杂化颗粒C18色谱柱和乙酸流动相进行肽的高载量研究三

基于此,CSH130 C18和BEH130 C18生成最佳峰形的流动相条件应该有所不同。为此,还使用10倍酸性的酸(1%HOAc)调节的流动相进行了分离。尽管中等浓度对于开发纯化工艺可能具有一定参考价值,但此处未对其进行评估。如图3所示,改变流动相组分后,CSH柱的峰形大大改善,但BEH柱的峰形变得更差。使用二者各自的最佳HOAc流动相时,BEH柱(0.1%HOAc)和CSH柱(1%HOAc)都能生成较窄的目标肽峰(半峰宽分别为0.5和0.6min)。为了参照,使用0.1%TFA作为离子对试剂进行了分离,如图3中右侧所示。在使用TFA时,CSH130 C18上的目标肽峰宽为0.6min,BEH130 C18上则为1.1min。无论选用哪种色谱柱填料,使用优化的HOAc流动相获得的肽目标峰都远远窄于TFA流动相。这些结果表明,乙酸流动相对于肽制备型分离更为实用。较窄的目标肽峰往往伴随着更高的杂质分离度,从而有机会收集到纯度更高......阅读全文

杂化颗粒C18色谱柱和乙酸流动相进行肽的高载量研究-三

基于此,CSH130 C18和BEH130 C18生成最佳峰形的流动相条件应该有所不同。为此,还使用10倍酸性的酸(1%HOAc)调节的流动相进行了分离。尽管中等浓度对于开发纯化工艺可能具有一定参考价值,但此处未对其进行评估。如图3所示,改变流动相组分后,CSH柱的峰形大大改善,但BEH柱的峰形变得

杂化颗粒C18色谱柱和乙酸流动相进行肽的高载量研究-一

应用优势■两种具备独特选择性的杂化颗粒色谱柱(BEH130 C18和CSH130 C18)。■在使用最优浓度的HOAc调节流动相时,BEH130 C18和CSH130 C18获得的目标肽峰比使用0.1%TFA时更窄,分离度也更高。利用这一特性,可以通过更少的步骤获得含有药用反离子的肽。■BEH130

杂化颗粒C18色谱柱和乙酸流动相进行肽的高载量研究-二

数据管理MassLynx软件4.1版结果与讨论含有九种组分的肽混合物的载量研究在之前的研究中,已经对CSH130 C18和BEH130 C18在分析型肽分离中的应用(例如肽图绘制)进行了广泛的探讨8-9。简而言之,与其他肽分离反相填料相比,CSH130 C18及其创新的表面带电技术能够改善峰形和载量

使用表面带电杂化(CSH)C18色谱柱提高反相肽分离的峰容量1

应用优势 反相肽分离的峰容量更高 与甲酸流动相兼容 有应用于UPLC®和HPLC的两种颗粒 CSH130 C18 使用细胞色素c 的胰蛋白 酶消化液进行QC检验沃特世解决方案 ACQUITY UPLC® H-Class Bio系统 Xevo® G2 QTof质谱仪 ACQUITY UPLC CSH1

使用表面带电杂化(CSH)C18色谱柱提高反相肽分离的峰容量2

结果与讨论肽分离 MassPREP肽混合物含有9种不同的肽,氨基酸组成、质量、长度和极性各有不同。肽序列如表1所示。由于该混合物由这样一组多样的肽组成,所以对于评价质谱性能和色谱性能是很有用的。鉴于此,相对于其他常用于肽分析的固定相,肽混合物被用作检测CSH130 C18的分离性能。本研究还包括用于

Waters高效液相色谱柱简单介绍与选择

生产高效液相色谱柱的厂家有很多,如Waters,Agilent,Phenomenex,Shimadzu,Thermo等,每家供应商又生产多个系列,导致市场上的液相色谱柱的可选择性极强。目前实验室以及公司,企业使用最多的是Waters以及Agilent所生产的RP液相色谱柱。Waters主要有Symm

Anavo杂化颗粒技术色谱柱全新上市

  色谱柱的发展,经历了从不定型硅胶到高纯球型硅胶、从低pH条件下不稳定到稳定的过程。但硅胶在高pH条件下极度不稳定的问题,始终没有很好的解决方案,直到杂化颗粒技术的诞生。  杂化颗粒集合了有机和无机填料的优点,既具有纯硅胶填料的高柱效、高机械强度及保留稳定性能,又具有聚合物填料的宽pH范围稳定性和

液相系统分离的“心脏”——色谱柱!

人们乐于把色谱柱比作液相系统的心脏,因为分析物的保留与分离,就发生在色谱柱上。今天,我们就来聊聊它,来聊聊“色谱心脏”的耐受性、选择性和效率问题:耐受性:我的小心脏要受不了了心脏是坚韧又娇嫩的器官,它的持续跳动确保生命,而它的任何病症都会影响人体的状态甚至生存。色谱柱也是如此,它的状态直接决定液相分

C18液相色谱柱色谱柱液相色谱柱

分析型到制备型一套完整的填料体系,目前可提供的填料键合相有C18、C4、C8、SI、NH2、CN、Phenyl、Diol以及手性填料TBB和 DMB。孔径有60A、100A和300A三种,满足不同条件的分析。填料粒径可以提供3.5um、5um、7um、10um、13um和16um六种。可谓品

七大特点确立-300Å-C18的优势应用地位

近年来,随着基因组和蛋白质组计划的实施,对不同蛋白质的快速分析,定性以及定量的需求更大,反相液相色谱以其快速简便,灵敏度高,重复性好,分辨率高等优势受到人们的重视,已成为一种常备的不可缺少的分析手段,并用于多肽药物分离中。反相液相色谱与各种质谱技术的结合也已成为蛋白质结构分析的重要手段和发展方向。C

色谱柱高pH不耐受?看AlphaHybrid-C18如何轻松应对碱性条件分析方法

硅胶颗粒在高pH条件下的溶解问题硅胶作为高效液相色谱柱的填料基质,尽管被广泛采用,但其性能并非完美无缺,存在一些固有的缺陷。通常认为,当硅胶填料长时间持续暴露在pH>8的环境中,硅胶骨架可能会发生溶解,这种溶解现象会导致柱效显著下降,峰形变差,保留时间缩短等问题,进而影响分析实验的正常进行。目前,关

色谱柱填料颗粒简介

  随着药物的不断创新,药物结构越发复杂,开发良好的药物分离方法成为人们面临的巨大挑战。高效液相作为一种有效的检测手段,在药物分析领域得到广泛应用,而色谱柱的选择则成为人们关注的焦点。众所周知色谱柱的键合相和基质颗粒共同影响其选择性,目前使用较为广泛的颗粒类型主要分为两类,全多孔硅胶颗粒和表面多孔硅

使用表面带电杂化(CSH)C18色谱柱提高反相肽分离的峰容量3

粒径和UPLC/HPLC的放大性 许多肽分离操作仍在传统的HPLC仪器上进行。因其背压过高,使用亚2 μm填充的色谱柱通常不适合与HPLC系统联用。而2.5 μm色谱柱因其背压较低可以在任何LC仪器上使用。为确定CSH130 C18,1.7μm色谱柱得到的峰容量是否可以成功转移到CSH130 C18

色谱柱的流动相

1、在进行样品检测前,至少使用20倍柱体积流动相使色谱柱充分平衡。流动相一定要使用色谱级别的溶剂。如使用水相的缓冲液应当天配制以保持新鲜避免细菌产生。2、流动相使用前需用微孔滤膜过滤,消除流动相中颗粒对色谱系统和色谱柱的损坏。缓冲液与其他流动相混合后应重新过滤避免溶解度变化造成产生新的沉淀。不应使用

沃特世推出新一代UPLC和HPLC色谱柱

  ACQUITY CSH和XSelect色谱柱采用表面带电杂化颗粒(Charged Surface Hybrid)技术重新定义了最广泛的分离选择性和最佳的性能   马萨诸塞州米尔福德市-2010年6月21日  沃特世(NYSE:WAT)公司推出新的ACQUITY®超高效液相色谱(U

不看不知道,原来-C18-柱有这么多选择技巧

  分析不同的样品时需要采用不同的柱子,而柱子的选择却难倒了不少“英雄汉”:  有时候样品在这根柱子上分不开,换一根也分不开,再换一根还是分不开  有时候发现两根 C18 柱子上的分离结果有着天壤之别  有时候使用速度更快的柱子,却又不太习惯  C18 柱,也叫 ODS 柱,是分析工作中使用最多,应

沃特世超高性能色谱柱应对氨基糖苷类抗生素药物分...

沃特世超高性能色谱柱应对氨基糖苷类抗生素药物分析监测难点氨基糖苷类抗生素分析难点:氨基糖苷类抗生素是一类含有氨基糖苷键的抗生素,抗菌谱广,对需氧革兰阴性杆菌具有强大的抗菌活性,临床应用广泛。该类抗生素由氨基糖与碱性1,3-二氨基肌醇以苷键结合而成,1,3-二氨基肌醇为碱性多元环己醇结构,因此氨基糖苷

高效液相色谱色谱柱的填料和流动相的组分

  应按各品种项下的规定,常用的色谱柱填料有硅胶和化学键合硅胶。后者以十八烷基硅烷键合硅胶最为常用辛基键合硅胶次之,氰基或氨基键合硅胶也有使用;离子交换填料用于离子交换色谱;凝胶或玻璃微球等,用于分子排阻色谱等。注样量一般为数微升。除另有规定外,柱温为室温,检测器为紫外吸收检测器。  在用紫外吸收检

用过流动相三乙胺的色谱柱如何清洗

可以加大水相的比例冲洗啊,水相90%都可以的。我也用过三乙胺的流动相

想知道色谱柱的寿命延长方式有哪些?

 色谱柱的利用寿命,除了与所分析的样品和流动相及利用频率有关系外,主要的是与日常的委会密切相关。为延长色谱柱的利用寿命,维护您的利益,请仔细阅读此部分。 色谱柱的利用寿命主要是分局柱效和柱压两个指标来衡量,假设一支色谱柱柱效太低或柱压太高,通常被认为该色谱柱已经结束。因此,延长色谱柱利用寿命的关键是

C18液相色谱柱的维护

液相色谱柱中使用最多的就是C18色谱柱了,下面整理的有关C18液相色谱柱的基本维护,希望能给大家一些帮助。  1.色谱柱的流向不能改变  在我们常规思维中,色谱柱上标示的流向是不可改变的,每次使用都要遵循。可是,大家有没有想过这个方向的作用是什么呢?为什么要标示一个使用方向呢?其实色谱柱前后端的填料

高效液相色谱色谱柱的填料和流动相的组分介绍

  应按各品种项下的规定,常用的色谱柱填料有硅胶和化学键合硅胶。后者以十八烷基硅烷键合硅胶最为常用辛基键合硅胶次之,氰基或氨基键合硅胶也有使用;离子交换填料用于离子交换色谱;凝胶或玻璃微球等,用于分子排阻色谱等。注样量一般为数微升。除另有规定外,柱温为室温,检测器为紫外吸收检测器。  在用紫外吸收检

流动相色谱柱怎么使用?

1、在进行样品检测前,至少使用20倍柱体积流动相使色谱柱充分平衡。流动相一定要使用色谱级别的溶剂。如使用水相的缓冲液应当天配制以保持新鲜避免细菌产生。2、流动相使用前需用微孔滤膜过滤,消除流动相中颗粒对色谱系统和色谱柱的损坏。缓冲液与其他流动相混合后应重新过滤避免溶解度变化造成产生新的沉淀。不应使用

最强实用攻略-|-方法开发时,如何选择-C18-色谱柱?

在色谱方法开发过程中,分离度、柱效、峰形是考察色谱柱选择性是否合适的主要性能指标。 方法开发中的分离度根据分离度(Rs)公式,分离度的影响因素主要有柱效(N)、选择性(α)和保留因子(或称容量因子,k):(公式 1)公式1作为分离度改善的理论基础。通常,方法开发过程中,通过提高化合物保留 (k)、提

药品研发中HPLC液相色谱柱的选择和流动相的优化

分析方法的开发主要包括色谱柱的选择、流动相的选择、检测波长的选择和梯度的优化几个方面。目前高效液相色谱法(HPLC)多使用反相色谱法,本文主要以反相为例讲解。 1.液相色谱柱的选择 原料药生产对产品的纯度和杂质含量的要求非常苛刻,要求检测使用的色谱柱有较高的理论塔板

药品研发中HPLC液相色谱柱的选择和流动相的优化

     分析方法的开发主要包括色谱柱的选择、流动相的选择、检测波长的选择和梯度的优化几个方面。目前高效液相色谱法(HPLC)多使用反相色谱法,本文主要以反相为例讲解。1.液相色谱柱的选择      原料药生产对产品的纯度和杂质含量的要求非常苛刻,要求检测使用的色谱柱有较高的理论塔板数,能提

多肽纯化十问十答

  1. 多肽含量与多肽纯度有什么区别?   一条多肽产品中除了多肽本身还包括生产过程中带入的水份及有机盐分等杂质,多肽纯度仅指多肽本身所含肽产品的含量及杂质的含量,不包括水份等杂质;而多肽含量则是指目标多肽在产品中的净含量,一般以N元素分析或氨基酸分子的方法来检测;因此一条多肽即使纯度达到99

关于多肽纯化的问题解答

  1. 多肽含量与多肽纯度有什么区别?   一条多肽产品中除了多肽本身还包括生产过程中带入的水份及有机盐分等杂质,多肽纯度仅指多肽本身所含肽产品的含量及杂质的含量,不包括水份等杂质;而多肽含量则是指目标多肽在产品中的净含量,一般以N元素分析或氨基酸分子的方法来检测;因此一条多肽即使纯度达到99

C18柱是正相还是反相色谱柱

C18柱是反相色谱柱,CN柱是正相色谱柱。正相色谱是采用极性固定相(如带有二醇基、氨基、和氰基的固定相及硅胶、三氧化二铝等)、非极性流动相(如正己烷等)的分离方法。这是一种根据分子的极性大小将其分开的液相色谱技术。反相色谱(RPC)是指利用非极性的反相介质为固定相,极性有机溶剂的水溶液为流动相,根据

C18柱是正相还是反相色谱柱

C18柱是反相色谱柱,CN柱是正相色谱柱。正相色谱是采用极性固定相(如带有二醇基、氨基、和氰基的固定相及硅胶、三氧化二铝等)、非极性流动相(如正己烷等)的分离方法。这是一种根据分子的极性大小将其分开的液相色谱技术。反相色谱(RPC)是指利用非极性的反相介质为固定相,极性有机溶剂的水溶液为流动相,根据