RT2ProfilerPCRArrays新手小技巧及注意事项
RT2 Profiler PCR Arrays新手小技巧及注意事项（做了几百次PCR Array的Matt Finley博士的经验之谈） RNA纯化和分析: 起始RNA样品的质量是成功实验的最重要的因素之一。我强烈推荐使用QIAGEN的RNA纯化试剂盒来进行RNA纯化。RNA样品必须进行柱上DNase处理，以保证你的RNA的纯度。假如你的样品很特别，需要选择一个最合适的试剂盒进行纯化，请致电或e-mail联系QIAGEN技术人员，他们很乐意帮您选择一个合适的试剂盒。确保RNA样品适合进行PCR array。RNA样品进行PCR array实验前必须先通过吸光值的测定来检验RNA的浓度和纯度，并通过凝胶电泳或者微流体、毛细管电泳等方法进行RNA完整度的测定。对于浓度和纯度，吸光度260/280和260/230的比值必须>1.8，浓度>100 ng/ul。对于RNA完整性的分析，如果用凝胶电泳分析，28S/18S比值必......阅读全文
RT2－Profiler－PCR－Arrays新手小技巧及注意事项
RT2 Profiler PCR Arrays新手小技巧及注意事项（做了几百次PCR Array的Matt Finley博士的经验之谈） RNA纯化和分析: 起始RNA样品的质量是成功实验的最重要的因素之一。我强烈推荐使用QIAGEN的RNA纯化试剂盒来进行RNA纯化。RNA样品必须进行柱上DNa
PCR－Array——基因表达分析疾病和信号通路的利器（一）
以前只要提到基因表达分析，人们就会想到荧光定量PCR；只要提到高通量基因表达分析，人们会首先想到基因芯片。虽然荧光定量PCR仪几乎每个实验室都有，但是做芯片就不一定每个实验室都具备这个条件了。那么只有一台荧光定量PCR仪是否也能进行高通量的基因表达谱分析呢？QIAGEN 推出的RT2 Profile
PCR－Array——基因表达分析疾病和信号通路的利器（二）
RT2 Profiler PCR Array操作流程 首先将RNA样本反转录成cDNA第一链，作为PCR模板；接着将cDNA模板与合适的即用型PCR预混液混合，等体积加入到已经固定好基因特异性引物的同一个孔板的每个孔中，然后即可运行real-time PCR循环程序。RT2 Profiler PCR
通过qPCR开展基因表达谱分析
一提起基因表达谱分析，大家马上会想到芯片。然而，并不是每个实验室都具备这个条件。现在，利用每个实验室都有的定量PCR仪，也能开展可靠的基因表达谱分析啦。 QIAGEN推出的RT2 Profiler PCR Array是一种高度可靠且灵敏的基因表达谱分析技术，它利用实时定量PC
PCR实用小技巧
增加PCR的特异性：1. primers design这是最重要的一步。理想的，只同目的序列两侧的单一序列而非其它序列退火的primer要符合下面的 一些条件1) 足够长,18-24bp,以保证特异性.当然不是说越长越好,太长的primer同样会降低特异性,并且降低产量2) GC% 40%~60%3
PCR的几个实用小技巧
增加PCR的特异性：1. primers design这是zui重要的一步。理想的，只同目的序列两侧的单一序列而非其它序列退火的primer要符合下面的 一些条件1) 足够长,18-24bp,以保证特异性.当然不是说越长越好,太长的primer同样会降低特异性,并且降低产量2) GC% 40%~60
PCR新手指南：PCR仪热盖的作用及种类
PCR新手指南：PCR仪热盖的作用及种类早期的PCR仪是没有热盖的，通过在PCR反应液中加入石蜡油（或矿物油）来防止PCR反应液蒸发。但反应完成后石蜡油不好除干净（我做实验时是将PCR反应液与石蜡油一起冷冻，取出后用手将管捂热，石蜡油先化开，立即将石蜡油用枪吸出。但并不能完全吸干净）。后来出现了带热
PCR技术新手指南
PCR的基本概念聚合酶链式反应是一种分子生物学技术，用于体外扩增特定的DNA 片段。PCR技术主要过程是，通过人类合成的一小断单链DNA 片段（叫做引物）与模板DNA特定的区域特异性结合，进而以四种dNTP为底物，通过DNA聚合酶沿着引物和模板形成的双链部分的3’端聚合形成DNA 片段实现DNA体外
ELISA试剂盒加样小技巧及注意事项
我公司elisa试剂盒受到了很多实验科研所的青睐，而它在使用的过程中有着多种步骤，每一步都需要特别关心与认真对待。今天上海劲马实验设备有限公司为您带来了*新加样技巧，一起来看看吧：加样技巧1.保持每次加样的两步要有太大的差异，所以有条件的应该考虑使用排枪。2.枪内有气泡应该先快速打空枪，将气泡排出。
小电流发生器使用技巧及日常使用注意事项
5A小电流发生器是电力、电气行业在调试中需要大电流场所的必需设备，该装置具有使用维修方便、性能优越使用安全可靠、外型结构美观、坚固耐用、移动方便等特点。是供电企业、大型工厂、冶金、发电厂、铁路等需要电力维修部门的必备设备。采用先进的微电子处理技术，全部使用过程可提前进行设置，全中文界面，操作简单明了
PCR引物设计及软件使用技巧
PCR引物设计及软件使用技巧张新宇，朱有康，高燕宁（中国协和医科大学中国医学科学院肿瘤研究所，北京100021）摘要：本文旨在介绍使用软件设计PCR引物的技巧。在PCR引物设计原则的基础上，详细介绍了两种常用引物设计软件的基本使用方法，并对其各自的优缺点进行了比较。一般性引物自动搜索可采用“Prem
PCR新手指南：PCR仪的故障分析
PCR仪是一种在实验室使用频率及使用时间非常高的仪器，因此故障率也是比较高的。PCR仪的故障主要有以下几类：1、制冷半导体故障2、温度传感器故障3、控制板故障4、电源板故障5、热盖故障6、软件故障7、其他故障下面就这几类问题做简单分析。1、制冷半导体故障制冷半导体故障率与制冷半导体的质量、温度变化次
PCR使用技巧
基本PCR引物设计参数 引物设计的目的是在两个目标间取得平衡：扩增特异性和扩增效率。特异性是指发生错误引发的频率。特异性不好或劣等的引物会产生额外无关和不想要的PCR扩增子，在EB染色的琼脂糖凝胶上可见到；引物效率是指在每一PCR循环中一对引物扩增的产物与理论上成倍增长量的接近程度。 ①引物长度；
PCR使用技巧
增加PCR的特异性：1. primers design这是最重要的一步。理想的，只同目的序列两侧的单一序列而非其他序列退火的引物要符合下面的 一些条件a. 足够长,18-24bp,以保证特异性.当然不是说越长越好,太长的引物同样会降低特异性,并且降低产量b. GC% 40%~~~~60% c. 5&
新手总结PCR/RTPCR疑难杂症
这里，很多经常遇到的问题，比如引物设计，PCR体系和条件，电泳条带分析等，我没有一一详细列举，因为这些原因比较容易找到，我这里列举的可能多是些容易忽略的疑难杂症，希望对大家有帮助。（说了是疑难杂症了，可能有一些看法走极端了，但是为了做出实验，怀疑一切，狗急跳墙，没事找抽也是值得的）。1.引物设计引物
DNA－提取小技巧
很多人都有上面这样的想法吧？其实我当初也这样的，结果呢？怎么也提不好，一提提了好几个月呢。DNA 提取还真是说起来容易、做起来难。首先大家得明确一点，DNA 是遗传信息的载体，获得高分子量、高纯度的 DNA 是你开展后续测序、杂交等实验的前提。所以，注意了，要高分子量、高纯度哦。我相信肯定有很多人一
测厚仪校准小技巧
测厚仪校准小技巧1、采用阶梯试块，分别在厚度接近待测厚度的大值和小值(或待测厚度大值的1/2)进行校正;2、将探头置于较厚的试块上，调整“声速校正”旋钮，使测厚仪 显示读数接近已知值;3、将探头置于较薄的试块上，调整“零位校正”旋钮，使测厚仪显示读数接近已知值;4、反复调整，使量程的高低两端都得到正
Altium－Designer小技巧
以下是在用到Altium Designer做PCB设计时候几个方便实用的小技巧，都是经验总结。1 选择多个引脚在PCB设计的时候，经常会遇到芯片或者排针多个引脚并行走线的情况，我们都知道AD有“交互式布多根线连接”的功能，通过这个功能能够很轻松的实现并行走线，不过在选择这多个引脚的时候可以通过“S＋
5A小电流发生器使用技巧及日常使用注意事项
5A小电流发生器是电力、电气行业在调试中需要大电流场所的必需设备，该装置具有使用维修方便、性能优越使用安全可靠、外型结构美观、坚固耐用、移动方便等特点。是供电企业、大型工厂、冶金、发电厂、铁路等需要电力维修部门的必备设备。采用先进的微电子处理技术，全部使用过程可提前进行设置，全中文界面，操作简单明了
PCR新手指南：快速PCR技术与快速PCR仪的区别
在PCR仪上完成一个PCR反应所需要的时间决定于以下几个因素：1、模块升温和降温时间2、模块与PCR管内温度平衡时间3、延伸时间4、循环次数下面就以上几点做一点分析，以便大家了解快速PCR技术与快速PCR仪的区别。1、模块升温和降温度时间PCR仪一般会标明升温速度和降温速度，但标的大多是zui大变温
PCR新手指南：快速PCR技术与快速PCR仪的区别
在PCR仪上完成一个PCR反应所需要的时间决定于以下几个因素：1、模块升温和降温时间2、模块与PCR管内温度平衡时间3、延伸时间4、循环次数下面就以上几点做一点分析，以便大家了解快速PCR技术与快速PCR仪的区别。1、模块升温和降温度时间PCR仪一般会标明升温速度和降温速度，但标的大多是最大变温速度
PCR新手指南：快速PCR技术与快速PCR仪的区别
在PCR仪上完成一个PCR反应所需要的时间决定于以下几个因素：1、模块升温和降温时间2、模块与PCR管内温度平衡时间3、延伸时间4、循环次数下面就以上几点做一点分析，以便大家了解快速PCR技术与快速PCR仪的区别。1、模块升温和降温度时间PCR仪一般会标明升温速度和降温速度，但标的大多是zui大变
PCR引物设计技巧
自从1985年美国PE—Cetus公司的人类遗传研究室 Mullis等发明了具有划时代意义的聚合酶链反应（PCP0 以来，PCR已经成为了分子生物学领域zui基本也是zui重要的技术手段之-[ I。然而能否找到一对合适的核苷酸片段作为引物，使其有效地扩增模板DNA序列，无疑决定着PCR的成败。现在动
PCR实用技巧
增加PCR的特异性： 1. primers design 这是最重要的一步。理想的，只同目的序列两侧的单一序列而非其它序列退火的primer要符合下面的 一些条件 a. 足够长,18-24bp,以保证特异性.当然不是说越长越好,太长的primer同样会降低特异性,并且降低产量 b. GC% 40%~
pcr实用技巧
增加PCR的特异性：1. primers design这是最重要的一步。理想的，只同目的序列两侧的单一序列而非其他序列退火的引物要符合下面的 一些条件a. 足够长,18-24bp,以保证特异性.当然不是说越长越好,太长的引物同样会降低特异性,并且降低产量b. GC% 40%~~~~60% c. 5&
PCR实验技巧3
11. Template DNA preparation 提取DNA时的试剂会抑制PCR反应的顺利进行.因此需要对TEMPLATE DNA进行纯化.特别是SDS(
PCR实验技巧4
④引物的额外序列与退火温度 若有额外的序列信息要加到引物中，例如T7RNA聚合酶结合位点、限制酶切位点或者GC发夹结构可以使用加长的引物。一般说来，引物5'端添加无关序列不会影响引物特异序列的退火。有时候，引物中添加了大量与模板不配对的碱基，可以在较低退火温度的条件下进行4到5个扩增循环；然
PCR实验技巧5
Trouble shooting guide 1．假阴性，不出现扩增条带 PCR反应的关键环节有①模板核酸的制备，②引物的质量与特异性，③酶的质量， ④PCR循环条件。寻找原因亦应针对上述环节进行分析研究。 模板：①模板中含有杂蛋白质，②模板中含有Taq酶抑制剂，③模板中蛋白质没有消化除净，特别是染
PCR引物设计技巧
自从1985年美国PE—Cetus公司的人类遗传研究室 Mullis等发明了具有划时代意义的聚合酶链反应(PCP0 以来，PCR已经成为了分子生物学领域最基本也是最重要的技术手段之-[ I。然而能否找到一对合适的核苷酸片段作为引物，使其有效地扩增模板DNA序列，无疑决定着PCR的成败。现在动物遗传育
PCR实验技巧5
Trouble shooting guide 1．假阴性，不出现扩增条带 PCR反应的关键环节有①模板核酸的制备，②引物的质量与特异性，③酶的质量， ④PCR循环条件。寻找原因亦应针对上述环节进行分析研究。 模板：①模板中含有杂蛋白质，②模板中含有Taq酶抑制剂，③模板中蛋白质没有消化除净，特别是染