糖脂,部分蛋白质和糖类结合形成糖蛋白。 3.化学组成 细胞膜主要由脂质(主要为磷脂)、蛋白质
细胞膜的概述
为了使您更好的了解临床检验技师的相关内容,医学教育网特搜集相关资料供大家参考。 细胞膜(胞质膜):细胞膜是位于细胞壁内侧紧包在细胞质外面的一层具有半渗透性的生物膜。 (1)细胞膜的结构和成分: (与一般生物细胞膜相似)结构为平行排列的脂质双层。主要化学成分为脂质和蛋白质及少量多糖。蛋白质多
细胞膜的构造
1.按组成元素分 构成细胞膜的成分有磷脂,糖蛋白,糖脂和蛋白质。 2.按组成结构分 磷脂双分子层是构成细胞膜的的基本支架。细胞膜的主要成分是蛋白质和脂质,含有少量糖类。其中部分脂质和糖类结合形成糖脂,部分蛋白质和糖类结合形成糖蛋白。 3.化学组成 细胞膜主要由脂质(主要为磷脂)、蛋白质
细胞膜的细胞膜的物质转运功能是什么
(1)单纯扩散:一些脂溶性小分子物质由膜的高浓度一侧向低浓度一侧移动的过程。 扩散物质:脂溶性高、分子量小的物质,如O2、CO2、N2、乙醇、尿素和水分子等。 特点:①不需要载体;②不消耗能量;③扩散的最终结果是使该物质在膜两侧的浓度达到平衡。 (2)经载体和通道膜蛋白介导的易化扩散:
细胞膜流动性测定实验
荧光探针标记法 实验方法原理 常用于研究膜脂流动性的荧光探针为1,6-二苯基-1,3,5-己三烯(DPH)。DPH掺入到细胞膜脂烃链区后,介质粘度增加,顺反异
细胞膜流动性测定实验
实验方法原理 常用于研究膜脂流动性的荧光探针为1,6-二苯基-1,3,5-己三烯(DPH)。DPH掺入到细胞膜脂烃链区后,介质粘度增加,顺反异构受到抑制,成为唯一能发光的全反构型。实验材料 肿瘤细胞试剂、试剂盒 磷酸盐缓冲液DPH仪器、耗材 荧光分光光度计离心机实验步骤 1. 取对数生长期的肿瘤细
细胞膜流动性测定实验
荧光探针标记法 实验方法原理 常用于研究膜脂流动性的荧光探针为1,6-二苯基-1,3,5-己三烯(DPH)。DPH掺入到细胞膜脂烃链区后,介质粘度增加,顺反异
实质肝细胞悬浮液的制备
灌流液1) 无钙灌流液:每1000ml含NaCl 8.3g、KCl 0.5g、Hepes 2.4g、NaOH(1mol/L)6ml,在37℃时,PH=7.5,渗透压为315mOsm;2) 胶元酶灌流液:每100ml含NaCl 0.4g、KCl 0.05g、Hepes 2