小鼠胞内细胞因子检测刺激方案
小鼠细胞因子细胞来源活化-极化培养培养时间再次刺激胞内阻断剂GM-CSFmouse spleenConA (3ug/mL) (2d)/IL-2 (20ng/mL)+IL-4 (20ng/mL) (3d)2d/3danti-CD3 (10ug/mL immobilized) + anti-CD28 (2ug/mL soluble) 5hrBrefeldin AIFN-gammamouse spleenConA (3ug/mL) (2d)/IL-2 (20ng/mL)+IL-4 (20ng/mL) (3d)2d/3danti-CD3 (10ug/mL immobilized) + anti-CD28 (2ug/mL soluble) 5hrBrefeldin AIL-1 alphamouse PECmIFNγ (100ng/mL) (2hr)/LPS (100ng/mL)(22hr)2hr/22hr-Brefeldin AIL-1 ......阅读全文
小鼠胞内细胞因子检测刺激方案
小鼠细胞因子细胞来源活化-极化培养培养时间再次刺激胞内阻断剂GM-CSFmouse spleenConA (3ug/mL) (2d)/IL-2 (20ng/mL)+IL-4 (20ng/mL) (3d)2d/3danti-CD3 (10ug/mL immobilized) + anti-CD28 (
人胞内细胞因子检测刺激方案
人细胞因子细胞来源活化-极化培养培养时间再次刺激胞内阻断剂G-CSFPBMCLPS (1 ug/mL)24hr-MonensinGM-CSFPBMCPMA (30-50ng/mL)/Iono (1ug/mL)5hr-MonensinGIFN gammaPBMCPMA (30-50ng/mL)/Ion
细胞内细胞因子的检测
实验步骤展开
细胞内细胞因子的检测
实验步骤 展开
细胞内细胞因子的检测
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亮点推荐细胞代谢胞内氧检测技术
细胞内氧含量水平对细胞的生理状态，信号传导以及细胞对药物处理的应激反应有显著的影响。由于技术原因，之前的研究更多集中在，通过检测细胞胞外氧含量变化情况，进而间接评估细胞代谢速率的差异以及相应的胞内氧含量相对水平。然而，影响胞内氧含量的因素不仅包括细胞代谢速率差异，同时也包括细胞组织类型，环境氧浓度，
酶分子的胞内高效递送、催化和检测
Nature Communications:高内涵助力纳米材料新剂型研究--酶分子的胞内高效递送、催化和检测近日，中国科学院过程工程所(IPE)生化工程国家重点实验室生物剂型与生物材料课题组与清华大学(THU)及天津大学(TJU)合作，基于无定形金属有机框架开发出一种新剂型，可实现酶分子的细胞内高效
流式检测胞内抗原时打孔液的配方
打孔液有很多种，方法也有很多。与你的实验方法相关。我用过酒精固定或Triton X-100（我做的都是培养的细胞）：（1）70%的酒精固定24小时即可，不再需要再打孔。如在PI染色测细胞周期或凋亡。（2）Triton X-100是比较强烈的穿孔剂。0.1% Triton X-100/PBS（再加0.
什么是胞内运输？
胞内运输(intracellular transport)是真核生物细胞内膜结合细胞器与细胞内环境进行的物质交换。包括细胞核、线粒体、叶绿体、溶酶体、过氧化物酶体、高尔基体和内质网等与细胞内的物质交换。
流式胞内染色protocol
一、surface marker染色1、收获细胞，0.5-1x10e6/tube，用FACS Buffer 2ml洗涤一次，倾倒后滤纸吸干管口液体。2、加入预先配置好的你需要染的surface marker的抗体混合液（即CD3，CD4，CD8抗体mixture），充分混匀，室温下孵育20分钟。3、
激活的淋巴细胞内细胞因子的检测
简介细胞因子是可溶性蛋白，在淋巴细胞应答中有重要的免疫调节作用。细胞因子可以调节细胞生长、分化以及一系列功能，并且介导正常与病理性免疫应答。细胞因子是具有效应及调节双重作用的独特蛋白。近来研究显示，细胞因子可以具有多重功能，作用于多个细胞亚群并可在不同亚群细胞表达。早期细胞因子表达与T细胞功能相关性
流式细胞仪实验方法1
流式细胞仪实验方法 一、 实验准备1． 标本制备：2． zui小化非特异性结合： 二、凋亡1．凋亡的检测方法：和其它2．PI染色法3．Annexin V 法4．TUNNEL法 三、细胞因子1．激活的细胞因子2．CBA 四、血小板1．活化2．活化检测3．网织血小板 五、红细胞1．网织红细胞2．
流式细胞仪实验方法
一、 实验准备1． 标本制备：2． zui小化非特异性结合： 二、凋亡1．凋亡的检测方法：网站和其它2．PI染色法3．Annexin V 法4．TUNNEL法 三、细胞因子1．激活的细胞因子2．CBA 四、血小板1．活化2．活化检测3．网织血小板 五、红细胞1．网织红细胞2．PNH3．胎儿红
T细胞克隆的建立
基本方案 1 产生和维持同种反应性 T h 和 CTL 克隆尽管同种反应性 T 细胞可以从未刺激的脾细胞或淋巴结细胞中产生，但如果细胞在初次混合淋巴细胞（M L C ) 中第一次被同种抗原刺激，反应细胞的得率会更高。见以下介绍。材 料同种反应性小鼠脾脏 T 细胞V H B S S (可选使用）V D
T－细－胞－克－隆－的－建－立
实验步骤基本方案 1 产生和维持同种反应性 T h 和 CTL 克隆尽管同种反应性 T 细胞可以从未刺激的脾细胞或淋巴结细胞中产生，但如果细胞在初次混合淋巴细胞（M L C ) 中第一次被同种抗原刺激，反应细胞的得率会更高。见以下介绍。材 料同种反应性小鼠脾脏 T 细胞V H B S S (可选使用
细胞内细胞因子的流式细胞仪检测
简介随着研究的进展，仅仅对细胞进行定量和活性的检测已不能满足需要。在单细胞水平研究细胞因子的表达能力对研究细胞因子在疾病中的作用越来越显的重要无比。目前检测单个细胞特定细胞因子的表达手段包括：ELIspot、原位杂交、免疫细胞化学、限制性稀释分析（limiting dilution analysis
细胞内细胞因子的流式细胞仪检测
简介 随着研究的进展，仅仅对细胞进行定量和活性的检测已不能满足需要。在单细胞水平研究细胞因子的表达能力对研究细胞因子在疾病中的作用越来越显的重要无比。目前检测单个细胞特定细胞因子的表达手段包括： ELIspot 、原位杂交、免疫细胞化学、限制性稀释分析（ limiting dilution anal
基本方案5－直接注射重组体病毒载体至小鼠脑内
实验材料成年鼠重组体病毒悬液仪器、耗材消毒纸巾小鼠脑图谱手术用具汉密尔顿注射器术后恢复笼实验步骤1.麻醉成年鼠，准备手术。在头盖骨上钻洞。注射的病毒可以在脑中扩散3~4 mm。2.4 min后用5ul 汉密尔顿注射器缓慢注射 2~4ul 重组体病毒悬液至目标区域。当注射. 元成后，将针头抬起1 mm
新研究实现酶分子胞内高效递送、催化和检测
近日，中国科学院过程工程研究所与清华大学、天津大学合作，基于无定形金属有机框架开发出一种新剂型，可实现酶分子的细胞内高效递送和催化，在单细胞水平上实现细胞代谢产物的原位检测。该工作发表于《自然-通讯》（Nature Communications）。 纳微颗粒为生物剂型工程的发展做出了重要贡献。
细胞内细胞因子染色步骤
1.样本准备：1） 收集细胞。经刺激和阻断处理的细胞（具体处理方案请参考文献进行），加细胞染色Buffer（或含0.1%BSA的PBS）制成单细胞悬液，调整细胞浓度约为1×107/ml。2） 取100μl细胞/管（约1×106细胞），分别加到做好标记的流式管底部。2.固定：1） 如需要表面染色，选用
高水平炎性细胞因子表达检测解决方案
警惕新冠肺炎下的“细胞因子风暴”，这些整理或许可以帮到你近期在顶级的医学杂志《柳叶刀》上，我国的研究人员发表了关于新型冠状病毒（以下简称新冠病毒）患者感染的临床表现、实验室数据等方面分析的文章“Clinical features of patients infected with 2019 no
流式细胞仪实验方法（三）
四、所需试剂1、细胞表面染色的荧光标记的单抗试剂依据实验需要选择特殊表面标志CD45圈定所有淋巴细胞CD3 圈定T淋巴细胞CD4 圈定T辅助淋巴细胞亚群CD8 圈定T抑制淋巴细胞亚群CD19/或CD20圈定B淋巴细胞CD56圈定NK淋巴细胞CD14圈定单核细胞2、荧光标记的细胞因子抗体：R&D提供F
流式细胞仪实验方法2
六、流式检测细胞染色基本过程（以全血为例）1、 收获细胞：肝素钠抗凝的静脉血，按1：1与培养基混匀，加刺激剂，同时加蛋白转运抑制剂（参照说明书）， 混匀后，37℃，5%二氧化碳培养4-6小时2、 阻断Fc受体：用于消除非特异性的结合染色① 在小鼠，可使用纯化的FcII/III受体的
基本方案1－在成年小鼠脑内植入遗传修饰过的细胞
实验材料遗传修饰细胞的培养成年宿主小鼠聚烯吡酮磺溶液试剂、试剂盒麻醉剂仪器、耗材小鼠大脑图片集耳打孔器带有电极操作的脑定位支架以及汉密尔顿注射夹外科用具bulldog 磁夹海绵中号镊子伤口夹26G针汉密尔顿注射器实验步骤1.为移植开始培养基因修正的细胞，收获 80%~90% 的汇合度的细胞。手术时，
基本方案2－植入基因修正的细胞到新生的小鼠脑内
实验材料基因修正的细胞新生小鼠试剂、试剂盒乙醇抗菌素外科胶水仪器、耗材汉密尔顿注射器显微操作仪手术用具幼鼠脑图谱加热板实验步骤1.为移植开始培养基因修正的细胞，收获 80%~90% 的汇合度的细胞。手术时，当麻醉和准备动物的时候准备好悬浮细胞（支持方案）。手术期间，每 30~60 min 重悬细胞。
peprotech细胞因子注意事项（四）
六、流式检测细胞染色基本过程（以全血为例）1、收获细胞肝素钠抗凝的静脉血，按1：1与培养基混匀，加刺激剂，同时加蛋白转运抑制剂（参照说明书）， 混匀后，37℃，5%二氧化碳培养4-6小时2、阻断Fc受体用于消除非特异性的结合染色① 在小鼠，可使用纯化的FcII/III受体的抗体（CD16/32），按
胞内运输的具体形态
胞内运输是指细胞内、细胞器间的物质交换。有分子扩散、微丝推动原生质的环流、细胞器膜内外的物质交换，以及囊泡的形成与囊泡内含物的释放等。如光呼吸途径中，磷酸乙醇酸、甘氨酸、丝氨酸、甘油酸分别进出叶绿体、过氧化体、线粒体；叶绿体中的丙糖磷酸经Pi转运器从叶绿体转移至细胞质，并在细胞质中合成蔗糖进入液泡贮
胞内受体的分化类型介绍
胞内受体又可分为核内受体和胞浆受体，如雄激素、雌激素、孕激素及甲状腺素受体位于核内，而糖皮质激素受体位于胞浆中。类固醇激素与胞内受体结合后，可使受体的构象发生改变，暴露出DNA结合区。在胞浆中形成的类固醇激素-受体复合物以二聚体形式穿过核孔进入核内。在核内，激素-受体复合物作为转录因子与DNA特异基
胞内运输的转运方式介绍
营养物质的转运方式有两种：1、被动转运：被动转运过程主要包括被动扩散、易化扩散、滤过、渗透等作用。 被动扩散：营养物质透过细胞膜，不借助载体，不消耗能量，物质从浓度高的一侧向浓度低的侧透过称为被动扩散。 易化扩散：指非脂溶性物质或亲水物质如钠、钾、葡萄糖和氨基酸等，不能透过细胞膜的双层脂类，需在细胞
胞内运输额具体形态
胞内运输是指细胞内、细胞器间的物质交换。有分子扩散、微丝推动原生质的环流、细胞器膜内外的物质交换，以及囊泡的形成与囊泡内含物的释放等。如光呼吸途径中，磷酸乙醇酸、甘氨酸、丝氨酸、甘油酸分别进出叶绿体、过氧化体、线粒体；叶绿体中的丙糖磷酸经Pi转运器从叶绿体转移至细胞质，并在细胞质中合成蔗糖进入液泡贮