气相色谱分析条件——色谱载体的选择
1.载体种类 ⑴ 常用载体① 红色硅藻土载体:可用于分离分析烷烃、烯烃和芳烃等非极性物质,以及酯、酮等极性较弱的物质。② 白色硅藻土载体:可用于分析醇、胺等极性较强的物质,也可用于非极性和弱极性样品的分离分析。③ 卤化碳载体:可用于分离分析水、醇、酸、胺等短链极性化合物,以及氯硅烷、氟化氢、氯化氢等。④ 玻璃微珠载体:因为玻璃微珠载体只能涂渍少量的固定液,所以一般用于分离分析沸点较高的样品。 ⑵ 相关说明① 硅藻土类载体:硅藻土类载体因其几何形状不很规则,而且容易破碎,给柱效率造成一定的影响。然而,此类载体具有较合适的比表面,故能承受20% 以上的液相载荷量;具有较适宜的表面能,有较好的湿润性,固定液与载体间的结合比较牢固且能形成比较均匀的固定液膜,因而能获得较高的柱效;再则,此类载体能承受较高的工作温度、有较适宜的孔结构,能适应多种类型物质的分离,经硅烷化等方法处理过的硅藻土载体则具有更好的惰性。因......阅读全文
生物载体分类
质粒载体质粒载体是一种相对分子质量较小、独立于染色体DNA之外的环状DNA(一般有1~200 kb左右,kb为千碱基对),有的一个细菌中有一个,有的一个细菌中有多个。质粒能通过细菌间的接合由一个细菌向另一个细菌转移,可以独立复制,也可整合到细菌染色体DNA中,随着染色体DNA的复制而复制。噬菌体载体
微载体实验
实验方法原理 以高浓度接种细胞和微珠,然后按照要求进行稀释、搅拌和取样。实验材料 起始培养物仪器、耗材 生长培养基微载体搅拌培养瓶磁力搅拌器实验步骤 1. 按照所需最终培养液量的 1/3,以 2~3 g/L 混悬微珠。2. 用胰蛋白酶消化和计数细胞,以正常接种浓度的 3~5 倍将细胞接种到微珠悬液中
质粒与载体
一、质粒绝大多数的生物都是以DNA 的形式来储藏其遗传信息。遗传物质要能生生不息地传给后代的首要条件就是它至少要具有一个复制原(ori, origin of replication,或译为复制起点),使整个基因体得以复制。含有复制原的遗传物质称为replicon,我们姑且把它译为为复制体吧!原核性复
克隆载体的功能作用及常见的载体介绍
克隆载体通常采用从病毒、质粒或高等生物细胞中获取的DNA作为克隆载体,在载体上插入合适大小的 外源DNA片段,并注意不能破坏载体的自我复制性质。将重组后的载体引入到宿主细胞中,并在宿主细胞中大量繁殖。常见的载体有质粒、噬菌粒、酵母人工染色体。
气液填充柱色谱仪载体的选择原则和评价方法
气液填充柱色谱仪载体性能的优劣对样品的分离起着重要作用,实际工作中主要依据分离对象、固定液的性质及涂渍量、载体粒度等选择载体。1、分离对象:酸性样品,选用酸洗载体。碱性样品,选用碱性载体。高沸点组分,一般选用玻璃微球载体。强腐蚀性组分,应选用氟载体。2、固定液的性质及涂渍量:当固定液的涂渍量大于5%
气液填充柱色谱仪载体去表面活性的方法
气液填充柱色谱仪为了取得好的分离效果,特别是分离极性、酸碱性和氢键型化合物时获得对称的色谱峰,对载体常进行酸洗、碱洗、硅烷化和釉化等预处理。一、酸洗:通常用 6mol/L 盐酸浸泡载体,加热处理 20~30 min,然后用水冲洗至中性,用甲醇淋洗、烘干和过筛。也可以用王水或硝酸进行酸洗处理。载体经酸
气液填充柱色谱仪载体的选择原则和评价方法
气液填充柱色谱仪载体性能的优劣对样品的分离起着重要作用,实际工作中主要依据分离对象、固定液的性质及涂渍量、载体粒度等选择载体。1、分离对象:酸性样品,选用酸洗载体。碱性样品,选用碱性载体。高沸点组分,一般选用玻璃微球载体。强腐蚀性组分,应选用氟载体。2、固定液的性质及涂渍量:当固定液的涂渍量大于 5
气液分配色谱仪硅藻土载体的表面处理
气液分配色谱仪硅藻土载体表面不是完全惰性的,具有活性中心,如硅醇基和矿物杂质等,使色谱峰产生拖尾。因此,硅藻土载体使用前要进行化学处理,以改进孔隙结构,屏蔽活性中心,处理方法有酸洗、碱洗、硅烷化、釉化和添加减尾剂等。一、酸洗:除去载体表面的氧化铁等。用3~6mol/L盐酸浸煮硅藻土载体,过滤,水洗至
气液填充柱色谱仪载体去表面活性的方法
气液填充柱色谱仪为了取得好的分离效果,特别是分离极性、酸碱性和氢键型化合物时获得对称的色谱峰,对载体常进行酸洗、碱洗、硅烷化和釉化等预处理。一、酸洗:通常用6mol/L盐酸浸泡载体,加热处理20~30min,然后用水冲洗至中性,用甲醇淋洗、烘干和过筛。也可以用王水或硝酸进行酸洗处理。载体经酸洗后,可
固定化细胞技术载体要求及常用载体介绍
①载体应是亲水的,疏水载体与有机溶剂相同的变性影响。②载体也是要求有一定的机械强度和稳定性。③常用的载体包括:1、天然高分子(纤维素、琼脂糖、淀粉、葡萄糖凝胶、胶原及其衍生物等)2、合成高聚物(尼龙。多聚氨基酸等)3、无机支持物(多孔玻璃、金属氧化物等)
RNAi表达载体构建
近年来的研究表明,一些短片断的双链RNA可以通过促使特定基因的mRNA降解来高效、特异的阻断体内特定基因表达,诱使细胞表现出特定基因缺失的表型, 称为RNA干扰(RNA interference,RNAi)。siRNA(small interfering RNAs)就是这种短片断双链RNA分子,能够
药物载体的介绍
药物载体,是指能改变药物进入人体的方式和在体内的分布、控制药物的释放速度并将药物输送到靶向器官的体系。
GPC载体的种类
GPC载体的种类:1. 交联聚苯乙烯凝胶2. 多孔性玻璃3. 聚乙酸乙烯酯凝胶及聚丙烯酰胺凝胶4. 木质素凝胶等
什么是微载体?
是指直径在60-250μm,能适用于贴壁细胞生长的微珠。一般是由天然葡聚糖或者各种合成的聚合物组成。
分子克隆常用载体
分子克隆常用载体 DNA片段的克隆需要合适的载体,载体或是质粒,或是噬菌体,或是病毒,通常大多经过人工改造[地的。作为载体必须具备两条件:一是该载体在细胞内必须能自主复制,即必须具备复制原点;二是该载体必须具备适合的酶切位点,且这些酶切位点不在复制原点区域内。以上两条,保证了载体的可繁殖性和可利用
质粒载体的分类
按复制形式分为严紧型和松弛型复制。根据质粒DNA复制与宿主之间的关系或在宿主细胞的拷贝数的多少,可以将质粒分为两种不同的复制类型:严紧型和松弛型。严紧型质粒复制受宿主染色体DNA复制的严格控制,拷贝数较小一般只有1~3个拷贝。疏松型质粒的复制宿主的控制比较松,在宿主中的拷贝数比较多,一般有10~20
什么是电子载体?
在的物质称为电子载体。参与传递的电子载体有四种(coenzyme Q),在这四类电子载体中,除了辅酶Q以外,接受和提供电子的氧化还原中心都是与蛋白相连的辅基。在线粒体电子传递系统(呼吸链)内起接受和提供电子或氢(由质子和电子组成)的物质称为电子载体,它们分别是各种脱氢酶的辅酶,如NAD+,FMN,F
pUC质粒载体结构
(1)来自于pBR322的Ori(2)氨苄青霉素的抗性基因(ampr)。 但核苷酸序列发生了变化(3) LacZ′基因编码β—半乳糖酶的α—肽链即氨基末端。(4)MCS区段是一段用于插入外源DNA片段的特定区域,由一系列的紧密相连的限制性内切酶位点组成,而且每个限制性内切酶位点在整个载体中是唯一的。
RNAi表达载体构建
近年来的研究表明,一些短片断的双链RNA可以通过促使特定基因的mRNA降解来高效、特异的阻断体内特定基因表达,诱使细胞表现出特定基因缺失的表型, 称为RNA干扰(RNA interference,RNAi).siRNA(small interfering RNAs)就是这种短片断双链RNA分子,能够
什么是质粒载体?
质粒载体是在天然质粒的基础上为适应实验室操作而进行人工构建的质粒。与天然质粒相比,质粒载体通常带有一个或一个以上的选择性标记基因(如抗生素抗性基因)和一个人工合成的含有多个限制性内切酶识别位点的多克隆位点序列,并去掉了大部分非必需序列,使分子量尽可能减少,以便于基因工程操作。
质粒载体是什么?
质粒载体是基因工程重要的载体之一。它是以质粒 DNA 分子为基础构建而成,主要用 于原核生物和植物的基因转移以及建立基因组文库和cDNA 文库。现在分子生物学使用的质粒载体都已不是原来细菌或细胞中天然存在的质粒,而是经过了许多的人工改造,从不同的实验目的出发,人们设计了各种不同类型的质粒载体。近年来
shRNA干扰载体构建
产品技术背景pRI系列载体是基于III类RNA聚合酶启动子:人类H1启动子的专用于哺乳动物细胞RNA干扰的载体。H1启动子在哺乳动物细胞内合成类似siRNA分子的小分子RNA。由于H1启动子有精确的转录起始位点和终止信号,H1启动子转录产物精确生成人工设计的shRNA,shRNA经过RISC剪切后形
简述siRNA表达载体
多数的siRNA表达载体依赖三种RNA聚合酶Ⅲ启动子(pol Ⅲ)中的一种,操纵一段小的发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)在哺乳动物细胞中的表达。这三类启动子包括大家熟悉的人源和鼠源的U6启动子和人H1启动子。之所以采用RNA pol Ⅲ启动子是由于它可以在哺乳动物细胞
shRNA干扰载体构建
产品技术背景pRI系列载体是基于III类RNA聚合酶启动子:人类H1启动子的专用于哺乳动物细胞RNA干扰的载体。H1启动子在哺乳动物细胞内合成类似siRNA分子的小分子RNA。由于H1启动子有精确的转录起始位点和终止信号,H1启动子转录产物精确生成人工设计的shRNA,shRNA经过RISC剪切后形
腺病毒载体综述
腺病毒的一般特性 腺病毒的形态是特征性的二十面体病毒壳体(Stewart et al., 1993)。其病毒壳体含有三种主要的蛋白:六邻体(II),五邻体基底(III)和纤突(IV),还有多种其他的辅助蛋白VI,VIII,IX,IIIa和Iva2(Fig. 1)。腺病毒基因组是一个线性的双链D
实验室分析方法色谱柱的载体是如何涂渍的
1、根据配比先称取一定量的固定液,溶解在有机溶剂中; 2、加入载体,溶剂应把载体没入,轻轻搅拌; 3、用红外灯照射使溶剂蒸发,溶剂挥发后涂渍完毕;
引起气液填充柱色谱仪载体表面活性的因素
气液填充柱色谱仪的理想载体表面应该无吸附活性和催化活性,在操作条件下不与固定液和样品组分发生反应。但是实际上载体表面完全没有吸附活性和催化活性是不可能的。实验表明,经过灼烧后制成的硅藻土型载体表面既有催化活性,又有吸附活性。当载体表面存在氢键活性作用点时,分离能与硅醇、硅醚形成氢键的化合物(如水、醇
实验室分析仪器气相色谱仪基础载体
载体:support 负载固定液的惰性固体。
引起气液填充柱色谱仪载体表面活性的因素
气液填充柱色谱仪的理想载体表面应该无吸附活性和催化活性,在操作条件下不与固定液和样品组分发生反应。但是实际上载体表面完全没有吸附活性和催化活性是不可能的。实验表明,经过灼烧后制成的硅藻土型载体表面既有催化活性,又有吸附活性。当载体表面存在氢键活性作用点时,分离能与硅醇、硅醚形成氢键的化合物(如水、醇
实验室分析仪器气相色谱液体固定相载体
液体固定相由固定液与载体制成。填充柱用的载体是固体颗粒,空心管柱则是其管柱的内壁。载体载体的作用是使固定液均匀地涂敷于其表面,以创建流动相和固定相间合适的气液界面。载体最基本的要求如下。颗粒大小:30~200μm,粒度分布窄,如(100±15)μm。颗粒形状:粒度均匀、形状规则(球形较好)。孔径:孔