PCR常见问题及解决方案（二）
问题可能原因解决方法无产物或产量低模板浓度偏低或偏高电泳检测模板浓度，调整模板用量模板降解重新制备；基因组DNA、cDNA应小量分装后低温保存模板中含有抑制反应的杂质纯化模板引物浓度不足调整引物浓度，特别是针对长片段PCR引物存在二级结构重新设计引物，避免二级结构；优化退火温度引物降解引物应高浓度小量分装，-20℃保存，避免反复冻融Mg2+浓度偏低适当提高Mg2+浓度，从1 mM到3 mM以0.5 mM间隔递增，针对不同模板和引物摸索最佳Mg2+浓度dNTP降解-20℃保存，小量分装，避免反复冻融酶纯度低，扩增效率差选用高质量DNA聚合酶酶量不足适当增加酶量用酶不当针对模板、目标片段的特选择适当的酶(详见PCR产品选择指南)缓冲液失效更换缓冲液或使用预混PCR反应体系模板变性不充分适当延长变性时间；对高GC或复杂结构模板，提高起始变性温度至98℃退火温度偏高降低退火温度，应比引物Tm低至少5℃延伸时间不足增加延伸时间，特别是针对......阅读全文
氘灯常见问题及解决方案
光源问题Q&AQ1：什么时候应该更换氘灯？ A1：氘灯质保寿命都在1000小时或2000小时使用时间；当您发现仪器系统计时器氘灯使用时间达到质保时间后就应当更换氘灯；从经济的角度考虑，如果氘灯能量信噪比符合实际使用需求，便无须更换。Q2：购买氘灯应该提供哪些信息？A2：提供使用氘灯的仪器品牌和型号以
pH计常见问题及解决方案
1 同一样品，两次测量的 pH值不一样？温度变化或样品本身发生了化学反应，都会引起 pH值的变化。所以，应尽量保持温度一致，并且避免化学反应。2 同一样品，同时在两台 pH计上测量，读数不一致？由于两台 pH计的校正条件不一样（如不同时间做的校正），造成测量值有差异。所以要用同一缓冲液在同一时间
PH计常见问题及解决方案
常见问题及解决方案1.同一样品，两次测量的 pH值不一样？温度变化或样品本身发生了化学反应，都会引起 pH值的变化。所以，应尽量保持温度一致，并且避免化学反应。2.同一样品，同时在两台 pH计上测量，读数不一致？由于两台 pH计的校正条件不一样（如，不同时间做的校正），造成测量值有差异。所以要用同一
核酸电泳常见问题及解决方案
核酸电泳常见问题及解决方案
PCR仪常见问题及回答
聚合酶链式反应是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术，它可看作是生物体外的特殊DNA复制，PCR的最大特点，是能将微量的DNA大幅增加。因此，无论是化石中的古生物、历史人物的残骸，还是几十年前凶杀案中凶手所遗留的毛发、皮肤或血液，只要能分离出一丁点的DNA，就能用PCR加以放大，进行比对
PCR仪常见问题及回答
1. cDNA产量的很低可能的原因：＊RNA模板质量低＊对mRNA浓度估计过高＊反应体系中存在反转录酶抑制剂或反转录酶量不足＊同位素磷32过期＊反应体积过大，不应超过50μl2. 扩增产物在电泳分析时没有条带或条带很浅＊zui常见的原因在于您的反应体系是PCR的反应体系而不是RT-PCR的反应体系＊
PCR仪常见问题及回答
PCR仪常见问题及回答1. cDNA产量的很低可能的原因：＊RNA模板质量低＊对mRNA浓度估计过高＊反应体系中存在反转录酶抑制剂或反转录酶量不足＊同位素磷32过期＊反应体积过大，不应超过50μl2. 扩增产物在电泳分析时没有条带或条带很浅＊zui常见的原因在于您的反应体系是PCR的反应体系而不是R
PCR仪常见问题及解答
聚合酶链式反应是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术，它可看作是生物体外的特殊DNA复制，PCR的最大特点，是能将微量的DNA大幅增加。因此，无论是化石中的古生物、历史人物的残骸，还是几十年前凶杀案中凶手所遗留的毛发、皮肤或血液，只要能分离出一丁点的DNA，就能用PCR加以放大，进行
PCR仪常见问题及回答
1. cDNA产量的很低可能的原因：*RNA模板质量低*对mRNA浓度估计过高*反应体系中存在反转录酶抑制剂或反转录酶量不足*同位素磷32过期*反应体积过大，不应超过50μl2. 扩增产物在电泳分析时没有条带或条带很浅*最常见的原因在于您的反应体系是PCR的反应体系而不是RT-PCR的反应体系*与反
PCR－扩增常见问题及特点
常见问题PCR产物的电泳检测时间一般为48h以内，有些最好于当日电泳检测，大于48h后带型不规则甚至消失。假阴性，不出现扩增条带。PCR反应的关键环节有①模板核酸的制备，②引物的质量与特异性，③酶的质量及， ④PCR循环条件。寻找原因亦应针对上述环节进行分析研究。模板：①模板中含有杂蛋白质，②模板中
水浴振荡摇床常见问题及解决方案
问题一，显示正常、设定正常、无法加热。 解决方案： （1）接通电源，打开电源开关，调整设定温度高于实际测量温度，检查温控仪有无输出指示，有则测量加热管是否有电压输入，有则加热管坏，更换即可，没有电压输入加热管，多为继电器发生故障。若温控仪没有电压输出指示，建议更换温控仪。 （2）温控仪显示L
水浴振荡摇床常见问题及解决方案
水浴摇床是最常见的振荡器，使用中遇到的问题也比较多，仪器无忧网工程师根据多年维修水浴摇床经验，总结出常见的问题及解决方案。 问题一，显示正常、设定正常、无法加热。解决方案：（1）接通电源，打开电源开关，调整设定温度高于实际测量温度，检查温控仪有无输出指示，有则测量加热管是否有电压输入，有则加热管坏，
pH计的常见问题及解决方案
1 同一样品，两次测量的 pH值不一样？ 温度变化或样品本身发生了化学反应，都会引起 pH值的变化。所以，应尽量保持温度一致，并且避免化学反应。 2 同一样品，同时在两台 pH计上测量，读数不一致？ 由于两台 pH计的校正条件不一样（如不同时间做的校正），造成测量值有差异。所以要用同一缓冲
COD测定中常见问题及解决方案
一、采不到试剂或水样报警 （1）采样管堵塞造成无法提到试剂，检查堵塞位置，清洗或更换堵塞管路。 （2）如果九通阀堵塞在外部无法清除堵塞物的情况下方可拆开九通阀进行清洗。 （3）采样管漏气，检查采样管和九通阀相连的各个螺丝，是否压紧，有无漏气现象，如有请从新连接管路并压紧。 （4）高低位信号未
传代细胞－PCR常见问题及回答
1. cDNA产量的很低 可能的原因：*RNA模板质量低*对mRNA浓度估计过高*反应体系中存在反转录酶抑制剂或反转录酶量不足*同位素磷32过期*反应体积过大，不应超过50μl 2. 扩增产物在电泳分析时没有条带或条带很浅 *zui常见的原因在于您的反应体系是PCR的反应体系而不是RT-PCR的反应
PCR注意事项及解决方案
PCR 技术的敏感性极高，极微量的污染即可导致假阳性的产生，因此，了解 PCR 污染的原因，采取相应的措施预防和消除 PCR 污染就十分重要。PCR 污染主要是随机污染，包括 PCR 反应前污染及反应后污染。（1）PCR 反应前污染主要是样品 DNA 的交叉污染。提取 DNA 使用的仪器上残留的杂质
液相色谱柱常见问题及解决方案
1.液相色谱柱柱压高 压力单位换算：1bar＝0.987大气压＝14.503psi＝0.1MPa＝1.0197kg/cm2 （1）新柱（未进过样品或只进过柱效测试标样）压力高： 以原厂报告上完全一样的条件下测试比较，若压力在报告压力值上下浮动200-300psi以内，可视为正常范围；若高于出
量热仪的常见问题及解决方案
1、充氧头放气阀孔口处漏气：密封块上密封圈占有污物或密封圈老化，清除污物或更换密封圈。 2、氧弹盖白色绝缘套处漏气：绝缘套表面占有污物或老化破损，清除污物或更换绝缘套。 3、氧弹盖处漏气：弹头密封圈处沾有污物或密封圈老化，清除污物或更换密封圈。 4、氧弹内气体放不出：放气阀内顶针短，接触不
ProcartaPlex－免疫检测常见问题及解决方案
eBioscience公司Luminex液相蛋白芯片检测试剂——ProcartaPlex可以为您的生物学研究提供各种多因子检测方案，包括细胞因子、生长因子、趋化因子和其他蛋白。在选择试剂盒及操作时会遇到很多问题，现将常见问题及答复汇总如下，供您参考： 如果不小心将整个试剂盒保存在-20°C. 这个试
液压试验机常见问题及解决方案？
液压试验机常见问题及解决方案 液压材料试验机作为控制产品质量必须的检测设备，在使用过程中如何排除故障、保证机器良好运转，操作人员应学会发现问题并能排除，以下是个人总结出的两点常见问题及解决方案： 液压材料试验机常见故障一： 做拉伸试验时，试样断口总是在两边断。造成这种现象的原因，首先应考虑
量热仪的常见问题及解决方案
1、充氧头放气阀孔口处漏气：密封块上密封圈占有污物或密封圈老化，清除污物或更换密封圈。 2、氧弹盖白色绝缘套处漏气：绝缘套表面占有污物或老化破损，清除污物或更换绝缘套。 3、氧弹盖处漏气：弹头密封圈处沾有污物或密封圈老化，清除污物或更换密封圈。 4、氧弹内气体放不出：放气阀内顶
液相色谱柱常见问题及解决方案
1.液相色谱柱柱压高 压力单位换算：1bar＝0.987大气压＝14.503psi＝0.1MPa＝1.0197kg/cm2 （1）新柱（未进过样品或只进过柱效测试标样）压力高： 以原厂报告上完全一样的条件下测试比较，若压力在报告压力值上下浮动200-300psi以内，可视为正常范围；若高于出
旋转蒸发器常见问题及解决方案
常见问题及解决方案异常现象检测内容解决方案电机不转1、电控箱指示灯（或数显）亮，检测电箱内外部插头联线是否松动、断线。2、电控箱指示灯（或数显）不亮。3、确认"1、2"无异常。4、变频器受高频干扰显示"O.U."。5、变频器保护机能显示。1、重新插插头，接通断线。2、更新保险丝或确认供电无异常。3、
旋转蒸发仪的常见问题及解决方案
常见问题及解决方案异常现象检测内容解决方案电机不转1、电控箱指示灯（或数显）亮，检测电箱内外部插头联线是否松动、断线。2、电控箱指示灯（或数显）不亮。3、确认"1、2"无异常。4、变频器受高频干扰显示"O.U."。5、变频器保护机能显示。1、重新插插头，接通断线。2、更新保险丝或确认供电无异常。3、
旋转蒸发仪的常见问题及解决方案
旋转蒸发仪的基本原理就是减压蒸馏，也就是在减压情况下，当溶剂蒸馏时，蒸馏烧瓶在连续转动。结构：蒸馏烧瓶可是一个带有标准磨口接口的梨形或圆底烧瓶，通过一高度回流蛇形冷凝管与减压泵相连，回流冷凝管另一开口与带有磨口的接收烧瓶相连，用于接收被蒸发的有机溶剂。 旋转蒸发仪常见问题有以下几种； 一、电
ＵＶ塑胶涂料常见问题分析及解决方案
漆膜开裂原因分析及解决方案 1、 漆膜开裂原因分析 （１） 配套底面漆稀释剂太强或挥发太快； （２）曝光能量太高固化收缩率太大； （３）交联密度高或转化率太低； （４）涂膜太厚或曝光过程的温度偏高； （５）溶剂残留量过高。 2、 漆膜开裂解决方案 （
SDSPAGE电泳常见问题及解决方案
SDS-PAGE电泳常见问题及解决方案问题原因解决方案①出现“微笑”形带（两边翘起中间凹下）由于凝胶的中间部分凝固不均匀所致，多出现于较厚的凝胶中待其充分凝固再作后续实验②出现“皱眉”形带（两边向下中间鼓起）主要出现在蛋白质垂直电泳槽中，一般是两板之间的底部间隙气泡未排除干净可在两板间加入适量缓冲液
SDSPAGE电泳常见问题及解决方案
SDS-PAGE电泳常见问题及解决方案问题原因解决方案①出现“微笑”形带（两边翘起中间凹下）由于凝胶的中间部分凝固不均匀所致，多出现于较厚的凝胶中待其充分凝固再作后续实验②出现“皱眉”形带（两边向下中间鼓起）主要出现在蛋白质垂直电泳槽中，一般是两板之间的底部间隙气泡未排除干净可在两板间加入适量缓冲液
SDSPAGE电泳常见问题及解决方案
SDS-PAGE电泳常见问题及解决方案问题原因解决方案①出现“微笑”形带（两边翘起中间凹下）由于凝胶的中间部分凝固不均匀所致，多出现于较厚的凝胶中待其充分凝固再作后续实验②出现“皱眉”形带（两边向下中间鼓起）主要出现在蛋白质垂直电泳槽中，一般是两板之间的底部间隙气泡未排除干净可在两板间加入适量缓冲液
PCR常见问题
PCR产物的电泳检测时间 一般为48h以内，有些最好于当日电泳检测，大于48h后带型不规则甚致消失。 假阴性，不出现扩增条带 PCR反应的关键环节有①模板核酸的制备，②引物的质量与特异性，③酶的质量及， ④PCR循环条件。寻找原因亦应针对上述环节进行分析研究。 模板：①模板中含有杂蛋白质，②模