冷冻组织切片制作
实验试剂液氮,干冰,1%明胶,4%多聚甲醛,PBS,含1%NP-40的PBS,3%BSA/PBS稀释抗体,辣根过氧化物酶标记的二抗,DAB/金属盐试剂,3%过氧化氢,0.3%(W/V)氯化镍贮存液,Harris苏木精,乙醇实验设备载玻片,Whatman 1#滤纸,低倍光学显微镜实验材料未受损伤的组织实验步骤1. 将未受损伤的组织切剖成小样本,约lcmXIcmX0.4cm。2. 将标本放在卡片的一端。标记该卡片,将带有标本的一端浸入液氮中。60s后,取出标本并放在干冰上。修剪卡片,使其大小刚好比组织块稍大些,转入预冷的(-70℃)带有标记的小瓶中。3. 切片前,用1%明胶包被洁净的载玻片。加热至50℃使明胶溶于水中,冷却,加入0.02%叠氮钠。将玻片浸入明胶溶液中30s,取出,自然干燥。4. 按照仪器使用说明书,用低温恒温器制备冷冻切片。通常切片厚度在5-10gm之间。用包被过的载玻片收集切片。5. 让切片自然干燥。浸入新鲜配制的......阅读全文
冷冻切片技术实验及冷冻切片机的基本操作
实验目的1 掌握冷冻切片的方法2 掌握冷冻切片的用途实验原理 冷冻切片是借助低温使组织冻结达到一定的硬度并通过冰起支撑作用来进行切片的一种方法。速冻 可减小冰晶直径,避免组织细胞损伤。制冷 压缩机佛里昂制冷、半导体温差电制冷 实验材料 新鲜动物肝脏实验方法 1 准备 将仪器 打开,样品台温度调至-4
显微冷冻切片机的使用和大(小)鼠脑组织切片操作实验
实验材料 大小鼠大脑试剂、试剂盒 手术器械 显微冷冻切片机 包埋剂仪器、耗材 大小鼠立体图谱实验步骤 1. 安装刀具,移上安全杆。调整切片机温度到-20 ℃((右手边up 和down 二个按钮调节, up调高温度, down,降低温度)。 2. 从-80 ℃冰箱取出脑组织在切片机或-20 ℃冰箱
显微冷冻切片机的使用和大(小)鼠脑组织切片操作实验
冷冻切片机可以用于:(2)切制薄而均匀的组织片;(2)组织用坚硬的石蜡或其他物质支持,每切一次借切片厚度器自动向前(向刀的方向)推进所需距离,厚度器的梯度通常为1微米。实验方法原理切制石蜡包埋的组织时,由于与前一张切片的蜡边粘着,而制成多张切片的切片条。实验材料大小鼠大脑试剂、试剂盒手术器械 显微冷
显微标本的制作切片徒手
切片在检验工作中,此法最常用,操作简便,迅速,制成的切片保持其细胞内含物的固有形态,便于进行各种显微化学反应观察4.1.2.1 徒手切片法切片 一手持刀片,另一手拇指和食指夹持样品,中指托着样品的底部,使样品略高出食、拇二指;肘关节应固定,使样品的切面保持水平,刀口向内并使刀刃自前向后切削,
冷冻切片的应用介绍
(1)在手术进行中,突然发现病人的病变与原诊断,原定手术方案不相符合,或者怀疑时,需要病理确定。(2)了解淋巴结内是否有转移的肿瘤细胞,或者转移的程度,以利于确定是否需要彻底扫除淋巴结或者其它的治疗措施。(3)对于已确定为恶性肿瘤的患者,则需要了解其手术范围是否足够,上下切缘是否有残存的肿瘤组织。(
冷冻切片仪器应用介绍
以Shandon As 620 E型恒温箱冷冻切片机为例,该机的箱面上有电子控制板,装有即时冷冻键和除霜键,启动即时冷冻键,机器马上进行工作状态,并可持续10mins。启动即时除霜键,可将工作间顶部后面的制冷栅上的霜除掉,并可持续15mins。有照明键一个,启动该键可照明工作间,有利工作及观察组织的
冷冻超薄切片术
中文名称冷冻超薄切片术英文名称cryoultramicrotomy;ultracryotomy定 义将低温冷冻标本在低温超薄切片机中制成供电镜观察使用的超薄切片的技术。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)
什么是组织切片
这是组织胚胎学和病理学检查的一个专业称呼。先通俗的解释一下什么叫组织胚胎学和病理学检。比如身上哪里长了包块、硬结、疙瘩、痣,反正就是原来没有,现在有了,而且不正常时,医生就会建议切一点,或者用针穿刺一点用来做检查,这个检查就叫病理学检查;而科学家为了研究动植物的微观结构,比如想看看正常的皮肤细胞是长
组织切片Masson染色
Masson染色是利用两到三种阴离子染色液对组织中的纤维和炎性因子着色的染色方法,染色后可使胶原纤维、粘液、软骨呈蓝色,肌纤维、胞浆呈红色,细胞核呈蓝黑色 一、实验用品 组织蜡块、苏木素染液、盐酸酒精分化液、丽春红酸性复红液、苯胺蓝染液、1%磷钼酸、2%冰醋酸、0.2%冰醋酸、梯度乙醇、二甲
石蜡切片术的制作过程
光学显微标本的制作技术【实验目的】了解光学显微镜切片制作技术的基本方法步骤。【实验原理】采用光学显微镜研究一般生物体的内部结构,在自然状态下是无法观察清楚的,多数动、植物材料都必须经过某种处理,将组织分离成单个细胞或薄片,光线才能通过细胞。为了适应这个需要,就产生了光学显微镜制片技术。光学显微镜的制
石蜡切片与冷冻切片的区别是什么
1、从一抗的选择方面来看。有的一抗既能做石蜡切片又能做冰冻切片,而有的一抗只能做冰冻切片,关键取决于所要检测的抗原稳定性,有的抗原不稳定,经过组织固定,脱水、透明、浸蜡、包埋、脱蜡等一系列的做石蜡切片的步骤,所检测的抗原易被破坏,这时只能用冰冻切片来做,检测这类抗原的一抗只能做冰冻切片,而那些稳定的
石蜡切片与冷冻切片的区别是什么
1、从一抗的选择方面来看。有的一抗既能做石蜡切片又能做冰冻切片,而有的一抗只能做冰冻切片,关键取决于所要检测的抗原稳定性,有的抗原不稳定,经过组 织固定,脱水、透明、浸蜡、包埋、脱蜡等一系列的做石蜡切片的步骤,所检测的抗原易被破坏,这时只能用冰冻切片来做,检测这类抗原的一抗只能做冰冻切片, 而那些稳
什么是冷冻切片术?
是一种在低温条件下使组织快速冷却到一定硬度,然后进行切片的方法。因其制作过程较石蜡切片快捷、简便,而多应用于手术中的快速病理诊断。冷冻切片的种类较多,有低温恒冷箱冷冻切片法,二氧化碳冷冻切片法,甲醇循环制冷冷冻切片法等。这些方法,随着时代的变迁,科技的发展,许多年前被认为是非常重要的技术,也逐步被淘
冷冻切片术技术简介
是一种在低温条件下使组织快速冷却到一定硬度,然后进行切片的方法。因其制作过程较石蜡切片快捷、简便,而多应用于手术中的快速病理诊断。冷冻切片的种类较多,有低温恒冷箱冷冻切片法,二氧化碳冷冻切片法,甲醇循环制冷冷冻切片法等。这些方法,随着时代的变迁,科技的发展,许多年前被认为是非常重要的技术,也逐步被淘
冷冻超薄切片原理和使用
冷冻超薄切片技术是一种为了研究更接近于生物生活状态结构和功能而发展起来的电镜样品制备技术。它是把样品进行冷冻固定后,进行超薄切片,省去了经典超薄切片法的长时间的固定、脱水和也埋等处理。样励在切片前后,不经过强烈的化学处理,约胞结构能得到很好的保存;尤其是可溶性成分小会被抽提,使得电镜图像更接近于生物
快速了解冷冻含水超薄切片
冷冻超薄切片技术是在光学显微冷冻切片和电镜超薄切片的基础上发展起来的。由于常规超薄切片技术中应用化学固定、有机溶剂脱水、树脂包埋等一系列处理,均可使生物样品受到物理和化学性损伤,引起组织和细胞内蛋白质分子变性,大部分可溶性成分及某些生物大分子物质被抽提或发生移位。为了弥补这些缺陷,人们创造了冷冻
植物组织化学显微镜标本片制作方法_石蜡切片法
实验方法原理石蜡切片技术是显微技术上最重要最常用的一种方法。其优点在于①应用范围广,几乎适用于所有的植物材料;②能将材料切成厚薄均一的切片,较清楚地显现细胞、组织的细微结构;③能切成连续蜡带,可观察细胞和组织的动态发生及层次变化过程;④切片可以长期保存,便于以后观察比较。缺点是:操作程序比较复杂,需
植物组织化学显微镜标本片制作方法_超薄切片技术
实验材料植物组织试剂、试剂盒包埋剂仪器、耗材切片机实验步骤1 取材:用于固定的材料要求切割成 1mm3而大小的小块。太大固定液不易透入,造成材料内外固定不均;太小则材料受损伤的比率增高。取材时应注意:由于取材时要求切的组织块很小,组织受损伤的比例相当大,这无疑会引起细胞代谢的巨大变化,因此,切取后的
植物组织化学显微镜标本片制作方法_徒手切片法
实验方法原理徒手切片法是指手拿刀片,将新鲜材料或预先固定好的材料切成薄片,不经染色或经简单染色,制成水装片后进行临时观察,必要时经镜检后可选择好的薄片经过脱水与染色等制片步骤,制成永久玻片标本供长期使用。此方法的优点是不需要复杂的设备,方法简使,制片迅速,而且能观察到植物组织的天然色泽和活体结构,常
组织病理实验_冰冻切片
组织病理实验广泛应用于生物学、解剖学、病理学、肿瘤学、法医学、临床诊断学等实验方法原理冰冻切片是指将组织在冷冻状态下直接用切片机切片。它实际上是以水为包埋剂,将组织进行冰冻至坚硬后切片的。在冰冻切片前组织不经过任何化学药品处理或加热过程,大大缩短了制片时间。同时,由于此法不需要经过脱水、透明和浸蜡等
如何简单制作生物显微镜切片
显微镜生物切片技术 显微镜生物切片技术内 容:一、实验目的掌握徒手切片技术;熟悉在光学显微镜下植物组织结构的观察二、实验原理 徒手切片法是用手直接握住小刀片,把选用的待观察的生物组织或器官切成薄片,以便于在生物显微镜下观察。 内 容: 掌握徒手切片技术;熟悉在光学显微镜下植物组织结构的观察
冰冻切片的制作技巧及心得(一)
下面发一个有关冰冻切片制作的资料,来自于国外病理医生的经验和心得,现翻译过来供大家参考,欢迎提出不同的见解。冰冻切片技术1.从锋利的刀片开始我发现使用新的锋利的刀片时常常做出高质量的片子。我觉得在医疗场合中某些尽量省钱的做法显得有些因小失大。一般我对每位患者的标本都使用一组新的刀片,当片子的质量开始
HE染色石蜡切片制作的基本过程
HE染色石蜡切片制作的基本过程:1、取材与固定从人或动物新鲜尸体上取下组织块(一般厚度不超过0.5厘米)投入预先配好的固定液中(10%福尔马林,Bouin氏固定液等)使组织、细胞的蛋白质变性凝固,以防止细胞死后的自溶或细菌的分解,从而保持细胞本来的形态结构。2、脱水透明一般用由低浓度到高浓度酒精作脱
显微镜切片标本的制作步骤
显微镜切片标本的制作步骤,第一步准备:用洁净的纱布把载玻片和盖玻片擦拭干净。把载玻片放在实验台上,用吸管在载玻片的中央滴一滴清水。第二步制片,用镊子取材(如:从洋葱鳞片叶子内侧的表皮上,撕取一小块透明薄膜)。把材料(如:撕下的薄膜)浸入载玻片上的水滴中,用镊子把薄膜展平。用镊子夹起盖玻片,使它的一边
如何简单制作生物显微镜切片
显微镜生物切片技术 显微镜生物切片技术内 容:一、实验目的掌握徒手切片技术;熟悉在光学显微镜下植物组织结构的观察二、实验原理 徒手切片法是用手直接握住小刀片,把选用的待观察的生物组织或器官切成薄片,以便于在生物显微镜下观察。 内 容: 掌握徒手切片技术;熟悉在光学显微镜下植物组织结构的观察
石蜡切片制作过程有哪些步骤
石蜡切片操作步骤:1、取材2、固定3、脱水:30%--50%---70%(每步60分钟)---85%---95%--100%---100%(每步30钟)。4、透明:转入1/2二甲苯+1/2无水酒精混合液20ml透明1h,纯二甲苯20ml透明1h,再用纯二甲苯20ml透明40min,并回收各液。5、浸
关于病理切片制作的取材介绍
(1)病理切片— 材料新鲜:取材组织愈新鲜愈好,人体组织一般在离体后,动物组织在处死后迅速固定,以保证原有的形态学结构。 (2)病理切片— 组织块的大小:所取组织块较理想的体积为2.0cm×2.0cm×0.3cm,以使固定液能迅速而均匀地渗入组织内部,但根据制片材料和目的不同,组织块的较理想体
组织切片机切片边缘着色的原因分析
原因分析:a组织边缘与玻片粘贴不牢,边缘组织松脱漂浮在液体中,导致洗涤不彻底;b切片上滴加的试剂未充分覆盖组织,边缘的试剂容易首先变干,浓度较中心组织高而致染色深。解决措施:组织的前期处理应规范,试剂要充分覆盖组织,尽量避免选用坏死较多的组织。
组织切片机切片背景过深的原因分析
原因分析:a.漂洗不够;b.切片或涂片过厚;c.蛋白质封闭不够或所用血清溶血d.使用全血清抗体稀释不够;e.底物成色反应过久;解决措施:对一些新的或少用的抗体显色时进行监控,避免显色时间过长。
冷冻超薄切片术技术简介
中文名称冷冻超薄切片术英文名称cryoultramicrotomy;ultracryotomy定 义将低温冷冻标本在低温超薄切片机中制成供电镜观察使用的超薄切片的技术。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)