使用表面带电杂化(CSH)C18色谱柱提高反相肽分离的峰容量2
结果与讨论肽分离 MassPREP肽混合物含有9种不同的肽，氨基酸组成、质量、长度和极性各有不同。肽序列如表1所示。由于该混合物由这样一组多样的肽组成，所以对于评价质谱性能和色谱性能是很有用的。鉴于此，相对于其他常用于肽分析的固定相，肽混合物被用作检测CSH130 C18的分离性能。本研究还包括用于高效分离混合物中大孔径肽(100 Å ~ 300 Å)的固定相，这些肽的分子量均低于 3kDa。另一个单独的应用纪要对使用130 Å孔径的CSH130 C18分离更大的多肽进行了讨论。11为了研究相关性，使混合物中每种肽的上样量与抗体肽图所用的常用条件接近，其中20 ~ 50 μg的Lys-C消化液或胰蛋白酶消化液一般在内径为2.0 mm或2.1 mm的色谱柱上进行分析。2,12-13同样，分离使用含有强离子对试剂TFA、较弱的离子对试剂FA或两者结合的流动相完成。肽反相分离通常与质谱联用，在各种条件下得到的性能颇引人注意。在这些应用......阅读全文
如何选择液相色谱柱
由于篇幅的原因色谱柱相关能查阅到的基础理论本文就不予介绍，本文阐述的内容主要是本人在分析实际工作中选择液相色谱柱的心得体会，个人之见，难免偏颇，如有不足，敬请指正。一、色谱柱参数及其意义选择色谱柱时应考虑不同色谱柱参数的影响，以下内容对色谱柱的参数进行分析。1、色谱柱尺寸较长的色谱柱组分保留较强，运
蛋白质和多肽反相HPLC分析和纯化指南（十七）
选择分离表面。硅胶表面改性所用的化学过程允许多种有机基团附着在硅胶表面。最常见的改性是键合一条十八碳线性脂肪链，形成“C18”柱或ODS柱（图10A）。如图所示，有机氯硅烷与大多数硅烷醇基反应，但仍有部分不反应，这会在硅胶表面形成一层较厚的碳氢化合物层。蛋白质和多肽可以吸附到该碳氢化合物层。C18柱
色谱柱高pH不耐受？看AlphaHybrid－C18如何轻松应对碱性条件分析方法
硅胶颗粒在高pH条件下的溶解问题硅胶作为高效液相色谱柱的填料基质，尽管被广泛采用，但其性能并非完美无缺，存在一些固有的缺陷。通常认为，当硅胶填料长时间持续暴露在pH>8的环境中，硅胶骨架可能会发生溶解，这种溶解现象会导致柱效显著下降，峰形变差，保留时间缩短等问题，进而影响分析实验的正常进行。目前，关
HPLC的固定相和流动相（二）
2．键合相的种类化学键合相按键合官能团的极性分为极性和非极性键合相两种。常用的极性键合相主要有氰基(-CN)、氨基(-NH2)和二醇基(DIOL)键合相。极性键合相常用作正相色谱，混合物在极性键合相上的分离主要是基于极性键合基团与溶质分子间的氢键作用，极性强的组分保留值较大。极性键合相有时也可作反相
蛋白质和多肽反相HPLC分析和纯化指南（四）
柱内径由于样品容量很低，纯化过程很少使用小孔柱（内径小于2mm）。小规模实验室纯化采用细孔柱（内径约2mm）和分析柱（4.6 mm内径）。这种小规模制备分离的色谱条件通常与分析分离的色谱条件相同。需要大量蛋白质/多肽时，采用10mm和22mm内径的柱子。1 mg蛋白质或多肽的纯化可采用10 mm柱子
反相色谱柱
反相色谱柱
极性改性反相色谱柱有哪些新特性
Spursil HPLC 极性改性反相色谱柱是以高纯硅胶为基质，采用独特的极性改性技术生产的色谱柱。这个系列的色谱柱不但保留了传统硅胶基质反相色谱柱的性能，而且又增加了一些新的特性： * 填料表面具有极性基团，适合于高水相流动相条件下的分离；* 增强了对亲水性、极性化合物的保留能力；* 独特的选择性
利用eXtended－Performance（XP）色谱柱改进美国药典...（二）
在HPLC仪器上使用XP色谱柱进行有机杂质分析噻康唑的有机杂质分析方法需要使用L1专用色谱柱，为该分离而列出的色谱柱是LiChrosorb RP-182。参照沃特世反相液相色谱柱选择表，本文选用更先进的XSelect CSH C18固定相色谱柱。之所以选择XSelect CSH C18色谱柱是由于其
使用超高效合相色谱(UPC2)分析短杆菌肽（一）
关键词超高效合相色谱、UPC2、疏水性肽、短杆菌肽 简介用反相液相色谱(RPLC)分析疏水性肽和蛋白质难度很大，因为溶液中经常需要使用洗涤剂保持疏水性物质的稳定性，而这些洗涤剂容易发生聚集和/或沉淀，严重影响它们的回收，这些因素以及其它原因使得难以用RPLC分离疏水性肽和蛋白质。 在本应用纪要中，我
简单介绍一下每种色谱柱的适用范围
1、C18柱C18色谱柱是最常用、每个实验室必备的通用型色谱柱。填料是硅胶基质上键合十八烷基，有较高的碳含量和较好的疏水性，适用于大多数化合物，包括非极性、极性小分子及一些多肽及蛋白质。随着每家色谱柱制造商的研发，C18柱的类型还在不断增加。适用pH范围由原来的2～8，发展到现在1～14，与纯水相的
不同色谱柱的适用范围
1、C18柱C18色谱柱是最常用、每个实验室必备的通用型色谱柱。填料是硅胶基质上键合十八烷基,有较高的碳含量和较好的疏水性,适用于大多数化合物,包括非极性、极性小分子及一些多肽及蛋白质。随着每家色谱柱制造商的研发,C18柱的类型还在不断增加。适用pH范围由原来的2～8,发展到现在1～14,与纯水
HPLC基础知识教程(十二)
二、化学键合固定相 将有机官能团通过化学反应共价键合到硅胶表面的游离羟基上而形成的固定相称为化学键合相。这类固定相的突出特点是耐溶剂冲洗，并且可以通过改变键合相有机官能团的类型来改变分离的选择性。 1．键合相的性质 目前，化学键合相广泛采用微粒多孔硅胶为基体，用烷烃二甲基氯硅烷或烷氧基硅烷
不可不知！最全的液相色谱柱知识分享和选择技巧
众所周知，现代高效液相色谱分析中，色谱柱的选择直接影响了分离效果的好坏，选择合适的色谱柱可以缩短方法开发所需的时间，并且使方法更具稳定性。但是现在市场上色谱柱种类繁多，不同类型的色谱柱分离对象不同，因此，要做合适的选择，必须对此有一定的认识和了解。 色谱柱参数物理性质 柱长，内径，如25
最全的液相色谱柱知识分享和选择技巧
现代高效液相色谱分析中，色谱柱的选择直接影响了分离效果的好坏，选择合适的色谱柱可以缩短方法开发所需的时间，并且使方法更具稳定性。但是现在市场上色谱柱种类繁多，不同类型的色谱柱分离对象不同，因此，要做合适的选择，必须对此有一定的认识和了解。色谱柱参数物理性质柱长，内径，如250*4.6mm。一般柱长在
最全的液相色谱柱知识分享和选择技巧
现代高效液相色谱分析中，色谱柱的选择直接影响了分离效果的好坏，选择合适的色谱柱可以缩短方法开发所需的时间，并且使方法更具稳定性。但是现在市场上色谱柱种类繁多，不同类型的色谱柱分离对象不同，因此，要做合适的选择，必须对此有一定的认识和了解。 色谱柱参数 物理性质 柱长，内径，如250*4.6mm
不可不知！Z全的液相色谱柱知识分享和选择技巧
，现代液相色谱分析中，色谱柱的选择直接影响了分离效果的好坏，选择合适的色谱柱可以缩短方法开发所需的时间，并且使方法更具稳定性。但是现在市场上色谱柱种类繁多，不同类型的色谱柱分离对象不同，因此，要做合适的选择，必须对此有一定的认识和了解。 色谱柱参数物理性质 柱长，内径，如250*4.6mm。
最全的液相色谱柱知识和选择技巧
众所周知，现代高效液相色谱分析中，色谱柱的选择直接影响了分离效果的好坏，选择合适的色谱柱可以缩短方法开发所需的时间，并且使方法更具稳定性。但是现在市场上色谱柱种类繁多，不同类型的色谱柱分离对象不同，因此，要做合适的选择，必须对此有一定的认识和了解。 色谱柱参数物理性质 柱长，内径，如250*4.6m
使用超高效合相色谱分析短杆菌肽
使用超高效合相色谱( UPC2 )分析短杆菌肽 Sean M. McCarthy, Andrew J. Aubin, 和 Michael D. Jones 沃特世公司(美国马萨诸塞州米尔福德)应用效益 ■ 快速分离短杆菌肽 ■ 载量线性响应 ■ 准确、高精度分析短杆菌肽的方法 ■ 有可能用于其它疏水
使用超高效合相色谱分析短杆菌肽
使用超高效合相色谱( UPC2 )分析短杆菌肽 Sean M. McCarthy, Andrew J. Aubin, 和 Michael D. Jones 沃特世公司(美国马萨诸塞州米尔福德) 应用效益 ■ 快速分离短杆菌肽 ■ 载量线性响应 ■ 准确、高精度
第21届色谱会大会报告（续－）不断挖掘色谱新潜力
分析测试百科网讯 2017年5月21日，第21届全国色谱学术报告会及仪器展览会继陈洪渊、杨芃原、李攻科、王亚韡、王勇、和冯钰锜6位专家精彩的报告后（相关报道：6位学者献技第21届色谱会 色谱“玩”出新花样），中国科学院大连化学物理研究所许国旺、北京大学化学与分子工程学院刘虎威、浙江大学潘远江、中
色谱柱的选择原则
高效液相色谱分析中，色谱柱的选择直接影响了分离效果的好坏，选择合适的色谱柱可以缩短方法开发所需的时间，并且使方法更具稳定性。 现在商品化的液相色谱柱琳琅满目，根据色谱柱的参数可以给我们提供一个初步的选择，但由于各个仪器厂商的填料技术和键合技术都有差异。即使都是C18柱，不同品牌、同一品牌不同系
色谱柱的选择原则
高效液相色谱分析中，色谱柱的选择直接影响了分离效果的好坏，选择合适的色谱柱可以缩短方法开发所需的时间，并且使方法更具稳定性。 现在商品化的液相色谱柱琳琅满目，根据色谱柱的参数可以给我们提供一个初步的选择，但由于各个仪器厂商的填料技术和键合技术都有差异。即使都是C18柱，不同品牌、同一品牌不同系
利用eXtended－Performance(XP)色谱柱改善分离度
目标证明在应对分离挑战时，XP 2.5 µm色谱柱相较于传统HPLC粒径色谱柱具有更好的分离性能。 背景将方法转移至较小粒径上可以缩短分析时间已成为共识。其实，这样做还可以改善分离度。但是，随着粒径变小，柱压将会增加。使用亚2µm色谱柱可能需要用到UPLC®系统，但HPLC用户通过将HPLC方法转移
利用XP2.5－µm色谱柱改善分离度
目标 证明在应对分离挑战时，XP 2.5 µm色谱柱相较于传统HPLC粒径色谱柱具有更好的分离性能。 背景 将方法转移至较小粒径上可以缩短分析时间已成为共识。其实，这样做还可以改善分离度。但是，随着粒径变小，柱压将会增加。使用亚2µm色谱柱可能需要用到UPLC®系统，但HPLC用户
2.5－µm色谱柱改善分离度
目标 证明在应对分离挑战时，XP 2.5 µm色谱柱相较于传统HPLC粒径色谱柱具有更好的分离性能。 背景 将方法转移至较小粒径上可以缩短分析时间已成为共识。其实，这样做还可以改善分离度。但是，随着粒径变小，柱压将会增加。使用亚2µm色谱柱可能需要用到UPLC®系统，但HPLC用户
柱填料和柱规格对C18色谱柱有哪些影响？
高效液相色谱（HPLC）法选择性高、灵敏度高、分析速度快，而且大部分可以溶解的药物能用该法分析，所以该技术已经成为药物分析的首要选择。以碳十八硅烷化学键合硅胶固定相（C18或ODS）的反相色谱出色地完成了液相色谱分析任务，而且与其他色谱相比，C18反相色谱有明显的优势，它可直接进样分析水溶性样品，因
系统化的方法开发和验证（三）
反相保留性能：分析pH值如何影响反相色谱分析中的保留时间和稳定性是很重要的，为了得到可电离化合物的最佳保留性能，被测物不应带电或被离子化，因此酸性被测物应该使用低pH值，碱性被测物应该使用高pH值，中性材料不带可电离基团，因此不受pH值影响。这些曲线也可被看作滴定曲线，其拐点是分子的表观pKa值，因
C4反相色谱柱特点及试用范围
C4反相色谱柱特点：1、定量结果更准确、更精确： （1）纯度分析。 （2）稳定性分析。 2、灵敏度更高： 检测下限更低，对低浓度杂质有更强的检测能力。 3、分离度更好： 更有利于相邻色谱峰的分离。 4、色谱柱间重现性： 指同一批次合成的填料之间的重现性。 （1）柱床填充质量控制： 1）理论塔板数。
化学键合固定相基本理论
化学键合固定相的基本理论将有机官能团通过化学反应共价键合到硅胶表面的游离羟基上而形成的固定相称为化学键合相。这类固定相的突出特点是耐溶剂冲洗，并且可以通过改变键合相有机官能团的类型来改变分离的选择性。1.键合相的性质目前，化学键合相广泛采用微粒多孔硅胶为基体，用烷烃二甲基氯硅烷或烷氧基硅烷与硅胶表面
关于YMC色谱柱的再生
高效液相色谱仪色谱柱在色谱分析系统中主要起着分离物质的作用，是液相色谱的核心部件，同时也是损耗品。样品中所含有的盐、脂质、疏水蛋白质和其它一些生物物质都有可能与色谱柱发生相互作用，一些保留值较小的物质如盐类比较容易被冲出色谱柱，而一些保留性较强的组分，流动相溶液不足以把这些物质洗脱下来，多次上样后，