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红细胞残留的PBMC精确计数和活性分析(一)

一、PBMC精确计数和活性分析的重要性外周血单个核细胞(PBMC)在免疫学、传染病、肿瘤学、干细胞移植、恶性血液肿瘤以及疫苗开发等领域被广泛的研究,尤其是在免疫学领域,PBMC细胞被用来监测在不同患者之间的免疫功能,其监测浓度、活力、增值、细胞因子的功能,对于临床试验和细胞医学研究都是是至关重要的。PBMC通常从分离于全血或者采集于病人的脐带血,这个过程就需要使用淋巴细胞分离液从血浆,血小板,和红细胞(RBC)中分离PBMC。分离之后,冷冻保存之前或者各种免疫分析都需要进行常规的活性和浓度测验来验证样品的质量。其中一个重要的问题就是PBMC细胞分离中红细胞的污染,PBMC样品中红细胞的污染会导致测量浓度和活性的误差,这就需要通过进一步的实验来分析这些细胞,要解决这个问题,可以用RBC溶解来消除潜在的RBC污染导致的问题。 二、消除红细胞导致的计数误差的方法1、新鲜的人类PBMC样品残留RBC的鉴定用Cellometer Visi......阅读全文

流式细胞仪实验方法

一、 实验准备1.   标本制备:2.   zui小化非特异性结合: 二、凋亡1.凋亡的检测方法:网站和其它2.PI染色法3.Annexin V 法4.TUNNEL法 三、细胞因子1.激活的细胞因子2.CBA 四、血小板