肝脏细胞RNA的提取操作方法
一．原理RNA提取技术不仅是分子生物学技术的重要组成部分，也是功能基因组 学科研技术的重要基础。从RNA水平研究生物体内基因的调控机制，已成为分子生物学研究的一个重要手段。对某一生物或组织进行性状研究，首先要获得该性状基因，从组织细胞中分离完整的RNA对于分子克隆 和基因表达分析等实验是至关重要的，如Northern印迹及杂交分析、cDNA合成等实验的成效在很大程度上取决于RNA的质量。利用提取的RNA人们可以对特定的基因表达进行定量的检测，从分子水平精确的了解细胞生命活动的规律。通常一个典型的哺乳动物细胞约含有10-5μgRNA ，其中80%～85%为rRNA（主要是28S、18 S和5.8 S、5S四种类型）；10%～15%为tRNA和核内小分子RNA。这些高峰度的RNA的大小和序列确定，可通过凝胶电泳、密度梯度离心、阴离子交换层析和高压液相层析（HPLC）分离。相反，占RNA总量1%～5%的为mRNA ......阅读全文
动物肝脏RNA的制备(苯酚法)和纯度测定(二苯胺显色法和...
动物肝脏RNA的制备(苯酚法)和纯度测定(二苯胺显色法和紫外吸收法[附2]二苯胺显色法测定DNA含量原理脱氧核糖核酸中的2-脱氧核糖在酸性环境中与二苯胺试剂一起加热产生蓝色反应，在595nm处有最大光吸收。 DNA在40-400 g范围内，光吸收与DNA的浓度成正比。在反应液中加入少量乙醛，可以
营养所发现小鼠肝脏小RNA存在多种修饰并和糖尿病相关
近日，Analytical Chemistry在线发表了中科院上海生命科学研究院营养科学研究所翟琦巍研究组的最新研究进展：A high-throughput quantitative approach reveals more small RNA modifications in mou
翟琦巍等发现小鼠肝脏小RNA修饰和糖尿病相关
中科院上海生科院营养科学研究所研究员翟琦巍小组在一项研究中，建立了一种同时检测单个RNA样品中超过40种核苷的方法，发现小鼠肝脏小RNA中存在多种修饰，并初步发现小RNA修饰和糖尿病存在相关性。相关论文在线发表于《分析化学》。 近年来，蛋白质修饰和DNA修饰研究引人关注，但目前对RNA修饰
成体干细胞对肝脏疾病的治疗作用
早在60多年前研究者就认为在成体肝脏中存在着肝干细胞，但直到现在仍然存在争议，很大一部分原因是没有肝干细胞的特异性基因得到确认，以及在部分严重肝损伤后的肝再生不需要激活肝干/祖细胞，成熟的原本处于静止期的肝细胞通过分裂也能很大程度发挥肝再生的作用。成体干细胞治疗肝脏疾病的另一个可能途径是利用造血
肝脏血管周上皮样细胞肿瘤病例分析
患者女，51岁。因体检发现肝右叶占位入院，无肝炎、肝硬化病史。CT：肝右叶类圆形团块状等低密度影、内见少量点状脂滴（图1），病灶大小约150mm×116mm×225mm，增强后动脉期明显不均匀强化，边缘清晰见假包膜（图2），门静脉期持续强化，延迟期与正常肝实质呈等密度强化（图3，4）；病灶由肝固有动
肝脏肿瘤如何逃脱自然杀伤细胞的“捕杀”？
NK细胞：正常细胞的“卫兵” 在人体中，存在着众多不同类型的细胞，自然杀伤细胞（Natural killer cells， NK cells）就是其中非常“奇妙”的一种。NK细胞是一种效应性免疫细胞，在机体抗肿瘤过程中发挥重要作用。它可以直接识别和攻击肿瘤细胞，还能间接通过分泌活性因子促进机体
Nature：终于找到你！肝脏干细胞来源揭秘
Nature杂志最新在线的一篇研究中，Howard Hughes医学研究所（HHMI）的科学家确定了能够分化为功能性肝细胞的干细胞。这项研究解开了关于肝脏不断新生的细胞到底从何而来的老谜团。研究的通讯作者，斯坦福大学HHMI研究员Roel Nusse博士说:“我们解决了一个很老的问题.我们发现，
肝脏血管周上皮样细胞瘤病例分析
患者男，65岁。丙肝抗体阳性16年余，间断肝区不适3年余入院。患者既往有高血压病史20余年。AFP8.3ng/ml。彩超：肝脏右后叶见1.8 cm×1.4 cm低回声结节，界清，形态规则，周边无声晕。MRI：肝右后叶见类圆形长T1长T2信号影，大小约17mm×19mm，边界清楚。增强后，肝右
动物实验表明――体细胞经诱导可转化为肝脏细胞
中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所惠利健研究小组新近完成的关于转化型肝脏细胞研究，在国际上首次证明了肝脏以外的体细胞可以被诱导直接转化为肝脏细胞。该研究论文于5月12日在线发表在国际顶尖学术刊物《自然》杂志上。有关专家认为，该研究为将来从病人自身体细胞诱导获得肝脏细胞奠定了基
纯化RNA实验——从培养的细胞中纯化总RNA
实验材料细胞试剂、试剂盒RNA 提取缓冲液变性液水饱和酚仪器、耗材培养皿Falcon 2063 管实验步骤1. 取 1 个细胞已长满的 100 ml 培养皿，吸出培养液，加 2 ml RNA 提取缓冲液，用橡胶刮棒刮下细胞。RNA 提取缓冲液：变性液，20 mlβ-巯基乙醇，0.144 ml2 mo
细胞化学词汇转移信使RNA
中文名称：转移-信使RNA英文名称：ransfer-messenger RNA;tmRNA定 义：一类兼有接受(携带)氨基酸和编码氨基酸的双功能RNA分子。其主要功能是在特定情况下可提前终止蛋白质的生物合成，以免产生不良产物。应用学科：生物化学与分子生物学（一级学科），核酸与基因（二级学科）
细胞化学词汇转移信使RNA
中文名称：信使RNA外文名称：Messenger RNA 定 义：信使RNA，中文译名“信使核糖核酸”，是由DNA的一条链作为模板转录而来的、携带遗传信息能指导蛋白质合成的一类单链核糖核酸。以细胞中基因为模板，依据碱基互补配对原则转录生成mRNA后，mRNA就含有与DNA分子中某些功能片
细胞化学词汇双义RNA
中文名称：双义RNA定 义：部分基因的表达需要先进行转录合成出亚基因组RNA，作为mRNA翻译出蛋白质
细胞化学词汇核小RNA
中文名称：核小RNA外文名称：small nuclearRNA定 义：核小RNA是真核生物转录后加工过程中RNA剪接体（spliceosome）的主要成分，参与mRNA前体的加工过程。
细胞化学词汇时序小RNA
中文名称：时序小RNA英文名称：small temporal RNA;stRNA定 义：一类长度约为22核苷酸的非编码RNA，是微RNA大家族的成员。与生物发育时间顺序调控有关，如早期报道的线虫lin-4和let-7时序小RNA。应用学科：生物化学与分子生物学（一级学科），核酸与基因（二级学科）
细胞化学词汇反式作用RNA
中文名称：反式作用RNA英文名称：trans-acting RNA定 义：通过分子间反应机制起作用的RNA。应用学科：生物化学与分子生物学（一级学科），核酸与基因（二级学科）
细胞化学词汇RNA衣壳化
中文名称：RNA衣壳化英文名称：RNA encapsidation定 义：RNA被蛋白质衣壳包裹生成RNA病毒的过程。应用学科：生物化学与分子生物学（一级学科），核酸与基因（二级学科）
总细胞RNA的提取方法
实验概要总细胞RNA的提取在建库过程中，由于cDNA合成这一步将使用通用引物oligo dT，因此在总RNA提取这一步中，提取纯化mRNA不是非常必要的。提取高纯度的总细胞RNA足可以被用作cDNA合成的模板，目前提取RNA的方法很多，也有不少商业化的试剂盒。实验步骤1. TRIZOL法 1)
细胞化学词汇单链RNA
中文名称：单链RNA英文名称：single-stranded RNA;ssRNA定 义：只含有一条链的RNA分子。生物体中绝大部分RNA是单链RNA，形成二级结构时，是既有单链、又有双链结构域的RNA分子；只有某些RNA病毒是由两条链互补而成的双链RNA。应用学科：生物化学与分子生物学（一级学科）
组织和细胞RNA的制备
一、 组织和细胞总RNA提取：异硫氰酸胍法（一）试剂准备1．CSB缓冲液：42mM柠檬酸钠；0.83% N-lauryl sarcosine(十二烷基，N甲基甘氨酸钠)；0.2 mM β-巯基乙醇。2．变性液：异硫氰酸胍（终浓度 4 M）25g、CSB缓冲液 33ml，混合直至完全溶解，可在65℃助
细胞质RNA提取实验
基本方案 实验材料 RNA 试剂、试剂盒
细胞质RNA提取实验
实验材料 RNA试剂、试剂盒 PBS细胞裂解液SDS蛋白酶K酚氯仿异戊醇无水乙醇仪器、耗材 离心机培养箱实验步骤 1. 对于单层培奍细胞（1）每10 cm 培养皿培养的细胞，用冰冷PBS洗涤3次。（2）每次1 ml 然后用小体积PBS刮下细胞，转移至冰浴的离心管中。（3）300 g 离心5 min
细胞质RNA提取实验
由于RNA的种类来源很多，因而提取制备方法各异，一般有苯酚法，去污剂法和盐酸胍法，其中苯酚法实验室最常用。组织匀浆后用苯酚处理离心，RNA即溶于上层被酚饱和的水相中，向水相加冷乙醇后， RNA即以白色絮状沉淀析出。此法较好除去DNA和蛋白质，且获得生物活性的RNA。实验材料RNA试剂、试剂盒PBS细
单细胞RNA测序发现新的免疫细胞
最近在《Nature Immunology》发表的一项新研究，详细检测了一组新发现的免疫细胞（被称为ILC）。通过对单个扁桃体细胞的基因表达进行分析，瑞典卡罗林斯卡学院的科学家们，发现了三个以前未知的ILC子群，并揭示了关于“这些细胞在人体中如何发挥功能”的更多信息。 先天淋巴细胞（ILC）是
从肝脏组织中制备细胞核实验
实验材料 大鼠 试剂、试剂盒 裂解缓冲液 浓蔗糖溶液
从肝脏组织中制备细胞核实验
实验材料大鼠试剂、试剂盒裂解缓冲液浓蔗糖溶液仪器、耗材超速离心机组织研磨器实验步骤1. 配制裂解缓冲液和浓蔗糖溶液（PMSF 在使用前添加），冰上放置。裂解缓冲液：0.25 mol/L 蔗糖网织红细胞标准缓冲液（RSB）0.25 mol/L 蔗糖（超级纯）10 mmol/ Tris-HCl (pH7
成体干细胞用于治疗肝脏疾病的方法介绍
早在60多年前研究者就认为在成体肝脏中存在着肝干细胞，但直到现在仍然存在争议，很大一部分原因是没有肝干细胞的特异性基因得到确认，以及在部分严重肝损伤后的肝再生不需要激活肝干/ 祖细胞，成熟的原本处于静止期的肝细胞通过分裂也能很大程度发挥肝再生的作用。成体干细胞治疗肝脏疾病的另一个可能途径是利用造血干
美科研团队发现“双刃剑”肝脏干细胞
美国一个科研团队日前发现一种“双刃剑”肝脏干细胞，它可在肝脏受损时产生新的肝脏细胞，但这种细胞过量又可能诱发肝癌细胞生成。美国斯坦福大学研究人员在新一期英国《自然》杂志上报告说，在小鼠正常肝脏细胞代谢或受损后，它们体内高水平表达端粒酶的肝脏干细胞可助器官再生。 端粒酶是一种与抗衰老有关的蛋
肝干细胞治疗肝脏疾病将成为可能
长期以来，终末期肝病在临床上一直缺乏有效治疗方法。第二军医大学基础部细胞生物学教研室主任胡以平教授课题组，通过4年艰辛攻关，终于在近日实现了小鼠成纤维细胞向肝干细胞分化的重编程，并证明了通过这种重编程方法所产生的肝干细胞，具有与活体内自然存在的肝干细胞相似的生物学特性。据此，肝干细胞治疗肝脏疾病
细胞化学词汇RNA稳定性
中文名称：RNA稳定性英文名称：RNA stability定 义：在改变细胞环境情况下，或当分离、纯化、保存，以及进行物理和化学操作时，RNA分子保留其原结构状态和抗拒降解的程度。应用学科：生物化学与分子生物学（一级学科），核酸与基因（二级学科）