T细胞克隆的建立
实验步骤基本方案 1 产生和维持同种反应性 T h 和 CTL 克隆尽管同种反应性 T 细胞可以从未刺激的脾细胞或淋巴结细胞中产生，但如果细胞在初次混合淋巴细胞（M L C ) 中第一次被同种抗原刺激，反应细胞的得率会更高。见以下介绍。材 料同种反应性小鼠脾脏 T 细胞V H B S S (可选使用）V D M E M -20 完全培养基经 照 射 的（2000rad，单 元 2. 1 1 ) 同种异基因型小鼠脾脏 T 细胞生长因子： M L C 或 Con A 刺激的细 胞 上 清（见辅助方案 1 或 2)，重组细胞因子9 6 孔 平 底 培 养 板（Costar)2 4 孔 细 胞 培 养 板（Linbro， Costar1 . 在体外用同种异型抗原致敏同种反应性 T 细 胞 10〜M d (见 辅 助 方 案 2 , 步 骤 1)，最好使用 H B S S 或 D M E M 溶 液（即与小鼠血清等渗的溶液）。2 . 准备......阅读全文
T－细－胞－克－隆－的－建－立
实验步骤基本方案 1 产生和维持同种反应性 T h 和 CTL 克隆尽管同种反应性 T 细胞可以从未刺激的脾细胞或淋巴结细胞中产生，但如果细胞在初次混合淋巴细胞（M L C ) 中第一次被同种抗原刺激，反应细胞的得率会更高。见以下介绍。材 料同种反应性小鼠脾脏 T 细胞V H B S S (可选使用
ELISPOT方－法－检－测－分－泌－细－胞－因－子－的－细－胞
实验步骤基本方案材 料包被缓冲液洗液：含 0.25% (v/v) Tween 20 的 PBS 溶液阻断缓冲液：含 5 % (m/V) BSA 或 FCS 的 PBS 溶液VRPMMO 完全培养基（或其他适宜培养基）分泌细胞因子的细胞（小鼠或人的）丝裂原，抗原或其他促细胞因子分泌的刺激物带有标记物的
单－克－隆－抗－体－的－制－备——杂交瘤的建系
实验步骤 在单克隆抗体的特异性得到充分验证之前，应该对所有候选的杂交瘤进行建系。但为了减少不必要的工作量，可以选择其中 2 0 个最佳的候选孔。在检测这 2 0 个孔的培养上 清（见辅助方案1 ) 为阳性后，应该将这些孔的细胞进行冻存，同时进行有限稀释。附 加 材 料（其他材 料 见 基 本 方 案
流－式－细－胞－仪－检－测－全－血－的－人－淋－巴－细－胞
实验步骤基本方案材 料（打 V 项 目 见 附 录 1)全血，通 常 用 E D T A 抗凝P B S ，有 或 无 0.1% (m /V ) 叠氮钠，过滤除菌单 克 隆 抗 体（标记的，未标记的或生物素化的），通过滴定确定最佳工作浓度间 标 二 抗（仅用于未标记的一抗）F T T C 标记的链霉
细－胞－毒－性－T－淋－巴－细－胞－的－诱－导－及－检－测
实验步骤基 本 方 案 1 从 C TL 前体中诱导细胞毒性注意：反应细胞应根据抗原的种类选择是否需要进行体内致敏。材 料反应细胞来源：未致敏的或者体内致敏的小鼠脾脏细胞（见辅助方案 1 和 2致敏培养基刺激细胞来源：未修饰或半抗原修饰的小鼠脾脏细胞（见辅助方案 3)R P M I -1 0 完全培
小－鼠－巨－噬－细－胞－的－分－离
实验步骤基 本 方 案 1 小鼠腹腔巨噬细胞的分离材料小鼠，洁 净 环 境 中 饲 养（最好置层流柜中饲养）7 3 % (m /V ) 豚 蛋 白 胨 或 者 3 % (W V r) Brewer 硫 基 乙 酸 盐 肉 汤（Brewerthioglycollate medium，分离炎性腹腔巨嗤细
P1克隆的定义
中文名称P1克隆英文名称P1 cloning定 义一种使用P1噬菌体载体扩增插入片段的克隆系统。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），方法与技术（二级学科）
B－细－胞－分－泌－抗－体－的－检－测
实验步骤基 本 方案材 料外周 血 单 个 核 细 胞（P B M C ; 单 元 8.1)RPMI- 5 和 RPMI-IO 完全培养基P W M 溶液9 6 孔 平 底 培 养 板（Costar)1 . 计 数 PBMC (附录 3A ) ， 用 RPMI-5 完全培养基调整浓度至 4 X 10
埃立克体病的历史
埃立克体病是1986年在美国阿肯色州发现的一种新的立克次体病，1991年从患者 血液中分离出病原体，命名为查菲埃立克体（Ehrlichia chaffeeusis）与犬埃立克体的生物学特性非常相似，血清学与犬埃立克体有很强的交叉反应，16sr RNA基因序列与犬埃立克体序列关系密切，同源性达98
小－鼠－巨－噬－细－胞－的－表－型－检－测
实验步骤基 本 方 案 直 标 法 检 测 小 鼠 巨 噬 细 胞 的 表 型材料Sorvall RT 6000B 离心机I . 准 备 4 只 12m m X 75m m 试管，将试管编号为 1〜4。每 管 中 加 入 2 X IO7个细胞/ml细胞悬液 50ul。2.每管加入 3 mg/ml 阻
巨－噬－细－胞－一－氧－化－氮－的－检－测
实验步骤基本方案材料展开
人－NK－T－细－胞－的－分－离－和－扩－增
实验步骤基本方案 1 NK T 细胞的鉴定材 料外周肝素抗凝血P B SR P M I -1640 培养基，含 1 0 % (V /V ) 人血清或 F C S 以 及 10U /m l I L -2 (可选）流 式 细 胞 缓 冲 液（flow cytometry buffer， FCbuffer
BrdU－检－测－丁－细－胞－和－B－细胞增殖
实验步骤基本方案材 料实验动物0.8m g / m l B r d U (Sigma) 水 溶 液（口 服用）或 4m g / m l B r d U P B S 溶 液（注射用)P B S ， p H 7. 40.15mo l / L 冰冷的 NaCl冰 冷 的 9 5 % 乙醇多聚甲醛固定液D
关于抵克立得的禁忌介绍
1．血友病或其它出血性疾病患者、粒细胞或血小板减少患者、溃疡病及活动性出血患者均不应使用此药。 2．严重的肝功能损害患者，由于凝血因子合成障碍，往往增加出血的危险，故本品不宜使用。 3．对本品过敏者。
关于立卫克的用法用量介绍
口服，不可咀嚼。 1、消化性溃疡：一次20mg(一次l粒)，一日l-2次。每日晨起吞服或早晚各1次，胃溃疡疗程通常为4-8周，十二指肠溃疡疗程通常2-4周。 2、反流性食管炎：一次20-60mg(一次1-3粒)，一日1-2次。晨起吞服或早晚各1次，疗程通常为4-8周。 3、卓-艾综合征：一
简述抵克立得的药理毒理
噻氯匹定为血小板聚集抑制剂。血小板的活化受多种因素的影响，其中二磷酸腺苷(ADP)起关键作用。当二磷酸腺苷与其特异性受体结合后，可活化血小板膜表面的纤维蛋白原受体(糖蛋白Ⅱb-Ⅲa复合物)，并使其结合纤维蛋白原进而引起血小板聚集(Ⅰ期聚集)。另外，血小板活化后又可释放二磷酸腺苷，导致血小板进一步
概述立卫克的药理作用
质子泵抑制剂。本品为脂溶性弱碱性药物，易浓集于酸性环境中，因此口服后可特异地分布于胃黏膜壁细胞的分泌小管中，并在此高酸环境下转化为亚磺酰胺的活性形式，然后通过二硫键与壁细胞分泌膜中的H+,K+-ATP酶（又称质子泵）的巯基呈不可逆性的结合，生成亚磺酰胺与质子泵的复合物，从而抑制该酶活性，阻断胃酸
多－克－隆－抗－血－清－的－制－备2
使 用 其 他 佐 剂 制 备 多 克 隆 抗 体 的 免 疫 接 种 法实验步骤用 其 他 佐 剂 制 备 多 克 隆 抗 体 的 免 疫 接 种 法附 加 材 料（其他材料见基本方案）TiterMaxttR-I (CytRx; 4°C 下储存少于 24 个月）或 Ribi 佐 剂 系 统（RAS
海姆立克急救法
这一个月在急诊科轮转，晨起临下班时出急诊：老年患者饮食时突发呛咳难耐，车至现场见老年患者双手抓住自己喉部、不能呼吸，现场立即给予海姆立克急救法，患者转危为安后转运医院进一步观察。为进一步学习此急救法，现再次温习学习有关海姆立克急救法的文献，并总结一下：一、heimlich全名HenryHeimlic
外－源－性－抗－原－向－T－细－胞－的－呈－递
实验步骤基本方案 一 种 抗 原 加 工 处 理 和 呈 递 的 检 测 体 系材 料具有增殖能力的（如转化的 B 细胞）或非增殖的且与 T 杂交瘤细胞 M H C 匹配的抗原呈递细胞（单 元 7.1)D M E M -1 0 完全培养基， 37°C对数生长期的 T 杂交瘤细胞抗原：溶解于水的蛋白质
NK/L－A－K－细－胞－杀－伤－活－性－的－检－测
实验步骤基 本 方案 51C r 释 放 法检 测 NK/LA K 细胞杀伤活性材 料展
B－细－胞－功－能－的－增－殖－检－测－方－法
实验步骤基 本 方 案 抗 I g M 与 L P S 刺激的 B 细胞增殖材 料（带 V 项 目 见 附 录 1)纯化的静息 B 细 胞（单 元 2. 5)，采 用 Percoll 梯度离心制备V D M E M -10 完全培养基山羊抗 IgM (JacksonImmunoresearch) 或
巨－噬－细－胞－抗－肿－瘤－活－性－的－检－测
实验步骤基本方案 [111In] 释放法检测巨噬细胞对肿瘤细胞的杀伤作用材 料辅助方案 [111In ] 标记肿瘤靶细胞材 料展开
PCR－检－测－细－胞－因－子－m－R－N－A－的表达
实验步骤基 本 方 案 定 量 IL -2 mRNA表达水平材 料内参照：转 录 质 粒 载 体（含有临床生物检测标本相关的c D N A )胍盐溶液50 U/ul RNasin5 X 反转录酶缓冲液0.5m g / m l olig (d T )16l m g /m l 乙酰化的B S A4d N
磁－珠－法－分－离T－细－胞－和－B－细胞
实验步骤基 本 方 案 1 用 AUTOMACS 系 统 进行 总 T 细胞、 CD4 +细 胞 或 CD8+T细胞的自动分离材 料小鼠HBSS 洗涤缓冲液基 本 方 案 2 使 用 AUTOMACS 系 统 进 行 B 细胞的自动分选材 料小鼠HBSS 洗涤缓冲液MACS 缓冲液CD45R (B2
关于立卫克的基本信息介绍
立卫克，别名奥美拉唑肠溶胶囊，英文名称：Omeprazole Enteric-Coated Capsules，国药准字H20056577，主要适用于十二指肠溃疡，应激性溃疡，反流性食管炎等。 1、功效主治： 适用于胃溃疡、十二指肠溃疡、应激性溃疡、反流性食管炎和卓-艾综合征(胃泌素瘤)。
埃立克体病的病因学
埃立克体目前已发现10余种。这种革兰阴性多型微生物的发育过程经历原体、初体和桑葚期。可以在原始单核细胞培养基或连续细胞层上培养，不能在鸡胚或不含细胞的培养基内生长。 埃立克体经 蜱叮咬进入人体，通过血循环和 淋巴管扩散，侵入单核巨噬细胞系统和淋巴细胞，使肾、脑膜、脾等实质 器官的 血管周围形成
使用立卫克的注意事项介绍
1、使用不得超过7天，如症状未缓解或消失请咨询医师或药师。 2、两个月以内不得再次服用，如症状反复，应立即就医。 3、本品在以下情况下请勿使用：吞咽困难或疼痛；呕血；便血或黑便。这些可能是严重情况的征兆，请咨询医师。 4、肝功能不全或血象不正常的患者请在医师指导下使用。 5、假如出现烧心
使用立卫克的不良反应介绍
本品常见不良反应为：头痛、腹泻、恶心、呕吐、便秘、腹痛及腹胀。偶见头晕、嗜睡、乏力、睡眠紊乱、感觉异常、皮疹、瘙痒、荨麻疹、肝功能试验异常等。罕有多汗、周围血管性水肿、低钠血症；血管水肿、发热及过敏性休克；白细胞减少症、血小板减少症、粒细胞缺乏症、全血细胞减少症；可逆性精神错乱、易激惹、抑郁、攻
使用抵克立得的注意事项
1．为避免外科及口腔科择期手术中出血量增多，术前10～14天应停用本药。若术中出现紧急情况可输新鲜血小板以帮助止血。静脉注射甲泼尼松龙20mg可使出血时间在2小时内恢复正常。 2．严重的肾功能损害患者，由于肾清除率降低，导致血药浓度升高，从而加重肾功能损害。故使用本品时应密切监测肾功能，必要时