蛋白质盐析分离法介绍
摘要 : 盐析的发生是由于盐浓度增大到一定数值时使水活性降低,导致蛋白质分子表面电荷逐渐被中和,水化膜逐渐被破坏,引起蛋白质分子之间相互聚集并从溶液中析出,最后经离心机分离后获得沉淀物和上清液。一、蛋白质盐析分离的原理:蛋白质在稀盐溶液中溶解度会随着盐浓度的增大而上升(盐溶),当盐浓度增大到一定数值时,其溶解度又逐渐下降直至蛋白质析出。盐析的发生是由于盐浓度增大到一定数值时使水活性降低,导致蛋白质分子表面电荷逐渐被中和,水化膜逐渐被破坏,引起蛋白质分子之间相互聚集并从溶液中析出,最后经离心机分离后获得沉淀物和上清液。二、影响蛋白质盐析分离的因素:1、蛋白质浓度:蛋白质浓度过大,盐析时发生共沉现象,分离效果不好。蛋白质浓度太稀,耗盐量过大,蛋白质回收率低。一般蛋白质浓度在2.5%~3.0%较适中。2、离子强度:离子强度越大,蛋白质的溶解度越低,越容易产生盐析现象。3、离子类型:离子半径小而价数高的离子,对盐析影响较强。离子半径大而......阅读全文
影响蛋白质盐析的因素有哪些?
(1)温度:除对温度敏感的蛋白质在低温(4度)操作外,一般可在室温中进行。一般温度低蛋白质溶介度降低。但有的蛋白质(如血红蛋白、肌红蛋白、清蛋白)在较高的温度(25度)比0度时溶解度低,更容易盐析。(2)pH值:大多数蛋白质在等电点时在浓盐溶液中的溶介度最低。(3)蛋白质浓度:蛋白质浓度高时,欲分离
盐析法得到的蛋白质如何脱盐
常用的是凝胶过滤层析脱盐,利用具有网状结构的凝胶的分子筛作用,根据被分离物质的分子大小不同来进行分离。蛋白质溶液中盐分子和蛋白质分子大小相差较大,盐分子较小,会随着层析流动相进入孔径较小的固定相,在层析中迁移速率小,而蛋白质分子尺寸较大,不能随流动相进入固定相,迁移速率大,首先从层析术中流出,实现脱
蛋白质的盐析反应现象及原理
1、现象:盐析是指在蛋白质水溶液中加入中性盐,随着盐浓度增大而使蛋白质沉淀出来的现象。中性盐是强电解质,溶解度又大,在蛋白质溶液中,一方面与蛋白质争夺水分子,破坏蛋白质胶体颗粒表面的水膜;另一方面又大量中和蛋白质颗粒上的电荷,从而使水中蛋白质颗粒积聚而沉淀析出。常用的中性盐有硫酸铵、氯化钠、硫酸钠等
蛋白质的盐析反应现象及原理
1、现象:盐析是指在蛋白质水溶液中加入中性盐,随着盐浓度增大而使蛋白质沉淀出来的现象。中性盐是强电解质,溶解度又大,在蛋白质溶液中,一方面与蛋白质争夺水分子,破坏蛋白质胶体颗粒表面的水膜;另一方面又大量中和蛋白质颗粒上的电荷,从而使水中蛋白质颗粒积聚而沉淀析出。常用的中性盐有硫酸铵、氯化钠、硫酸钠等
蛋白质的盐析反应现象及原理
加5%卵清蛋白溶液5ml于试管中,再加等量的饱和硫酸铵溶液,混匀后静置数分钟析出球蛋白沉淀。倒出少量浑浊沉淀,加少量水,沉淀是否溶解,为什么?溶解,蛋白溶液加入浓无机盐溶液,导致蛋白质溶解度降低而析出,这是盐析过程,蛋白质只是沉淀,并未变性,加水后即恢复溶解。将管内容物过滤,向滤液中添加硫酸铵粉末到
蛋白质分段盐析原理及实验步骤
对分离目的蛋白的盐析,最好采用分段盐析。由于不同的蛋白质其溶解度与等电点不同,沉淀时所需的pH值与离子强度也不相同,改变盐的浓度与溶液的pH值,可将混合液中的蛋白质分批盐析分开,这种分离蛋白质的方法称为分段盐析法(fractionalsaltingout)。如半饱和硫酸铵可沉淀血浆球蛋白,饱和硫酸铵
什么是蛋白质的盐析和盐溶
盐溶在蛋白质水溶液中,加入少量的中性盐[即稀浓度],如硫酸铵、硫酸钠、氯化钠等,会增加蛋白质分子表面的电荷,增强蛋白质分子与水分子的作用,从而使蛋白质在水溶液中的溶解度增大。这种现象称为盐溶。稀浓度可促进蛋白质的溶,称为盐溶作用。同时稀盐溶液因盐离子与蛋白质部分结合,具有保护蛋白质不易变性的优点,因
解析蛋白质的盐溶、盐析和变性
在中学化学教学中,在讲到油脂、蛋白质以及胶体时,经常要解释油脂皂化反应后高级脂肪酸钠与甘油的分离,为何要加细小食盐颗粒?食盐是如何使高级脂肪酸钠从溶液中析出的?在蛋白质溶液中为何加少量的硫酸铵能促进蛋白质的溶解,而加高浓度的硫酸铵却会使蛋白质析出呢?而硫酸铜溶液同样是盐溶液却使析出的蛋白质不像前
什么是蛋白质的盐析和盐溶
盐溶在蛋白质水溶液中,加入少量的中性盐[即稀浓度],如硫酸铵、硫酸钠、氯化钠等,会增加蛋白质分子表面的电荷,增强蛋白质分子与水分子的作用,从而使蛋白质在水溶液中的溶解度增大。这种现象称为盐溶。稀浓度可促进蛋白质的溶,称为盐溶作用。同时稀盐溶液因盐离子与蛋白质部分结合,具有保护蛋白质不易变性的优点,因
蛋白质盐析后加水为什么能复原
蛋白质是分子胶体,会发生凝聚,加入电解质或加热都会使蛋白质沉淀。盐析就是加入电解质盐使蛋白质凝聚的过程。加水稀释后蛋白质又可以溶解
蛋白质的盐析与变性有何不同
1、性质不同:盐析是在蛋白质水溶液中加入中性盐,随着盐浓度增大而使蛋白质沉淀出来的现象。蛋白质变性是受物理或化学因素的影响,改变其分子内部结构和性质的作用。2、特点不同:蛋白质变性的同一多肽链中的氨基和酰基之间可以形成氢键或肽链间形成氢键,使得这一多肽链的主链具有一定的有规则构象。盐析在蛋白质溶液中
蛋白质的盐析反应结果是什么
盐析可以使蛋白质变性,发生凝聚,属于物理变化。就是把蛋白质颗粒吸附的带电粒子的平衡破坏了,使蛋白质凝聚析出。
蛋白质盐析过程中应注意什么
盐析:当盐浓度增高到一定值时,蛋白质的溶解度逐渐下降,直至蛋白质析出。1) 盐的选择蛋白质沉淀时,常用(NH4)2SO4优点:溶解度大,且对温度不敏感;分级效果好;有稳定蛋白质结构的作用;价廉,废液可作肥料。缺点:沉淀后样品需脱盐。2) (NH4)2SO4盐析固体法:搅拌下,少量多次加入饱和溶液法:
蛋白质盐析在临床上有什么用
在临床医学上,变性因素常被应用于消毒及灭菌。将细菌、病毒加温,加酸、加重金属汞,因蛋白质变性达到灭活的效果。当病人因皮肤破裂引起出血时,用冰块将出血的部位冷冻起来,使表面的血凝固,阻止内部的血液流出。降低病菌的活性,防止感染,也是应用了蛋白质的变性.由于紫外线可引起蛋白质变性,临床上可用紫外线照射的
小苏打,碳酸氢钠能使蛋白质盐析
太浓的不行,因为碳酸钠和碳酸氢钠会水解生成OH-,可能使蛋白质变性
生物分子的等电点沉淀分离法
等电点沉淀分离法是利用两性电解质在等电点时溶解度zui小的性质,不同的两性电解质其等电点不同,其在电中性时溶解度不同,可用于某些两性电解质的分离,如氨基酸、蛋白质和核苷酸等生物分子。为了增加沉淀效果,往往在等电点时再加上其它沉淀因素。等电点沉淀分离法一般不单独使用,常与盐析分离法、有机溶剂沉淀分离
生物分子的等电点沉淀分离法
等电点沉淀分离法是利用两性电解质在等电点时溶解度最小的性质,不同的两性电解质其等电点不同,其在电中性时溶解度不同,可用于某些两性电解质的分离,如氨基酸、蛋白质和核苷酸等生物分子。为了增加沉淀效果,往往在等电点时再加上其它沉淀因素。等电点沉淀分离法一般不单独使用,常与盐析分离法、有机溶剂沉淀分离法一起
蛋白质的盐析分级分离及凝胶层析脱盐实验
本实验的目的是了解盐析分级分离蛋白质的基本原理及操作;了解葡聚糖凝胶SephadexG-25脱盐的基本原理和凝胶柱的制备及洗脱技术以及了解752型紫外可见分光光度计的使用方法。实验方法原理用大量中性盐使蛋白质从溶液中析出的过程称为蛋白质的盐析作用。蛋白质是亲水胶体, 在高浓度的中性盐影响下脱去水化层
蛋白质的盐析分级分离及凝胶层析脱盐实验
实验方法原理 用大量中性盐使蛋白质从溶液中析出的过程称为蛋白质的盐析作用。蛋白质是亲水胶体, 在高浓度的中性盐影响下脱去水化层, 同时, 蛋白质分子所带的电荷被中和, 结果蛋白质的胶体稳定性遭到破坏而沉淀析出。经透析或用水稀释时又可溶解, 故蛋白质的盐析作用是可逆过程。盐析不同的蛋白质所
蛋白质的盐析分级分离及凝胶层析脱盐实验
蛋白质盐析 实验方法原理 用大量中性盐使蛋白质从溶液中析出的过程称为蛋白质的盐析作用。蛋白质是亲水胶体, 在高浓度的中性盐影响下脱去水化层, 同时, 蛋
蛋白质的分段盐析与透析误差分析和可能的改进
盐析是指向蛋白质溶液中加入高浓度的中性盐,以破坏蛋白质的胶体稳定性,使蛋白质的溶解度降低而从溶液中沉淀析出的过程。改变盐的浓度与溶液的PH值,便可将混合液中的蛋白质逐个盐析分开,这种分离蛋白质的操作称为分段盐析。
蛋白质的提取及粗分离实验——硫酸铵盐析法
分离纯化蛋白质,首先要从原材料中提取目的蛋白,然后通过粗分离的方法除去大量杂质,最后进行精细分离,得到目的蛋白。本实验以新型基因重组人TNF为例阐明重组蛋白TNF的提取及初步分离实验方法原理分离纯化蛋白质,首先要从原材料中提取目的蛋白,然后通过粗分离的方法除去大量杂质,最后进行精细分离,得到目的蛋白
盐析的定义
向某些蛋白质溶液中加入某些无机盐溶液后,可以降低蛋白质的溶解度,使蛋白质凝聚而从溶液中析出,这种作用叫作盐析,是物理变化,可复原。向某些蛋白质溶液中加入某些重金属盐,可以使蛋白质性质发生改变而凝聚,进而从溶液中析出,这种作用叫作变性,性质改变,是化学反应,无法复原。把动物脂肪或植物油与氢氧化钠按一定
盐析的概念
盐析(salting out)是指在蛋白质水溶液中加入中性盐,随着盐浓度增大而使蛋白质沉淀出来的现象。
盐析的原理
破坏了蛋白质在水中稳定存在的二个因素,从而使蛋白质发生沉淀 。 1、破坏了水化层 在高浓度的中性盐溶液中,由于盐离子亲水性比蛋白质强,与蛋白质胶粒争夺与水结合,破坏了蛋白质的水化层。 在高浓度的中性盐溶液中,由于蛋白质和盐离子对溶液中水分子都有吸引力,产生与水化合现象,但它们之间有竞争作用,当大量
盐析的优点
不会引起蛋白质变性,经透析去盐后,能得到保持生物活性的纯化蛋白质。
盐析的原理
破坏了蛋白质在水中稳定存在的二个因素,从而使蛋白质发生沉淀 。 1、破坏了水化层 在高浓度的中性盐溶液中,由于盐离子亲水性比蛋白质强,与蛋白质胶粒争夺与水结合,破坏了蛋白质的水化层。在高浓度的中性盐溶液中,由于蛋白质和盐离子对溶液中水分子都有吸引力,产生与水化合现象,但它们之间有竞争作用,当大量中性
盐析的定义
向某些蛋白质溶液中加入某些无机盐溶液后,可以降低蛋白质的溶解度,使蛋白质凝聚而从溶液中析出,这种作用叫作盐析,是物理变化,可复原。向某些蛋白质溶液中加入某些重金属盐,可以使蛋白质性质发生改变而凝聚,进而从溶液中析出,这种作用叫作变性,性质改变,是化学反应,无法复原。 把动物脂肪或植物油与氢氧化
盐析结晶原理
盐析结晶是指在盐溶液体系中,加入某种电解质盐析剂, 这种加入的盐析剂,其离子的水合作用比原溶液中其它盐较强, 它使溶液中自由水分子数减小,从而提高溶液中欲结晶物质在溶液中的有效浓度,使欲结晶物质在溶液中结晶析出, 这就是盐析结晶。研究表明,水对阴、阳离子都有较强溶剂化作用,但对阳离子比阴离子有更大的
盐析结晶原理
盐析结晶是指在盐溶液体系中,加入某种电解质盐析剂, 这种加入的盐析剂,其离子的水合作用比原溶液中其它盐较强, 它使溶液中自由水分子数减小,从而提高溶液中欲结晶物质在溶液中的有效浓度,使欲结晶物质在溶液中结晶析出, 这就是盐析结晶。 研究表明,水对阴、阳离子都有较强溶剂化作用,但对阳离子比阴离子有更大