肝脏细胞RNA的提取操作方法
一．原理RNA提取技术不仅是分子生物学技术的重要组成部分，也是功能基因组 学科研技术的重要基础。从RNA水平研究生物体内基因的调控机制，已成为分子生物学研究的一个重要手段。对某一生物或组织进行性状研究，首先要获得该性状基因，从组织细胞中分离完整的RNA对于分子克隆 和基因表达分析等实验是至关重要的，如Northern印迹及杂交分析、cDNA合成等实验的成效在很大程度上取决于RNA的质量。利用提取的RNA人们可以对特定的基因表达进行定量的检测，从分子水平精确的了解细胞生命活动的规律。通常一个典型的哺乳动物细胞约含有10-5μgRNA ，其中80%～85%为rRNA（主要是28S、18 S和5.8 S、5S四种类型）；10%～15%为tRNA和核内小分子RNA。这些高峰度的RNA的大小和序列确定，可通过凝胶电泳、密度梯度离心、阴离子交换层析和高压液相层析（HPLC）分离。相反，占RNA总量1%～5%的为mRNA ......阅读全文
细胞化学词汇反义RNA
中文名称：反义RNA外文名称：antisense RNA概 念：与mRNA互补的RNA分子作 用：抑制mRNA的翻译分 类：三类反义RNA是指与mRNA互补后，能抑制与疾病发生直接相关基因的表达的RNA。它封闭基因表达，具有特异性强、操作简单的特点，可用来治疗由基因突变或过度表达导
细胞化学词汇RNA沉默
中文名称：基因沉默外文名称：RNA silencing定 义：基因沉默是指在真核生物（植物、动物、真菌）中保守的由双链RNA诱导的鉴定和破坏其细胞质中异常变异或过表达的RNA的一种机制。
细胞化学词汇核仁RNA
中文名称：核仁RNA英文名称：nucleolar RNA定 义：核仁中的RNA。包括核糖体核糖核酸(rRNA)前体、核仁小RNA等。应用学科：生物化学与分子生物学（一级学科），核酸与基因（二级学科）
细胞化学词汇RNA假结
中文名称：RNA假结外文名称：RNA pseudoknot定 义：RNA中的一种常见的三级结构元件。RNA的茎环结构中的环上序列与其他部位(通常是邻近部位)的序列碱基配对，形成类似“打结”形状。
细胞化学词汇分支RNA
中文名称：分支RNA英文名称：branched RNA定 义：通过直链RNA中特定部位的2′-羟基与另一直链RNA(或同一RNA分子)的末端5′-磷酸基形成磷酸酯键而得到的RNA，见于Ⅱ型内含子自剪接和真核信使核糖核酸(mRNA)内含子剪接的中间体。应用学科：生物化学与分子生物学（一级学科），核酸
细胞化学词汇间隔RNA
中文名称：间隔RNA英文名称：spacer RNA定 义：初级转录物中由基因间序列编码产生的RNA序列。如哺乳动物核糖体核糖核酸(rRNA)的初级转录物位于18S rRNA和28S rRNA间的一段序列，这些序列不出现在成熟的rRNA中。应用学科：生物化学与分子生物学（一级学科），核酸与基因（二级
细胞化学词汇核RNA
中文名称：核RNA英文名称：nuclear RNA定 义：细胞核内的RNA。如核内不均一RNA、核小RNA、核仁小RNA等。应用学科：生物化学与分子生物学（一级学科），核酸与基因（二级学科）
细胞化学词汇微RNA
中文名称：微RNA外文名称：microRNAs别 名：又译小分子RNA解 释：内生的长度约20-24个核苷酸小RNA所属分类：真核生物定 义：微RNA（microRNAs；miRNA，又译小分子RNA）是真核生物中广泛存在的一种长约21到23个核苷酸的RNA分子，
细胞化学词汇转运RNA
中文名称：转运RNA外文名称：transfer ribonucleic acid，tRNA功 能：携带并转运氨基酸。转运RNA（Transfer RNA），又称传送核糖核酸、转移核糖核酸，通常简称为tRNA，是一种由76-90个核苷酸所组成的RNA，其3'端可以在氨酰-tRNA合
细胞总RNA的提取
提取细胞RNA的步骤：1) 六孔板每孔细胞中加入1ml Trizol，冰上放置5min，枪头吹打。2) 将各孔裂解液吸到1.5 ml EP管中，加入氯仿0.2ml/管，用力振摇15s。15－30℃下孵育2-3min，离心（4℃，12，000g，15min）。3) 离心后液体分为三层（上层－无色
细胞化学词汇互补RNA
中文名称：互补RNA英文名称：complementary RNA定 义：能与另一条核酸(DNA或RNA)链互补的RNA分子。应用学科：生物化学与分子生物学（一级学科），核酸与基因（二级学科）
细胞化学词汇RNA定位
中文名称：RNA定位英文名称：RNA localization定 义：RNA特异定位在细胞不同区域的过程。尤其是信使核糖核酸(mRNA)的定位对生长和发育是重要的。细胞质中RNA定位起始于细胞核，在核中被特异RNA结合蛋白识别，生成核糖核蛋白复合体，然后输出到细胞质。应用学科：生物化学与分子生物学
细胞化学词汇RNA包装
中文名称：RNA包装英文名称：RNA packaging定 义：特指病毒RNA通过其顺式作用元件被病毒核衣壳蛋白识别和包裹的过程。广义指核糖核蛋白颗粒的形成。应用学科：生物化学与分子生物学（一级学科），核酸与基因（二级学科）
细胞化学词汇RNA运输
中文名称：RNA运输英文名称：RNA trafficking定 义：将RNA引导到细胞的特定区域。细胞内的RNA运输对细胞的生理功能至关重要。核内RNA运输影响RNA的加工成熟和核输出；胞质RNA运输影响RNA的定位、运输和基因表达的水平。应用学科：生物化学与分子生物学（一级学科），核酸与基因（二
细胞化学词汇RNA复制
中文名称：RNA复制外文名称：RNA replication定 义：RNA复制是以RNA为模板合成RNA的过程，是除了逆转录病毒以外的其他RNA病毒的复制方式。有些生物,像某些病毒的遗传信息贮存在RNA分子中，当它们进入宿主细胞后，靠复制而传代，当它们以RNA模板时，在RNA复制酶作用下
细胞化学词汇RNA构象
中文名称：RNA构象英文名称：RNA conformation定 义：RNA分子的空间结构，构象改变并不导致共价键的断裂和生成。应用学科：生物化学与分子生物学（一级学科），核酸与基因（二级学科）
培养细胞中RNA检测
实验概要掌握培养细胞中RNA的检测方法。实验步骤1．制胶(1％)： 琼脂糖 2.5g 10×Mops缓冲液 25.0ml H2O 192.0ml2．在微波炉中加热煮沸使胶完全溶于水并灭菌。3．取出胶冷却到60℃，于通风柜中加45ml甲醛，混匀。4．加20μl溴化乙锭，混匀。5．令胶液再
细胞化学词汇RNA折叠
中文名称：RNA折叠英文名称：RNA folding定 义：新合成的或变性的RNA转变为特定的、成熟的三维结构构象的过程。应用学科：生物化学与分子生物学（一级学科），核酸与基因（二级学科）
细胞化学基础信使RNA
信使RNA（mRNA）最早发现于1960年，在蛋白质合成过程中负责传递遗传信息、直接指导蛋白质合成，具有以下特点。 1.含量低，占细胞总RNA的1%~5%。 2.种类多，可达105种。不同基因表达不同的mRNA。 3.寿命短，不同mRNA指导合成不同的蛋白质，完成使命后即被降解。细菌mRNA的平均半
细胞化学词汇RNA干扰
中文名称：RNA干扰外文名称：RNA interference定 义：RNA干扰（RNA interference，RNAi）是指在进化过程中高度保守的、由双链RNA（double-stranded RNA，dsRNA）诱发的、同源mRNA高效特异性降解的现象。分 类：基因沉
细胞化学词汇RNA靶向
中文名称：RNA靶向英文名称：RNA targeting定 义：(1)针对RNA分子设计的一种定向作用技术。包括一些小分子化合物(如抗生素)、反义核酸、反式作用核酶、适配体、干扰小RNA等的应用。(2)由于RNA分子本身具有较大的柔性，能专一地与RNA、DNA和蛋白质相互作用，而成为一种特异的靶向
细胞化学基础转移RNA
转移RNA（tRNA）在蛋白质合成过程中负责转运氨基酸、解读mRNA遗传密码。tRNA占细胞总RNA的10%~15%，绝大多数位于细胞质中。tRNA由Crick于1955年提出其存在，Zamecnik和 Hoagland于1957年鉴定。1.tRNA一级结构具有以下特点：①是一类单链小分子RNA，长
组织/细胞RNA快速提取
操作步骤：（实验前请先阅读注意事项）提示： 第一次使用前请先在漂洗液RW瓶和70%乙醇瓶中加入指定量无水乙醇! 操作前在裂解液RLT中加入β-巯基乙醇至终浓度1%，如1 ml RLT 中加入10μl β-巯基乙醇。此裂解液最好现用现配。配好的RLT 4℃可放置一个月。1. 组织培养细胞a. 收
细胞化学词汇RNA输出
中文名称：RNA输出英文名称：RNA export定 义：真核生物RNA从细胞核输送到细胞质的过程。游离RNA及其前体是不能直接通过核孔的，需要与许多RNA结合蛋白生成核糖核蛋白复合体，才能输出到细胞质行使功能。不同种类RNA需要不同的结合蛋白。核内的信使核糖核酸在切除内含子后才能输出。应用学科：
细胞RNA的提取方法
（一）细胞总RNA的提取1、6孔板细胞汇合度为90-100%时，取出无菌室，去其上清，用PBS洗两次后，每孔加TRIZOL试剂 1 ml，摇匀，无菌罩内消化3-5 min。2、将各孔内消化好的细胞裂解液吸到一DEPC处理过的1.5 ml EP管中，加新开的氯仿0.2 ml，轻摇15 s。3、室温静置
脂肪细胞RNA提取原理
氯仿是分子量比较大的有机溶剂，在提取RNA时，氯仿可以有效的使有机相和无机相迅速分离。DNA提取过程 有机相中主要是酚和蛋白结合，从而使得蛋白和DNA脱离，DNA进入水相。但是在RNA的提取过程就要避免蛋白和DNA脱离，否则DNA会释放到水相。不管有酚也好，没有酚也好，氯仿本身也对蛋白有变性作用，剧
细胞化学词汇RNA转运
中文名称：RNA转运英文名称：RNA transport定 义：RNA分子从一个细胞区室或区域移动到另一个细胞区室或区域的过程。各类不同RNA(如信使RNA、核小RNA、核糖体RNA和转移RNA)的转运遵循不同的机制。应用学科：生物化学与分子生物学（一级学科），核酸与基因（二级学科）
真核细胞总RNA的制备（Total－RNA－Isolation）2
Total RNA Isolation Guanidine-based isolation Objective: To obtain total RNA from zebrafish embryos. Required Materials Denaturing Solution
真核细胞总RNA的制备（Total－RNA－Isolation）1
从细胞中分离RNA的纯度于完整性对于许多分子生物学实验至关重要。如Northern印迹与杂交分析、寡聚（dT）纤维素选择分离 mRNA，cDNA合成及体外翻译等实验的成败，在很大程度上决定于RNA的质量。RNA分离的最关键因素是尽量减少RNA酶的污染。快速一步法提取总RNA组织及有核细胞在匀浆过程中
营养所发现小鼠肝脏小RNA存在多种修饰并和糖尿病相关
近日，Analytical Chemistry在线发表了中科院上海生命科学研究院营养科学研究所翟琦巍研究组的最新研究进展：A high-throughput quantitative approach reveals more small RNA modifications in mou