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红细胞残留的PBMC精确计数和活性分析(二)

3、通过AO/PI检测PBMC细胞活力为了验证AO/PI双染法精确计数总PBMC,从全血中分离了5个新鲜的白细胞样品,3%的醋酸溶解,然后台盼蓝染色人工计数对比AO/PI双染法样品A:加AO/PI,然后直接通过Cellometer双荧光细胞计数仪进行自动计数样品B:3%的醋酸裂解红细胞,然后台盼蓝染色,计数。两种方法对比,结果显示,AO/PI双染法能够不用裂解RBC进行总PBMC计数和活力分析。 4、AO/PI双染色法排除RBC污染导致的计数误差使用血球计数板手工计数和AO/PI双染自动计数两种方法,进行15个PBMC样品的计数。其中手工计数的操作者为经验丰富的计数方面专家,可以凭丰富的经验及不断微调显微镜焦距区 分出红细胞和PBMC。 如图所示,手工计数法为蓝色柱条,AO/PI双染自动计数法为绿色柱条。AO/PI双染法没有受到高度RBC污染的影响,可以精确计数PBMC。而手工计数需要靠经验丰富的操作者一个一个的判断红细胞和PB......阅读全文

流式细胞术在血液学中的应用

  DNA倍体分析及细胞周期分析    在细胞周期内,DNA含量随细胞内时相发生周期性变化,正常情况下,大多数细胞处于休止期(Go), G1期细胞虽有DNA合成,但DNA含量仍为2N,为二倍体细胞,;处于活跃的DNA合成期(S期)的细胞DNA含量为2N-4N;正经历细胞分裂(G2/M期)的细胞

流式细胞术在血液学中的应用(五)

红细胞疾病诊断 (一)网织红细胞测定    计数外周血中网织红细胞数量,对于评价骨髓红系造血及网织红细胞从骨髓到外周血的转送速率有重要意义。有核红细胞在成熟过程中,脱去细胞核后仍有少量RNA残留在细胞浆内,再经过约一天时间残留RNA完全消失,成为成熟红细胞。

做人外周血流式相关问题

在下最近作人外周血流式,作表面及其胞内染色,试剂说明书说要先分离外周血单个核细胞再染色,我有时候分的红细胞比较多,其他的方法试过了,都改进的不好,我担心红细胞会有影响,想在分离出PBMC以后如果红细胞比较多的话,就用红细胞裂解液裂解一下,但是我有如下问题,希望这样做过的同志指点一下,感激不禁。(1)

流式细胞术常见问题问答

1、流式细胞仪上的FL2-W FL2-A FL2-H 分别是做什么的?FL2-W是只检测荧光的脉冲宽度, FL2-H是指脉冲高度。通常在做细胞周期分析时应用,用于去除粘连细胞。2、流式同型对照怎样选择?同型对照(Isotype Control):使用与一抗相同种属来源、相同亚型、相同剂量和相同的免

偶然找到流式细胞术常见问题问答,经典!

1、流式细胞仪上的FL2-W FL2-A FL2-H 分别是做什么的?FL2-W是只检测荧光的脉冲宽度, FL2-H是指脉冲高度。通常在做细胞周期分析时应用,用于去除粘连细胞。2、流式同型对照怎样选择?同型对照(Isotype Control):使用与一抗相同种属来源、相同亚型、相同剂量和相同的免疫

探讨红细胞直方图的变化和几种贫血的关系

血液中红细胞的数量及血红蛋白量低于正常值下限时称为贫血。贫血不是一种独立性疾病,因此,可由各种病因引起,除引起红细胞数量的变化外,随着病情的加重,均能引起红细胞形态学的改变,血细胞计数仪的红细胞体积分布图,恰恰能反应其变化,即贫血红细胞的直方图,各有其特点,此种图形变化,再与其他参数相结合,进行综合

血细胞分析仪散点图异常对疟疾诊断的应用价值

  疟疾是热带病中最严重的一种寄生虫病,分布遍及全球。疟疾的确诊取决于疟原虫的找到与否,显微镜血涂片观察对查找疟原虫至关重要。现在各家医院自动化血液分析仪的应用普及,大大减轻了检验人员的工作量,但同时检验工作者也忽视了血液的血涂片显微镜检查。由于血涂片显微镜镜检复查率减少或者对分析仪分析过程中出现的

史前生物复活或永不可能 DNA保存有期限

  据西班牙《趣味》月刊9月号报道,重建古生物的基因最初是一个非常局限的研究项目。波伊纳坦言:“那时候我们认为永远都无法获取灭绝生物的完整基因组,顶多能找到一些支离破碎的片段。但是现在一切都变了。”证据就是发表在《当代生物学》上的两个完整的基因组。第一个基因组属于一只4300年前生活在现在俄罗斯北冰

病例14:红细胞内结构异常一例

研究证实罗氏诊断CINtec PLUS细胞学检测对宫颈细胞学筛查结果异常的女性具有临床价值       患者为急诊病人,女性,24岁,检验申请上的诊断写:腹痛。送检血常规检查。       使用XE-5000血细胞分析仪

血细胞比容测定

(一)检测原理 血细胞比容(Hct、Ht、HCT或PCV)是指在一定条件下,经离心沉淀压紧的红细胞在全血样本中所占比值。 1、离心法:包括温氏法(Wintrobe法)、微量法:是将抗凝血置于孔径统一的温氏管或毛细玻管中,以一定转速离心一定时间后,计算红细胞层占全血的体积比。 2、血液分析仪法:原

血细胞比容(HCT)测定

 (一)检测原理  血细胞比容(Hct、Ht、HCT或PCV)是指在一定条件下,经离心沉淀压紧的红细胞在全血样本中所占比值。  1、离心法:包括温氏法(Wintrobe法)、微量法:是将抗凝血置于孔径统一的温氏管或毛细玻管中,以一定转速离心一定时间后,计算红细胞层占全血的体积比。  2、血液分析仪法

FCM对外周白细胞的免疫荧光分析

外周血是临床检验中的重要标本。FCM分析外周白细胞的主要目的是了解各种白细胞的数目与分群情况。这些数字的变化与临床的某些疾病有一定的关系。近年来,由于多种识别白细胞膜表面抗原的单克隆抗体的发现,以及对这些单克隆抗体的直接或间接荧光标记物的出现,使得利用FCM的荧光组织化学分析获得被测细胞的多指标的更

FCM对外周白细胞的免疫荧光分析

外周血是临床检验中的重要标本。FCM分析外周白细胞的主要目的是了解各种白细胞的数目与分群情况。这些数字的变化与临床的某些疾病有一定的关系。近年来,由于多种识别白细胞膜表面抗原的单克隆抗体的发现,以及对这些单克隆抗体的直接或间接荧光标记物的出现,使得利用FCM的荧光组织化学分析获得被测细胞的多指标的更

ADVIA 120血球分析仪测定网织红细胞的临床应用

与以往的血球分析仪一样,ADVIA120血球分析仪主要用于血细胞分析检查,所不同的是其速度更快,能提供40个左右参数(见图1),结果准确性更好,对有核红细胞的鉴别采用过氧化物酶技术标记来鉴别,其它血球仪分析仪所提供的参数ADVIA120都有的。如WBC总数及分类,RBC总数及几项指数(MCV、MCH

ELISA实验中常见问题和注意事项

  1 临床标本的收集和保存  用于ELISA测定的临床标本最为常用的是血清(浆)。本实验室用ELISA测定乙肝两对半,甲肝,戊肝,抗HIV的标本时,在处理和保存方面要考虑以下几个方面:  1)要注意避免出现严重溶血及血清中混有红细胞。当标本出现严重溶血及血清中混有红细胞时,反应孔不易洗净,残留在反

皮质醇(Cortisol )操作规程

1.检验目的检测血清Cortisol主要是用于肾上腺皮质功能亢进及柯兴氏综合征的鉴别诊断,可以动态观察相关疾病的发生发展过程、疗效及预后评估。2.方法原理采用了美国雅培公司的专利技术——微粒子酶免疫分析(MEIA),即以anti-Cortisol包被微粒子(M-Ab)与标本中的BNP形成M-Ab-A

胰岛素(INS)操作规程

1.检验目的检测血清INS主要是用于给糖尿病人提供辅助的诊断信息以及对胰岛素瘤的鉴别诊断,可以动态观察相关疾病的发生发展过程、疗效及预后评估。2.方法原理采用了美国雅培公司的专利技术——微粒子酶免疫分析(MEIA),即以anti-INS包被微粒子(M-Ab)与标本中的BNP形成M-Ab-Ag复合物,

β-HCG人促绒毛膜性腺激素操作规程(sop)(1)

β-HCG (人促绒毛膜性腺激素、Totalβ-hCG、Beta Human Chorionic Gonadotropin)1.检验目的    检测血清β-hCG主要是用于女性妊娠、葡萄胎及绒癌等疾病的鉴别诊断,可以动态观察相关疾病的发生发展过程、疗效及预后评估。&nb

甲胎蛋白定性检测标准操作规程

1.检验目的  检测血清AFP主要是用于原发性肝癌、生殖系统肿瘤等恶性肿瘤的诊断或或鉴别诊断,可以动态观察相关疾病的发生发展过程、疗效及预后评估,另外还可作为唐氏综合征、早期胎儿先天性畸形及肝癌高发区的普查指标。  2.方法原理  采用EL

兔多克隆抗血清的制备实验——肌肉内注射免疫法

实验材料抗原试剂、试剂盒PBS乙醇仪器、耗材注射针头注射器培养箱实验步骤1.  取2 ml 的弗氏完全佐剂加到2 ml 的溶于PBS的纯化抗原中,使之乳化。用3 ml 注射器抽取此乳化液,接上22G注射针头,排出注射器中的气泡。 2.  将兔子敢在固定架上,用一只手抓住

甲型肝炎IgM定性检测作业指导书

1.检验目的血清抗HAV抗体IgM是HAV急性感染的标志,在感染的早期即已出现,是早期诊断甲型肝炎的依据。感染后3个月内可维持较高滴度,6个月后逐渐消失。2.方法原理采用ELISA架桥法,反应板的琼脂微孔包被兔抗人-IgMμ链,加入待测样本,同时加入HAVAg、抗-HAV-HRP,当样本中有抗-HA

兔多克隆抗血清的制备实验

实验材料 抗原试剂、试剂盒 PBS乙醇仪器、耗材 注射针头注射器培养箱实验步骤 1.  取2 ml 的弗氏完全佐剂加到2 ml 的溶于PBS的纯化抗原中,使之乳化。用3 ml 注射器抽取此乳化液,接上22G注射针头,排出注射器中的气泡。 2.  将兔子敢在固定架上,用一

戊型肝炎抗-IgM定性检测作业指导书

1.检验目的HEV所致戊型肝炎的临床症状和流行病学特点和甲型肝炎相似,是一种自限性急性肝炎。孕妇感染HEV有较高的重症肝炎发生率。抗HEV抗体检测所用抗原为合成多肽或克隆表达的融合蛋白,抗原序列多选自基因开放读码框架ORF2和ORF3区。抗HEV抗体IgM阳性表示急性期感染,在潜伏末、出现临床症状之

乙型肝炎表面抗原定性检测(HBsAg)操作规程

1.检验目的    检测HBsAg主要是用于乙型肝炎的的诊断、招工体检、征兵体检、幼儿入学、献血员筛选、血液制品的复检、了解乙肝病毒感染者的感染状况、疗效观察及预后评估,另外还用于乙型肝炎的流行病学调查。    2.方法原理 &n

丁型肝炎IgM定性检测作业指导书

1.检验目的HDV由HBsAg包裹,核心蛋白成分为多拷贝的Delta抗原,即HDV抗原,在HDV感染早期,血清中可短暂出现HDV抗原,但须用脱壳剂去除 HBsAg后才能检测到,因此,血清HDV抗原不易检出。抗HDV抗体可出现于急性感染的后期,而在慢性感染中可长期存在,抗HDV抗体并非保护性抗体,特别

癌胚抗原定性检测标准操作规程

1.检验目的  检测血清CEA主要是用于空腔脏器如胃肠道、呼吸道、泌尿道的肿瘤诊断,还可作为手术疗效、是否转移和监测复发的指标;另外在某些良性病变中也会轻度升高,如酒精性肝病、胆道疾患等。  2.方法原理  采用ELISA双抗体夹心法:向抗

鱼肌肉生长抑制素(MSTN)试剂盒(ELISA)使用说明

鱼肌肉生长抑制素(MSTN)试剂盒(ELISA)检测范围流程简单,实验结果准确,容易操作等特点受到众多科研工作者的信赖与支持。l 本试剂盒用于体外定量检测体液、腔液、组织匀浆及相关液体样本中鱼肌肉生长抑制素(MSTN)的含量。l 有效期:6个月l 保存条件:2-8℃l&

人谷胱甘肽S转移酶P1(GSTP1)试剂盒活性检测方法

本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本中人谷胱甘肽S转移酶P1(GSTP1)的活性。有效期:6个月保存条件:2-8℃本试剂盒仅供科研使用,不得用于临床诊断实验原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被人谷胱甘肽S转移酶P1(GSTP1)捕获抗体的包被

小鼠抑制素A酶联免疫试剂盒样品收集方法

样品收集:血清:全血样品于室温放置2小时或4℃过夜后于1000×g离心20分钟,取上清即可检测,收集血液的试管应为一次性的无热原,无内毒素试管。2. 血浆:抗凝剂推荐使用EDTA-Na2,样品采集后30分钟内于1000×g离心15分钟,取上清即可检测。避免使用溶血,高血脂样品。3. 组织匀浆:用预冷

大鼠钙蛋白酶酶免试剂盒 使用方法及原理

Cat.No. RJ-15652 l 本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本中大鼠钙蛋白酶(Calpain)的含量。l 有效期:6个月l 保存条件:2-8℃l 本试剂盒仅供科研使用,不得用于临床诊断实验原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫