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CIK/DCCIK及其在细胞治疗上的应用(三)

【培养原理】 1.DC培养用细胞因子: 1.1 GM-CSF(粒细胞/巨噬细胞集落刺激因子) GM-CSF是一种造血生长因子,在体外可刺激中性粒细胞和巨噬细胞的集落形成,并具有促进早期红巨核细胞、嗜酸性祖细胞增殖和发育的功能。 GM-CSF是最早被鉴定出来对于DC有作用的细胞因子之一。GM-CSF在DC培养中的功能是促进单核细胞向大巨噬样细胞分化,细胞表面MHC II类分子的表达得以提高,从而增强细胞的抗原递呈功能。此外,GM-CSF还可促进DC的存活。 1.2 IL-4 (白细胞介素-4) IL-4在由单核细胞诱导成DC的过程中发挥的作用是抑制巨噬细胞的过度生长,从而引导单核细胞向DC方向分化。若培养体系中不加IL-4,单核细胞将分化为巨噬细胞。同时,IL-4还有降低细胞表面表达CD14分子的能力。CD14表达水平的降低是单核细胞分化为DC的重要标志。 GM-CSF和IL-4共同作用可使单核细胞定向分化为未成熟DC(immat......阅读全文

CIK/DC-CIK及其在细胞治疗上的应用(三)

【培养原理】 1.DC培养用细胞因子: 1.1 GM-CSF(粒细胞/巨噬细胞集落刺激因子) GM-CSF是一种造血生长因子,在体外可刺激中性粒细胞和巨噬细胞的集落形成,并具有促进早期红巨核细胞、嗜酸性祖细胞增殖和发育的功能。 GM-CSF是最早被鉴定出来对于DC有作用的细胞因子之一。GM-CSF在

CIK/DC-CIK及其在细胞治疗上的应用(一)

【背景知识】  CIK是“Cytokine-Induced Killer Cells”的缩写,中文全称为“细胞因子诱导的杀伤细胞”。 CIK是单个核细胞在CD3单抗和多种细胞因子(包括IFN-γ,IL-2等)的作用下培养获得的一群以CD3+CD56+细胞为主要效应细胞的异质细胞群,其既具有

CIK/DC-CIK及其在细胞治疗上的应用(二)

【细胞制备】 1.外周血单个核细胞的采集 1.1 用血细胞分离机采集患者自身的外周血单个核细胞50-100mL; 1.2 淋巴细胞分离液密度梯度离心法进一步纯化单个核细胞(PBMC); 1.3 无血清培养液洗涤2次,获得纯度在90%以上的PBMC。 2.CIK细胞的培养及鉴定 2.1 将PBMC按1

CIK/DC-CIK及其在细胞治疗上的应用(四)

 一、高效CIK  高效CIK(High-efficiency cytokine-induced killer),即高效细胞因子诱导的杀伤细胞,是治疗肿瘤和慢性传染性病毒感染的细胞免疫治疗方法之一。其技术是从患者自体外周血(20~100ml)中分离单个核细胞,经过体外刺激

CIK/DC-CIK及其在细胞治疗上的应用(五)

5. 高效CIK血样本采集注意事项 (一)采血前,患者可以饮温开水、低脂清淡饮食; (二)采血前,不可以进行任何输液治疗; (三)采血前1天,患者不可以进行可能损伤、破坏淋巴细胞的治疗和检查项目,如放疗、化疗、核医学检查等; (四)连续两个疗程治疗时,取血和回输细胞在时间上会有交叉,取血必须在细胞回

CIK/DC-CIK及其在细胞治疗上的应用(六)

四、ACTL 全称“ AAV-DC-CTL靶向性抗肿瘤细胞免疫技术”,简称“ACTL™”或“ACTL技术”或“ACTL肿瘤细胞靶向治疗”。 "ACTL™ Anti-Cancer Cellular Immunotherapy"1. ACTL技术背景 2011年10月3日,加拿大科学

DC-CIK细胞制备方法(三)

 5.0 DC-CIK细胞的制备和质检  5.1 收集步骤4和步骤3中所获得的DC 细胞和CIK 细胞,按1:10(数目比)的比例共培养,无血清培养液中添加重组人IL-2 (300 U/ml);  5.2 每3天半量换液

DC-CIK的制备方法(三)

2. (可选步骤)  肿瘤抗原的制备用于负载 DC 的肿瘤抗原可以是肿瘤特异性抗原肽 (Tumor-Specific  Antigens,  TSA)或肿瘤相关抗原 (Tumor-αssociated Antigens, TAA),也可以是肿瘤全细胞抗原。用 TSA

DC-CIK细胞制备方法(一)

 CIK是“Cytokine-Induced Killer Cells”的缩写,中文全称为“细胞因子诱导的杀伤细胞”。 CIK是单个核细胞在CD3单抗和多种细胞因子(包括IFN-γ、IL-2等)的作用下培养获得的一群以CD3+CD56+细胞为主要效应细胞的异质细胞群, 其既

DC-CIK细胞制备方法(二)

1.外周血单个核细胞的采集  1.1 用血细胞分离机采集患者自身的外周血单个核细胞80 - 100ml;   1.2 淋巴细胞分离液密度梯度离心法进一步纯化单个核细胞(PBMC);   1.3 无血清培养液洗涤