两种胡麻饼粕提取蛋白质等电点测定

摘要 利用碱溶酸沉法从机械压榨和溶剂浸提法制油后产生胡麻饼粕中提取蛋白质, 用双缩眼法测定这两种碱提液蛋白质等电点溶剂浸提脱脂饼粕提取蛋白质一, 等电点非常稳定, 沉淀蛋白质颜色很白机榨脱油胡麻饼粕提取蛋白质一, 等电点降低, 且不太稳定, 可能是高温压榨致使蛋白质变性和蛋白质与胶质结合作用所致此研究为进一步从胡麻饼粕中提取分离蛋白工艺研究及企业生产提供参考。点击这里进入下载页面:进入下载页面......阅读全文

等电聚焦电泳(IEF)分离蛋白及测定蛋白质等电点

一、原理等电点聚焦(IEF)是在电场中分离蛋白质技术的一个重要发展,等电聚焦是在稳定的pH梯度中按等电点的不同分离两性大分子的平衡电泳方法。在电场中充有两性载体和抗对流介质,当加上电场后,由于两性载体移动的结果,在两极间逐步建立稳定的pH梯度,当蛋白质分子或其他两性分子存在于这样的pH梯度中时,这种

等电点聚焦分离蛋白质实验

蛋白质可以在包被或非包被的毛细管柱分离,分离方案的选择取决于靶蛋白的特异属性。最重要的属性就是pl,这由一般的凝胶电泳或CE决定。等电点聚焦分离是CE分离的一种。实验方法原理等电点聚集(IEF) 分离可以通过 CE 轻易地达到,这也是选择随后用于蛋白质分离的缓冲液系统的有效的第一步。蛋白质和多肽是两

等电点聚焦分离蛋白质实验

等电点聚焦             实验方法原理 等电点聚集(IEF) 分离可以通过 CE 轻易地达到,这也是选择随后用于蛋白质分离的缓冲液系统的有效的第一步。蛋白质和多肽是两性

等电点聚焦分离蛋白质实验

实验方法原理 等电点聚集(IEF) 分离可以通过 CE 轻易地达到,这也是选择随后用于蛋白质分离的缓冲液系统的有效的第一步。蛋白质和多肽是两性的,因此它们的电荷由周围的载体缓冲液决定。当蛋白质或多肽处于电场中,它移动到一个区域,这里周围的 pH 等于其等电点(pI)。在包被的毛细管柱内可

蛋白质的分离实验——IEF(等电点聚焦电泳)法

实验方法原理凡盐析所获得的粗制蛋白质(盐析得到的IgG)中均含有硫酸铵等盐类,这类将影响以后的纯化,所以纯化前均应除去,此过程称为“脱盐”(desalthing)。脱盐常用透析法和凝胶过滤法,这两种方法各有利弊。前者的优点是透析后析品终体积较小,但所需时间较长,且盐不易除尽;凝胶过滤法则能将盐除尽,

关于αs2酪蛋白的等电点沉淀分离方法介绍

  关于αs2-酪蛋白的等电点沉淀分离方法:等电点沉淀法是利用蛋白质在等电点时溶解度最低而各种蛋白质又具有不同等电点的特点进行分离的方法。在蛋白质的等电点时,蛋白质分子的存在形式是两性离子,其分子正负电荷相等 (即净电荷为零),此时在溶液中的蛋白质分子颗粒由于失去了相同电荷具有相互排斥作用,减弱了分

等电聚焦电泳法测定蛋白质的等电点

等电聚焦(Isoelectric focusing,简称 IEF)是六十年代中期出现的新技术。近年来等电聚焦技术有了新的进展,已迅速发展成为一门成熟的近代生化实验技术。目前等电聚焦技术已可以分辨等电点(pI)只差 0.001pH 单位的生物分子。由于其分辨力高,重复性好,样品容量大,操作简便迅速,在

等电聚焦电泳法测定蛋白质的等电点

等电聚焦电泳法测定蛋白质的等电点             实验方法原理 实验原理蛋白质分子是典型的两性电解质分子。它在大于其等电点的 pH 环境中解离成带负电荷的阴离子,向电场的

等电聚焦电泳法测定蛋白质的等电点

实验方法原理 实验原理蛋白质分子是典型的两性电解质分子。它在大于其等电点的 pH 环境中解离成带负电荷的阴离子,向电场的正极泳动,在小于其等电点的 pH 环境中解离成带正由荷的阳离子,向电场的负极泳动。这种泳动只有在等于其等电点的 pH 环境中,即蛋白质所带的净电荷为零时才能停止。如果在一个

常见蛋白质的等电点

常见蛋白质等电点参考值 蛋白质 等电点鲑精蛋白[salmine] 12.1鲱精蛋白[clupeine] 12.1鲟精蛋白[sturline] 11.71胸腺组蛋白[thymohistone] 10.8珠蛋白(人)[globin(human)] 7.5卵白蛋白[ovalbuin] 4.71;4.59伴

生物样品分离技术等电点沉淀法

利用蛋白质在等电点时溶解度最低,用酸、碱调节pH值,可使蛋白质沉淀析出,但这时沉淀不完全,可与有机溶剂沉淀法、盐析法联合使用。

生物分子的等电点沉淀分离法

等电点沉淀分离法是利用两性电解质在等电点时溶解度最小的性质,不同的两性电解质其等电点不同,其在电中性时溶解度不同,可用于某些两性电解质的分离,如氨基酸、蛋白质和核苷酸等生物分子。为了增加沉淀效果,往往在等电点时再加上其它沉淀因素。等电点沉淀分离法一般不单独使用,常与盐析分离法、有机溶剂沉淀分离法一起

生物分子的等电点沉淀分离法

 等电点沉淀分离法是利用两性电解质在等电点时溶解度zui小的性质,不同的两性电解质其等电点不同,其在电中性时溶解度不同,可用于某些两性电解质的分离,如氨基酸、蛋白质和核苷酸等生物分子。为了增加沉淀效果,往往在等电点时再加上其它沉淀因素。等电点沉淀分离法一般不单独使用,常与盐析分离法、有机溶剂沉淀分离

关于蛋白质等电点的简介

  由于蛋白质表面离子化侧链的存在,蛋白质带净电荷。由于这些侧链都是可以滴定的(titratable),对于每个蛋白都存在一个pH使它的表面净电荷为零即等电点。 英文缩写:pI。  蛋白质在溶液中有两性电离现象。假设某一溶液中含有一种蛋白质。当pI=pH时该蛋白质极性基团解离的正负离子数相等,净电荷

血红蛋白电泳_等电点差异法

实验方法原理据不同的血红蛋白带有不同的电荷,等电点不同,在一定的pH缓冲液中,血红蛋白的等电点小于缓冲液的pH时带负电荷,电泳时在电场中向阳极泳动,反之,Hb带正电荷向阴极泳动。在一定电压下,经过一定时间的电泳,不同的血红蛋白所带电荷不同,分子量不同,其泳动方向和速度不同,可分离出各自的区带,同时对

等电点聚焦电泳

中文名称等电点聚焦电泳英文名称isoelectric focusing electrophoresis定  义一种根据蛋白质等电点不同而将蛋白质在凝胶介质中分离的电泳方法。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)

等电点小知识

小知识:等电点等电点(pI,isoelectric point)等电点:两性离子所带电荷因溶液的pH值不同而改变,当两性离子正负电荷数值相等时,溶液的pH值即其等电点。两性与等电点氨基酸具有氨基和羧基的典型反应,例如氨基可以羟基化、酰基化,可与亚硝酸作用;羧基以成酯或酰氯或酰胺等。此外,由于分子中同

芯片等电聚焦分离

芯片等电聚焦分离蛋白质的原理与常规毛细管等电聚焦基本相同,都是依据蛋白质的等电点(pI)不同而进行分离。Hofmann等首次将毛细管等应用于蛋白质分析。Li等在PDMS芯片和聚碳酸酯(PC)芯片上,采用等电聚焦模式分离厂牛血清白蛋白和增强型绿色荧光蛋白(EGFP)。Das等。26 3采用高聚物芯片,

关于蛋白质等电点的测定方法介绍

  一、蛋白质等电点的测定方法方法:平板等电聚焦  二、蛋白质等电点的测定原理:蛋白质分子在含有载体两性电介质形成的连续而稳定的线性pH梯度中进行电泳。按照等电点不同被分离,形成一个很窄的区带  三、蛋白质等电点的测定仪器:Bio-Rad Model 111Mini IEF Cell  四、蛋白质等

关于蛋白质等电点的主要应用介绍

  在等电点时,蛋白质分子以两性离子形式存在,其分子净电荷为零(即正负电荷相等),此时蛋白质分子颗粒在溶液中因没有相同电荷的相互排斥,分子相互之间的作用力减弱,其颗粒极易碰撞、凝聚而产生沉淀,所以蛋白质在等电点时,其溶解度最小,最易形成沉淀物。等电点时的许多物理性质如黏度、膨胀性、渗透压等都变小,从

酪蛋白的制备实验_等电点沉淀法

实验方法原理牛乳中主要的蛋白质是酪蛋白,含量约为35 g/L。酪蛋白是一些含磷蛋白的混合物,等电点为4.7。利用等电点时溶解度最低的原理,将牛乳的pH调到4.7时,酪蛋白就沉淀出来。用乙醇洗涤沉淀物,除去脂类杂质后便可得到纯的酪蛋白。实验材料牛乳试剂、试剂盒乙醇 无水乙醚 醋酸 醋酸钠 乙醇 乙醚仪

简述蛋白质等电点的计算方法

  蛋白质等电点,找出所有可解离基团,并注明它们各自的pKa→假定它们在极低的pH下都处于非解离状态→逐步提高溶液的pH→可解离基团按照pKa从低到高的顺序依次释放出质子,即pKa越低的就越先释放出质子→写出所以可能的解离形式→找出净电荷为0的形式→将净电荷为0形式两侧的pKa相加除于2 。

聚丙烯酰胺等电聚焦电泳测蛋白质的等电点2

四、固定、,染色和脱色将凝胶板放在培养皿中,加入固定液,浸泡数小时后,用脱色液清洗两次,每次10min, 然后加入染色液,室温下放置15-30min,再用脱色液洗脱数次,直至谱带清晰,放入保存液中浸泡10min,可制干板。五、制作干胶板1. 取完全浸湿的平整玻璃纸一张,于玻璃板上铺平,纸与板之间不可

聚丙烯酰胺等电聚焦电泳测蛋白质的等电点1

实验原理所有的氨基酸均为两性物质,即它们至少含有一個羧基(carboxyl)及一個氨基(α-amino)。這些可游离的基团随着pH变化可以三种形式存在,即正电荷(cation)、两性离子(zwitterion)及负电荷(anion)等三种,在酸性溶液中带正电荷,在碱性溶液中带负电荷。若氨基酸在某一p

聚丙烯酰胺凝胶平板等电聚焦电泳测定蛋白质等电点

一、目的:学习聚丙烯酰胺凝胶平板等电聚焦电泳测定蛋白质等电点的原理及方法。二、原理:等电点聚焦(isoelectric focusing, IEF)或简称电聚焦(electrofocusing),也曾称等电点分离聚焦电泳等。它是60年代中期出现的技术,克服了一般电泳易扩散的缺点。近年来,等电点聚

牛血清白蛋白BSA的等电点是多少

天然牛血清白蛋白(BSA)的等电点为4.6~5.8,经无水乙二胺(EDA)和碳化二亚胺(EDC)反应,改性后的BSA等电点为8.6。

蛋白质等电点的测定和沉淀实验结果

1,在等电点附近,蛋白质溶液开始变浑浊,离心可见沉淀2,远离等电点,蛋白质溶液开始变澄清,离心未见沉淀

蛋白质沉淀方法等电点沉淀法介绍

  此法单独应用较少,多与其它方法结合使用  两性电解质分子上的净电荷为零时溶解度最低,不同的两性电解质具有不同的等电点,以此为基础可进行分离。如工业上生产胰岛素时,在粗提液中先调PH8.0去除碱性蛋白质,再调PH3.0去除酸性蛋白质。利用等电点除杂蛋白时必须了解制备物对酸碱的稳定性,不然盲目使用十

等电点聚焦电泳的定义

中文名称等电点聚焦电泳英文名称isoelectric focusing electrophoresis定  义一种根据蛋白质等电点不同而将蛋白质在凝胶介质中分离的电泳方法。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)

关于等电点的应用介绍

  1、蛋白质的沉淀  同种蛋白质在水溶液中带有同种电荷,互相排斥,且蛋白质表面能形成水化膜,这就使得蛋白质溶液(实际上是胶体)十分稳定。要想破坏其稳定性让其沉淀则需要从这两方面入手,也就是除去水化膜和表面电荷。  比如,可以先将蛋白质的pH调整至等电点,这时的蛋白质分子呈等电状态,虽不很稳定,但还