使用表面带电杂化(CSH)C18色谱柱提高反相肽分离的峰容量2
结果与讨论肽分离 MassPREP肽混合物含有9种不同的肽,氨基酸组成、质量、长度和极性各有不同。肽序列如表1所示。由于该混合物由这样一组多样的肽组成,所以对于评价质谱性能和色谱性能是很有用的。鉴于此,相对于其他常用于肽分析的固定相,肽混合物被用作检测CSH130 C18的分离性能。本研究还包括用于高效分离混合物中大孔径肽(100 Å ~ 300 Å)的固定相,这些肽的分子量均低于 3kDa。另一个单独的应用纪要对使用130 Å孔径的CSH130 C18分离更大的多肽进行了讨论。11为了研究相关性,使混合物中每种肽的上样量与抗体肽图所用的常用条件接近,其中20 ~ 50 μg的Lys-C消化液或胰蛋白酶消化液一般在内径为2.0 mm或2.1 mm的色谱柱上进行分析。2,12-13同样,分离使用含有强离子对试剂TFA、较弱的离子对试剂FA或两者结合的流动相完成。肽反相分离通常与质谱联用,在各种条件下得到的性能颇引人注意。在这些应用......阅读全文
2010北京色谱年会成功召开
色谱分离材料的科学与艺术 博纳艾杰尔科技有限公司市场部经理杨定忠先生作了题为《色谱分离材料的科学与艺术》的报告,主要介绍了硅胶表面处理技术、新型酰胺键合硅胶色谱柱和Optimix技术等内容。 博纳艾杰尔科技有限公司 杨定忠 经理 硅胶表面处理技术 键合硅胶表面处
C18反相液相色谱柱的特点和操作步骤
C18反相液相色谱柱是一种常用的色谱柱产品,主要由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成,被广泛用于多个领域中。在c18反相液相色谱柱的使用中,保持色谱柱的柱效、容量和渗透特性,延长柱子的使用寿命非常重要。使用时间后就会出现柱压升高、柱效降低、峰形畸变和分离度降低、保留时间改变等变化
C18反相液相色谱柱的特点和操作步骤
C18反相液相色谱柱是一种常用的色谱柱产品,主要由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成,被广泛用于多个领域中。在c18反相液相色谱柱的使用中,保持色谱柱的柱效、容量和渗透特性,延长柱子的使用寿命非常重要。使用时间后就会出现柱压升高、柱效降低、峰形畸变和分离度降低、保留时间改变等变化
正确的使用聚合物基质色谱柱是极其重要的
聚合物基质色谱柱具有相当强的硬度,有无孔和有孔两种规格。该固定相中含有苯基官能团,可与待测物发生疏水相互作用。聚合物基质色谱柱广泛用于各种不同基质中糖分子、糖醇和其他水溶性物质的分离。Carbo-H可以用来分析有机酸及利巴韦林等物质,Carbo-Ca可以用来分离树胶醛糖、阿糖醇等糖类。聚合物基质色谱
液相色谱柱通论
选择液相色谱柱简单思路1. 确定分离目的 确定你的应用是否要求高分离度、短分析时间、高灵敏度、长柱寿命,低的操作成本等等。2. 评估分析物的化学性质 评估分析物的化学性质. . 诸如化学结构、溶解性、稳定性等等。3. 选择合适的色谱柱 了解色谱填料的物理和化学性
液相色谱柱通论
选择液相色谱柱简单思路1. 确定分离目的 确定你的应用是否要求高分离度、短分析时间、高灵敏度、长柱寿命,低的操作成本等等。2. 评估分析物的化学性质 评估分析物的化学性质. . 诸如化学结构、溶解性、稳定性等等。3. 选择合适的色谱柱 了解色谱填料的物理和化学性质。A填
C18反相液相色谱柱的特点和操作步骤
反相液相色谱柱是一种常用的色谱柱产品,主要由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成,被广泛用于多个领域中。在c18反相液相色谱柱的使用中,保持色谱柱的柱效、容量和渗透特性,延长柱子的使用寿命非常重要。使用时间后就会出现柱压升高、柱效降低、峰形畸变和分离度降低、保留时间改变等变化,如不
选择液相色谱柱简单思路
1. 确定分离目的 确定你的应用是否要求高分离度、短分析时间、高灵敏度、长柱寿命,低的操作成本等等。2. 评估分析物的化学性质 评估分析物的化学性质,诸如化学结构、溶解性、稳定性等等。3. 选择合适的色谱柱 了解色谱填料的物理和化学性质。A填料基质硅胶基质:纯度高成本低
如何正确选择液相色谱柱
一、色谱柱参数及其意义选择色谱柱时应考虑不同色谱柱参数的影响,以下内容对色谱柱的参数进行分析。1、色谱柱尺寸较长的色谱柱组分保留较强,运行时间较长,柱效更高,分离度效果更好。在实际工作中应综合衡量运行时间和柱效,选择长度适宜的色谱柱。例如含量测定、溶出检测对于分离的要求较低,可选用较短的色谱柱,减少
怎样选择色谱柱?(一)
怎样选择色谱柱 现代高效液相色谱中,分离效果好坏很大程度上取决于色谱填料的选择.但是色谱填料的选择范围很宽,要做合适的选择,必须对此有一定的认识和了解. 1,正相色谱 正相色谱用的固定相通常为硅胶(Silica),以及其他具有极性官能团,如胺基团 (NH2,APS)和氰基团(CN,CPS)的键合相
利用eXtended-Performance(XP)色谱柱改进美国药典...(一)
利用eXtended Performance(XP)色谱柱改进美国药典(USP)噻康唑有机杂质分析方法关键词美国药典方法、噻康唑、ACQUITY UPLC色谱柱计算器、沃特世反相色谱柱选择表、仿制药引言全世界的制药企业在日常工作中都需要对仿制药中的有机杂质进行分析。使用较为陈旧的仪器和色谱柱技术进行
实验室分析方法反向液相色谱法原理及发展
反相液相色谱(RPLC)是分离大多数常规样品的首选分离模式,它比其他液相色谱分离模式的适用范围更宽、更方便。据统计,在高效液相色谱法中,70%~80%的样品可采用反相键合相色谱法完成。极性、非极性,水溶性、油溶性,离子性、非离子性,小分子、大分子,以及具有官能团差别或分子量差别的同系物,均可采用反相
色谱柱及填料介绍
高效液相色谱(HPLC)是一种现代分离、分析方法。20世纪60年代以来,HPLC作为一种分析技术在生命科学、环境科学、药物分析等领域的应用日益普遍。其中色谱填料可谓是色谱技术的核心,它不仅是色谱方法建立的基础,而且是一种重要的消耗品。色谱柱作为色谱填料的载体,当之无愧被称为色谱仪器的“心脏”。高性能
沃特世公司的最新色谱柱技术与方法研讨会在京沪举办
2010 年 9 月 15 日北京—— 沃特世公司的最新色谱柱技术与方法研讨会在京沪举办。研讨会主要详细介绍了 沃特世公司于今年 6 月向全球新推出的 ACQUITY CSH ™ 和 XSelect ™ HPLC 色谱柱。沃特世新一代的色谱柱 采用表面带电杂化颗粒( Charged Surfac
如何选择液相色谱柱?(一)
现代高效液相色谱中,分离效果好坏很大程度上取决于色谱填料的选择中。但是色谱填料的选责范围很宽,要做合适的选择,必须对此有一定的认识和了解。一. 硅胶基质填料 1, 1, 正相色谱正相色谱用的固定相通常为硅胶(Silica),以及其他具有极性官能团,
色谱柱在液相色谱中发挥重要作用
色谱柱采用反相流动相体系,而按照正相顺序出峰。通过亲水性相互作用,可有效的分离反相色谱柱中因保留能力弱而难分离的强极性化合物。是一种分离机理,而具备这种分离机理的键合相种类非常多。 色谱柱是高效液相分离系统的中重要的环节,业内常把色谱柱比喻为液相色谱的心脏。液相色谱柱根据极性分为正相柱和反相
带你走出HPLC和UHPLC色谱柱的十大误区(一)
色谱柱由柱管、压帽、卡套(密封环)、筛板(滤片)、接头、螺丝等组成,是装填有固定相用以分离混合组分的柱管,多为金属或玻璃制作,有直管形、盘管形、U形管等形状。色谱柱可分为填充柱和开管柱两大类,液相色谱通常均采用填充柱,色谱柱的分离效果取决于所选择的固定相,以及色谱柱的制备和操作条件。误区1
怎样清洗受强保留组分污染的C18反相柱色谱柱
一般来说正相与反相是相对于使用的流动相与柱子的极性比来说的,这样更为科学,但一般情况下,用c18柱,它毕竟是非极性色谱柱基本上用于反相色谱,也以说可以认为是反相柱,而cn柱一般可用于正相与可用于反相,说是正相或反相不太科学了。
如何正确选择液相色谱柱
一、色谱柱参数及其意义选择色谱柱时应考虑不同色谱柱参数的影响,以下内容对色谱柱的参数进行分析。1、色谱柱尺寸较长的色谱柱组分保留较强,运行时间较长,柱效更高,分离度效果更好。在实际工作中应综合衡量运行时间和柱效,选择长度适宜的色谱柱。例如含量测定、溶出检测对于分离的要求较低,可选用较短的色谱柱,减少
高效离子色谱柱研究
离子色谱(IC)发展已经有四分一个世纪,作为一种独立的色谱分枝,并在许多领域得到广泛应用。 但离子色谱(IC)与其相似的色谱高效液相色谱(HPLC)相比,柱效要低很多(约为HPLC的1/3),而价格则要高很多(约HPLC的3到5倍)。 提高离子色谱的柱效,是离子色谱研究急需解决的问题,也将是推动离子
天津市第22届色谱技术交流会在津召开-共享色谱新技术
分析测试百科网讯2016 年 8 月 30 日两年一届的天津市色谱学术会议在天津市南开大学召开。本届会议由天津市色谱研究会主办,并得到了岛津公司的大力支持。本次会议以前沿色谱、质谱新方法、新技术及其应用的最新进展为主题,100余色谱、质谱专家、学者充分交流了近年来色谱质谱及其相关领域的最新研究成
使用阿片类药物进行超高效合相色谱检测条件的...(二)
采用图1中所选流动相添加剂对不同色谱柱进行筛选,相关结果见图2。虽然谱图中未显示实验数据(由BEH颗粒填充的色谱柱相关数据),但仍可发现以纯甲醇或含甲酸的甲醇作为辅助溶剂时,所有色谱柱的性能表现均较差。另外,对于所有色谱柱,其分离性能与BEH色谱柱类型,使用0.2%氢氧化铵作为添加剂与仅使用甲醇或
色谱分析中的校正因子与对称因子是不是一回事
1 色谱峰对称性不对称因子(Asymmetry, As for short)和USP拖尾因子(Tailing factor,Tf for short)均可用于衡量色谱峰的对称性,不对称因子的说法更准确,因为色谱峰存在前延、完美对称、拖尾三种形态。一般来说,制药行业以USP拖尾因子作为评测标准,而其他
色谱硅胶的孔径及用途
Kromasil柱Kromasil是瑞典AKZO NOBEL公司生产的高性能硅胶基质液相色谱柱填料品牌。Kromasil是一种高纯度球形硅胶填料,金属杂质含量极低,减少了有些金属螯合物在硅胶基质上的络合作用。Kromasil硅胶的表面由独特的硅羟基基团组成,硅烷的覆盖率高,在较高的或较低的PH条件下
最强实用攻略-|-方法开发时,如何选择-C18-色谱柱?
在色谱方法开发过程中,分离度、柱效、峰形是考察色谱柱选择性是否合适的主要性能指标。 方法开发中的分离度根据分离度(Rs)公式,分离度的影响因素主要有柱效(N)、选择性(α)和保留因子(或称容量因子,k):(公式 1)公式1作为分离度改善的理论基础。通常,方法开发过程中,通过提高化合物保留 (k)、提
反相色谱柱的使用方法
反相柱主要是以硅胶为基质,在其表面键合十八烷基官能团(ODS)的非极性填料。也有无定型和球型之分。常用的其他的反相填料还有键合C8、C4、C2、苯基等,其颗粒粒径在3—10μm之间。反相柱固定相稳定,应用广泛,可使用多种溶剂。 反相色谱柱的使用方法: 1.先用正己烷-乙腈(99:1)以0.5ml/m
反相色谱柱的使用方法
反相柱主要是以硅胶为基质,在其表面键合十八烷基官能团(ODS)的非极性填料。也有无定型和球型之分。常用的其他的反相填料还有键合C8、C4、C2、苯基等,其颗粒粒径在3—10μm之间。反相柱固定相稳定,应用广泛,可使用多种溶剂。 反相色谱柱的使用方法: 1.先用正己烷-乙腈(99:1)以0.5ml/m
最新液相色谱柱知识分享和选择技巧
现代高效液相色谱分析中,色谱柱的选择直接影响了分离效果的好坏,选择合适的色谱柱可以缩短方法开发所需的时间,并且使方法更具稳定性。但是现在市场上色谱柱种类繁多,不同类型的色谱柱分离对象不同,因此,要做合适的选择,必须对此有一定的认识和了解。色谱柱参数 物理性质:柱长,内径,如250*4.6mm。一般
如何选择液相色谱柱
由于篇幅的原因色谱柱相关能查阅到的基础理论本文就不予介绍,本文阐述的内容主要是本人在分析实际工作中选择液相色谱柱的心得体会,个人之见,难免偏颇,如有不足,敬请指正。一、色谱柱参数及其意义选择色谱柱时应考虑不同色谱柱参数的影响,以下内容对色谱柱的参数进行分析。1、色谱柱尺寸较长的色谱柱组分保留较强,运
高效液相色谱法检测表面活性剂中聚乙二醇的含量
一、范围 本标准规定了用高效液相色谱法测定聚乙氧基化非离子表面活性剂中聚乙二醇(PEG)的方法该标准适用于测定聚乙氧基化脂肪醇和聚乙氧基化烷基酚中聚乙二醇的含量。 二、原理 采用c18硅胶键合相色谱柱,以纯甲醇或甲醇/水混合溶剂为流动相,采用反相高效液相色谱法分离醇醚类非离